| 中文摘要 | 第12-17页 |
| Abstract | 第17-22页 |
| 第一章 文献综述 | 第23-34页 |
| 1 柑橘全爪螨的为害现状及抗药性问题 | 第23-24页 |
| 2 昆虫（螨）抗性机理的研究 | 第24-25页 |
| 3 谷胱甘肽S-转移酶的分类及命名 | 第25-27页 |
| 4 谷胱甘肽S-转移酶的结构及功能 | 第27页 |
| 5 外源性物质对昆虫（螨）谷胱甘肽硫转移酶的诱导 | 第27-28页 |
| 6 谷胱甘肽S-转移酶表达的特异性 | 第28-30页 |
| 7 谷胱甘肽S-转移酶与昆虫（螨）抗药性的关系 | 第30-32页 |
| 8 RNA干扰技术在蜱螨基因功能研究中的应用 | 第32-34页 |
| 引言 | 第34-37页 |
| 1. 研究背景及意义 | 第34-35页 |
| 2. 研究思路及总体框架 | 第35-37页 |
| 第二章 柑橘全爪螨抗药性监测 | 第37-43页 |
| 1 材料与方法 | 第37-38页 |
| 1.1 供试螨源 | 第37页 |
| 1.2 供试主要试剂和仪器 | 第37-38页 |
| 1.3 生物测定 | 第38页 |
| 1.4 数据分析 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 4 小结 | 第41-43页 |
| 第三章 柑橘全爪螨谷胱甘肽S-转移酶基因的克隆及序列分析 | 第43-61页 |
| 1 材料与方法 | 第43-50页 |
| 1.1 供试螨源 | 第43-44页 |
| 1.2 供试试剂 | 第44页 |
| 1.3 供试仪器 | 第44-45页 |
| 1.4 总RNA的提取 | 第45页 |
| 1.5 cDNA的合成 | 第45-47页 |
| 1.6 引物设计 | 第47-48页 |
| 1.7 PCR扩增 | 第48-49页 |
| 1.8 基因的克隆与测序 | 第49页 |
| 1.9 序列特征分析 | 第49-50页 |
| 1.10 系统发育分析 | 第50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-58页 |
| 2.1 柑橘全爪螨GSTs基因c DNA全长的获得及系统命名 | 第50-51页 |
| 2.2 柑橘全爪螨10个GSTs基因c DNA序列同源性分析 | 第51-53页 |
| 2.3 柑橘全爪螨10个GSTs基因c DNA序列特征分析 | 第53页 |
| 2.4 柑橘全爪螨10个GSTs基因系统发育分析 | 第53-58页 |
| 3 讨论 | 第58-59页 |
| 4 小结 | 第59-61页 |
| 第四章 柑橘全爪螨谷胱甘肽S-转移酶的原核表达及特性分析 | 第61-79页 |
| 1 材料与方法 | 第61-70页 |
| 1.1 供试材料 | 第61页 |
| 1.2 供试试剂 | 第61-62页 |
| 1.3 供试仪器 | 第62-63页 |
| 1.4 表达载体的构建 | 第63-65页 |
| 1.5 柑橘全爪螨GSTs重组蛋白的诱导表达 | 第65-66页 |
| 1.6 重组蛋白的纯化 | 第66页 |
| 1.7 SDS-PAGE检测 | 第66页 |
| 1.8 重组蛋白的Western blot检测 | 第66-67页 |
| 1.9 柑橘全爪螨GSTs重组蛋白活性测定 | 第67-68页 |
| 1.10 重组GSTs动力学参数的测定 | 第68页 |
| 1.11 温度和p H对重组GSTs催化活性的影响 | 第68-69页 |
| 1.12 柑橘全爪螨GSTs的离体抑制测定 | 第69页 |
| 1.13 柑橘全爪螨GSTs的过氧化物酶活性检测 | 第69-70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-75页 |
| 2.1 柑橘全爪螨GSTs的诱导表达及纯化 | 第70页 |
| 2.2 柑橘全爪螨重组GSTs的western blot检测 | 第70-71页 |
| 2.3 柑橘全爪螨GSTs的活性检测 | 第71-72页 |
| 2.4 温度和p H对柑橘全爪螨GSTs活性的影响 | 第72-73页 |
| 2.5 柑橘全爪螨GSTs的动力学参数 | 第73-74页 |
| 2.6 柑橘全爪螨GSTs的过氧化物酶活性 | 第74-75页 |
| 2.7 柑橘全爪螨GSTs活性的离体抑制 | 第75页 |
| 3 讨论 | 第75-77页 |
