| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 前言 | 第10-21页 |
| ·植物基因启动子分类 | 第10-12页 |
| ·组成型启动子 | 第10页 |
| ·诱导型启动子 | 第10-11页 |
| ·组织特异型启动子 | 第11-12页 |
| ·植物基因启动子的克隆 | 第12-15页 |
| ·利用基因组文库筛选启动子 | 第12页 |
| ·利用启动子探针质粒载体筛选启动子 | 第12页 |
| ·利用启动子捕获方法分离和鉴别启动子 | 第12-13页 |
| ·常规PCR技术 | 第13页 |
| ·反向PCR技术 | 第13页 |
| ·接头PCR技术 | 第13-14页 |
| ·热不对称交错式PCR技术 | 第14-15页 |
| ·启动子的分析与鉴定 | 第15-17页 |
| ·生物信息学分析与预测 | 第15-16页 |
| ·实验方法功能分析 | 第16-17页 |
| ·种子特异启动子研究概况 | 第17-20页 |
| ·种子特异启动子序列结构特点 | 第17页 |
| ·种子特异性启动子的顺式调控元件 | 第17-20页 |
| ·种子特异启动子相关研究报道 | 第20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-34页 |
| ·试验材料 | 第21-26页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌株 | 第21页 |
| ·PCR引物 | 第21-22页 |
| ·质粒 | 第22-23页 |
| ·试剂 | 第23-24页 |
| ·主要实验仪器 | 第24页 |
| ·试剂的配制 | 第24-26页 |
| ·实验方法 | 第26-34页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第26页 |
| ·引物设计及合成 | 第26-27页 |
| ·PCR扩增反应 | 第27-29页 |
| ·电泳检测及目的条带回收 | 第29-30页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·连接及转化 | 第31页 |
| ·质粒提取 | 第31-32页 |
| ·质粒酶切鉴定 | 第32页 |
| ·基因序列测序 | 第32页 |
| ·PEG介导绿豆叶片原生质体瞬时表达 | 第32-34页 |
| 3 结果及讨论 | 第34-51页 |
| ·绿豆基因组DNA提取结果 | 第34-35页 |
| ·启动子序列的克隆 | 第35-39页 |
| ·引物设计及合成 | 第35-37页 |
| ·基因组步移法克隆启动子片段 | 第37-39页 |
| ·序列测定与分析 | 第39-43页 |
| ·8SGα序列的测定与分析 | 第39-40页 |
| ·8SGα’序列的测定与分析 | 第40-41页 |
| ·8SGαβ序列的测定与分析 | 第41页 |
| ·8SG启动子顺式作用元件生物学功能分析及统计 | 第41-43页 |
| ·表达载体的构建 | 第43-50页 |
| ·pBI-8SGα-omega-GFP载体的构建 | 第43-45页 |
| ·pBI-8SGα’-omega-GFP载体的构建 | 第45-47页 |
| ·pBI-8SGβ-omega-GFP载体的构建 | 第47-50页 |
| ·原生质体内的瞬时表达 | 第50-51页 |
| 4. 讨论与展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 附录 | 第62-69页 |
| 附录1:PMD19-T vector图谱 | 第62页 |
| 附录2:8SGa序列图 | 第62-63页 |
| 附录3:8SG α’序列图 | 第63页 |
| 附录4:8SGp序列图 | 第63-64页 |
| 附录5:pMD19-8SGα图谱 | 第64页 |
| 附录6:pMD19-8SG α’图谱 | 第64-65页 |
| 附录7:pMD19-8SGβ图谱 | 第65页 |
| 附录8:pMD19-8SGα-omega图谱 | 第65-66页 |
| 附录9:pMD19-8SGα’-omega图谱 | 第66页 |
| 附录10:pMD19-8SGβ-omega图谱 | 第66-67页 |
| 附录11:pBI-GFP图谱 | 第67页 |
| 附录12:pBI-8SGα-omega-GFP图谱 | 第67-68页 |
| 附录13 pBI-8SG α’-omega-GFP图谱 | 第68页 |
| 附录14:pBI-8SGβ-omega-GFP图谱 | 第68-69页 |
| 在学期间发表论文清单 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
