| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-40页 |
| 1.文昌鱼及其形体结构 | 第14-21页 |
| 2.甲状腺激素(THs)和甲状腺激素受体(TR) | 第21-24页 |
| 3.甲状腺与肝脏疾病的关系以及甲状腺-肝轴的研究进展 | 第24-26页 |
| 4.CAAT区/增强子结合蛋白(C/EBP)的研究进展 | 第26-31页 |
| 5.卵黄蛋白原(Vg)和卵黄高磷蛋白(Pv)的研究概况 | 第31-35页 |
| 6.蛋白抑菌机制的研究情况 | 第35-36页 |
| 7.本文的研究目的及技术路线 | 第36-40页 |
| 第二章 文昌鱼类脊椎动物甲状腺-肝脏轴的证明 | 第40-99页 |
| 1 前言 | 第40-41页 |
| 2 材料和方法 | 第41-74页 |
| ·实验材料 | 第41-45页 |
| ·实验方法 | 第45-74页 |
| ·总RNA的制备及cDNA的获得 | 第45-48页 |
| ·文昌鱼C/EBPα/β基因和TR基因开放阅读框的获得 | 第48-53页 |
| ·Real-time PCR检测BbC/EBPα/β和BbTR在不同组织的表达情况 | 第53-55页 |
| ·切片原位杂交分析BbTR基因在成体文昌鱼内柱中的表达区域 | 第55-62页 |
| ·Real-time PCR检测文昌鱼BbC/EBPα/β受T3、T4和TRIAC作用的表达情况 | 第62-63页 |
| ·重组BbLBD(TR的配体结合域)的表达和纯化 | 第63-73页 |
| ·T3、T4和TRIAC与重组BbLBD结合系数的测定 | 第73-74页 |
| ·文昌鱼内柱中T3和T4含量的测定 | 第74页 |
| 3 结果 | 第74-97页 |
| ·文昌鱼总RNA的提取及cDNA的获得 | 第74-75页 |
| ·BbC/EBPα/β基因和BbTR基因ORF的扩增 | 第75-76页 |
| ·获得的BbC/EBPα/β基因和BbTR基因的序列分析 | 第76-79页 |
| ·BbC/EBPα/β和BbTR在不同组织的表达情况 | 第79-83页 |
| ·切片原位杂交分析BbTR基因在成体文昌鱼内柱中的表达区域 | 第83-86页 |
| ·BbC/EBPα/β受T3、T4和TRIAC作用的在肝盲囊中的表达 | 第86-88页 |
| ·重组BbLBD(TR的配体结合域)的表达和纯化 | 第88-92页 |
| ·T3、T4和TRIAC与重组BbLBD结合系数的测定 | 第92-96页 |
| ·文昌鱼内柱中T3和T4含量的测定 | 第96-97页 |
| 4 讨论 | 第97-99页 |
| 第三章 斑马鱼卵黄高磷蛋白免疫作用研究 | 第99-138页 |
| 1.前言 | 第99-100页 |
| 2.材料和方法 | 第100-122页 |
| ·实验材料 | 第100-102页 |
| ·实验方法 | 第102-122页 |
| ·斑马鱼重组卵黄高磷蛋白(His-Pv)的获得 | 第102-108页 |
| ·重组蛋白His-Pv的抑菌活性检测 | 第108-109页 |
| ·重组卵黄高磷蛋白His-Pv抑菌作用方式 | 第109-114页 |
| ·寻找抑菌活性中心 | 第114-119页 |
| ·突变His-Pv与病原相关模式分子的结合 | 第119页 |
| ·斑马鱼卵发育不同时期Pv含量的检测 | 第119-121页 |
| ·免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)后检测胚胎匀浆液抑菌活性变化 | 第121-122页 |
| 3 结果 | 第122-136页 |
| ·确认卵黄高磷蛋白的核苷酸序列 | 第122页 |
| ·卵黄高磷蛋白(Pv)部分核酸序列的扩增 | 第122页 |
| ·重组表达载体的构建及诱导表达 | 第122-123页 |
| ·重组His-Pv融合蛋白的纯化与鉴定 | 第123-126页 |
| ·重组His-Pv蛋白的溶菌活性 | 第126-127页 |
| ·FITC-labeled His-Pv与各种菌的结合 | 第127-128页 |
| ·重组His-Pv蛋白与病原相关模式分子的结合 | 第128-130页 |
| ·重组蛋白His-Pv螯合铁离子的活性鉴定及铁对重组蛋白抑菌活性的影响 | 第130-131页 |
| ·N端切除法寻找His-Pv的抑菌活性中心 | 第131-133页 |
| ·点突变对His-Pv抑菌活性的影响 | 第133-134页 |
| ·突变His-Pv蛋白与病原相关模式分子的结合 | 第134-135页 |
| ·斑马鱼卵中存在Pv且含量随发育时期变化 | 第135页 |
| ·免疫共沉淀后胚胎匀浆液抑菌活性变化 | 第135-136页 |
| 4.讨论 | 第136-138页 |
| 结论 | 第138-140页 |
| 参考文献 | 第140-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
| 作者简历 | 第152页 |
| 发表的学术论文 | 第152页 |