| 3.1 柑橘全爪螨重组GSTs的诱导表达及纯化 | 第75-76页 |
| 3.2 柑橘全爪螨GSTs的催化活性及其动力学参数 | 第76-77页 |
| 3.3 杀螨剂与重组GSTs的相互作用 | 第77页 |
| 4 小结 | 第77-79页 |
| 第五章 柑橘全爪螨谷胱甘肽S-转移酶基因的表达模式解析 | 第79-97页 |
| 1 材料与方法 | 第79-83页 |
| 1.1 供试螨源 | 第79页 |
| 1.2 供试试剂 | 第79页 |
| 1.3 供试仪器 | 第79-80页 |
| 1.4 柑橘全爪螨不同生长发育阶段螨源收集 | 第80页 |
| 1.5 药剂及温度胁迫处理 | 第80-81页 |
| 1.6 总RNA提取 | 第81页 |
| 1.7 第一链c DNA的合成 | 第81-82页 |
| 1.8 RT-q PCR引物设计 | 第82页 |
| 1.9 RT-q PCR | 第82-83页 |
| 1.10 数据分析 | 第83页 |
| 2 结果和分析 | 第83-89页 |
| 2.1 RT-q PCR产物熔解曲线和引物扩增效率 | 第83-84页 |
| 2.2 柑橘全爪螨GSTs基因在不同发育阶段的表达模式 | 第84-85页 |
| 2.3 柑橘全爪螨GSTs基因应对药剂胁迫的表达模式 | 第85-88页 |
| 2.4 柑橘全爪螨GSTs基因应对高温胁迫的表达模式 | 第88-89页 |
| 3 讨论 | 第89-94页 |
| 3.1 柑橘全爪螨GSTs的时空表达模式 | 第90-92页 |
| 3.2 柑橘全爪螨GSTs对药剂胁迫的响应 | 第92-94页 |
| 3.3 柑橘全爪螨GSTs对高温胁迫的响应 | 第94页 |
| 4 小结 | 第94-97页 |
| 第六章 柑橘全爪螨谷胱甘肽S-转移酶的解毒代谢功能分析 | 第97-125页 |
| 1 材料与方法 | 第97-104页 |
| 1.1 供试螨源 | 第97页 |
| 1.2 主要试剂 | 第97-98页 |
| 1.3 主要仪器 | 第98-99页 |
| 1.4 柑橘全爪螨总RNA的提取 | 第99页 |
| 1.5 第一链c DNA的合成 | 第99-100页 |
| 1.6 RT-qPCR | 第100页 |
| 1.7 RNAi | 第100-102页 |
| 1.8 药剂代谢测定 | 第102页 |
| 1.9 MDA含量检测 | 第102-103页 |
| 1.10 数据分析 | 第103-104页 |
| 2 结果与分析 | 第104-115页 |
| 2.1 柑橘全爪螨GSTs与阿维菌素抗药性的关系 | 第104-106页 |
| 2.2 柑橘全爪螨GSTs与甲氰菊酯抗药性的关系 | 第106-115页 |
| 3 讨论 | 第115-123页 |
| 3.1 Pc GSTm5与阿维菌素抗药性的关系 | 第115-117页 |
| 3.2 介导柑橘全爪螨对甲氰菊酯的抗性机理 | 第117-120页 |
| 3.3 Pc GSTd1参与对抗甲氰菊酯诱导的氧化胁迫 | 第120-121页 |
| 3.4 甲氰菊酯在柑橘全爪螨体内的解毒代谢途径 | 第121-123页 |
| 4 小结 | 第123-125页 |
| 第七章 主要结果和结论、创新点及研究展望 | 第125-129页 |
| 1 主要结果和结论 | 第125-127页 |
| 1.1 监测掌握了了柑橘全爪螨田间种群的抗药性水平 | 第125页 |
| 1.2 克隆获得了10个柑橘全爪螨GSTs基因的c DNA全长序列 | 第125页 |
| 1.3 分析明确了柑橘全爪螨GSTs基因重组蛋白的酶学特性 | 第125页 |
| 1.4 系统解析了柑橘全爪螨GSTs基因在不同发育阶段的表达模式 | 第125-126页 |
| 1.5 阐明了柑橘全爪螨GSTs基因应对药剂和高温胁迫的响应模式 | 第126页 |
| 1.6 柑橘全爪螨Pc GSTm5可能介导柑橘全爪螨对阿维菌素的抗药性 | 第126-127页 |
| 1.7 筛选鉴定出一批参与柑橘全爪螨甲氰菊酯抗性的候选基因 | 第127页 |
| 1.8 阐明了Pc GSTd1与柑橘全爪螨甲氰菊酯抗药性的关系 | 第127页 |
| 2 创新点 | 第127页 |
| 3 展望 | 第127-129页 |
| 参考文献 | 第129-147页 |
| 在读期间发表论文目录及参研课题情况 | 第147-149页 |
| 发表论文目录 | 第147-148页 |
| 参研课题情况 | 第148-149页 |
| 致谢 | 第149-152页 |
