| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-14页 |
| 第2章 稳定转染细胞株构建 | 第14-30页 |
| 2.1 引言 | 第14-15页 |
| 2.2 主要仪器与材料 | 第15-17页 |
| 2.2.1 仪器 | 第15-16页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.3 实验方法 | 第17-19页 |
| 2.3.1 主要溶液配制 | 第17-18页 |
| 2.3.2 质粒pcDNA3.1、pcDNA3.1(+)-DAXX、siRNA-DAXX、siRNA、siRNA-PTEN的扩增与提取 | 第18-19页 |
| 2.4 VSMC培养与转染 | 第19-20页 |
| 2.4.1 细胞培养 | 第19页 |
| 2.4.2 稳定转染VSMC | 第19-20页 |
| 2.5 RT-PCR检测稳定转染细胞株内DAXX mRNA变化 | 第20-22页 |
| 2.5.1 总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.5.2 RNA逆转录（cDNA的合成） | 第21-22页 |
| 2.5.3 PCR扩增： | 第22页 |
| 2.5.4 PCR产物鉴定 | 第22页 |
| 2.6 Western-blot 检测 DAXX 蛋白的表达 | 第22-26页 |
| 2.6.1 VSMC蛋白提取 | 第22-23页 |
| 2.6.2 蛋白含量测定 | 第23页 |
| 2.6.3 进行Western-blot实验 | 第23-26页 |
| 2.7 统计学方法 | 第26页 |
| 2.8 实验结果 | 第26-28页 |
| 2.8.1 稳定转染pcDNA3.1(+)-DAXX、siRNA-DAXX对VSMC内DAXX的mRNA、蛋白表达的影响 | 第26-28页 |
| 2.9 小结 | 第28-30页 |
| 第3章 DAXX对于VSMC增殖的影响 | 第30-36页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 仪器与材料 | 第30页 |
| 3.3 实验方法 | 第30-32页 |
| 3.3.1 主要溶液配制 | 第30-31页 |
| 3.3.2 MTT检测细胞的活力 | 第31页 |
| 3.3.3 流式细胞术检测细胞周期 | 第31-32页 |
| 3.4 结果 | 第32-34页 |
| 3.4.1 MTT检测DAXX对于VSMC增殖的影响 | 第32页 |
| 3.4.2 DAXX对于VSMC周期的影响 | 第32-34页 |
| 3.5 小结 | 第34-36页 |
| 第4章 DAXX对于PTEN/AKT信号通路的影响 | 第36-50页 |
| 4.1 DAXX对于PTEN表达的影响 | 第36-42页 |
| 4.1.1 引言 | 第36页 |
| 4.1.2 仪器与材料 | 第36-37页 |
| 4.1.3 实验方法 | 第37-39页 |
| 4.1.4 结果 | 第39-41页 |
| 4.1.5 小结 | 第41-42页 |
| 4.2 DAXX对于AKT表达的影响 | 第42-50页 |
| 4.2.1 引言 | 第42页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.2.3 结果 | 第43-47页 |
| 4.2.4 小结 | 第47-50页 |
| 第5章 实验讨论 | 第50-52页 |
| 第6章 结论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 综述 | 第58-68页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 作者攻读学位期间的科研成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
