| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表格 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1.1 微藻油脂合成与调控的生化及基因工程研究进展 | 第13-20页 |
| 1.1.1 生理生化调节 | 第13-16页 |
| 1.1.2 微藻油脂代谢的基因工程 | 第16-19页 |
| 1.1.3 展望 | 第19-20页 |
| 1.2 转录因子NF-Y研究概况 | 第20-22页 |
| 1.2.1 NF-Y的功能 | 第20-21页 |
| 1.2.2 LEC1型转录因子的研究 | 第21-22页 |
| 1.3 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 1.4 技术路线 | 第23-25页 |
| 第二章 椭圆小球藻NF-YA/B/C基因克隆与功能研究 | 第25-65页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-29页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.2.2 菌株和质粒 | 第25-26页 |
| 2.2.3 工具酶和生化试剂 | 第26页 |
| 2.2.4 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2.5 抗生素的制备 | 第27页 |
| 2.2.6 培养基制备 | 第27-29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-44页 |
| 2.3.1 椭圆小球藻的培养 | 第29页 |
| 2.3.2 椭圆小球藻总RNA的提取 | 第29页 |
| 2.3.3 椭圆小球藻cDNA的合成 | 第29-30页 |
| 2.3.4 椭圆小球藻NF-YA、NF-YB和NF-YC的克隆 | 第30-31页 |
| 2.3.5 扩增产物连接到中间载体 | 第31页 |
| 2.3.6 热激转化大肠杆菌 | 第31-32页 |
| 2.3.7 重组克隆的鉴定、保存 | 第32页 |
| 2.3.8 质粒提取 | 第32-33页 |
| 2.3.9 基因序列分析及进化树的构建 | 第33页 |
| 2.3.10 椭圆小球藻Ce NF-YA、CeNF-YB和CeNF-YC在酵母中的功能验证 | 第33-37页 |
| 2.3.11 椭圆小球藻CeNF-YA、Ce NF-YB和CeNF-YC基因在拟南芥中的鉴定 | 第37-41页 |
| 2.3.12 椭圆小球藻Ce NF-YA、CeNF-YB和CeNF-YC基因在烟草细胞中的亚细胞定位 | 第41-42页 |
| 2.3.13 用双分子荧光互补实验验证椭圆小球藻CeNF-YA、CeNF-YB和CeNF-YC之间的互作 | 第42-44页 |
| 2.4 结果与分析 | 第44-61页 |
| 2.4.1 椭圆小球藻CeNF-YA、CeNF-YB和CeNF-YC基因克隆 | 第44页 |
| 2.4.2 椭圆小球藻CeNF-YA、CeNF-YB和CeNF-YC的生物信息学分析 | 第44-52页 |
| 2.4.3 椭圆小球藻CeNF-YA、CeNF-YB和CeNF-YC在酵母（INVSc1）中的功能鉴定 | 第52-54页 |
| 2.4.4 CeNF-YA、CeNF-YB和CeNF-YC在拟南芥中的功能鉴定 | 第54-57页 |
| 2.4.5 转基因油菜阳性植株的鉴定 | 第57-58页 |
| 2.4.6 椭圆小球藻pHZM27-CeNF-YA、pHZM27-CeNF-YB和pHZM27-CeNF-YC蛋白的亚细胞定位 | 第58页 |
| 2.4.7 椭圆小球藻CeNF-YA、CeNF-YB和CeNF-YC蛋白之间的互作 | 第58-61页 |
| 2.5 讨论 | 第61-63页 |
| 2.5.1 CeNF-YA、CeNF-YB和CeNF-YC序列结构特点与进化 | 第61-62页 |
| 2.5.2 椭圆小球藻CeNF-YA、CeNF-YB和CeNF-YC功能及其应用潜力探讨 | 第62-63页 |
| 2.6 结论 | 第63-65页 |
| 第三章 不同浓度Fe~(2+) 对椭圆小球藻油脂积累及与油脂合成相关关键基因的表达的影响 | 第65-75页 |
| 3.1 引言 | 第65页 |
| 3.2 实验材料 | 第65-66页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第65页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第65页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第65-66页 |
| 3.3 实验方法 | 第66-68页 |
| 3.3.1 椭圆小球藻不同浓度Fe~(2+) 处理 | 第66页 |
| 3.3.2 对不同浓度Fe~(2+) 处理的椭圆小球藻生长曲线的测定 | 第66页 |
| 3.3.3 椭圆小球藻总脂肪酸含量的测定 | 第66页 |
| 3.3.4 实时荧光定量PCR检测不同处理下相关基因的表达 | 第66-68页 |
| 3.4 结果与分析 | 第68-72页 |
| 3.4.1 不同处理条件下小球藻的生长情况 | 第68-69页 |
| 3.4.2 不同浓度Fe~(2+) 处理椭圆小球藻脂肪酸成分测定与分析 | 第69-70页 |
| 3.4.3 不同浓度Fe~(2+) 处理下油脂代谢过程中相关基因的表达情况 | 第70-72页 |
| 3.5 讨论 | 第72-74页 |
| 3.5.1 Fe~(2+) 对椭圆小球藻生长状况的影响 | 第72页 |
| 3.5.2 Fe~(2+) 对椭圆小球藻油脂积累的影响 | 第72-73页 |
| 3.5.3 Fe~(2+) 对椭圆小球藻油脂积累相关基因表达情况分析 | 第73-74页 |
| 3.6 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-85页 |
| 附录A CeNF-Y与其它物种NF-Y相似性比较 | 第85-87页 |
| 附录B NF-Y亚基结构示意图 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 攻读学位期间发表学术论文目录 | 第91-92页 |
