中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-10页 |
1 绪论 | 第10-15页 |
·研究背景 | 第10-13页 |
·骨髓间充质干细胞定向迁移的意义 | 第10页 |
·骨桥蛋白在机体受损部位的表达调节 | 第10-11页 |
·OPN 与细胞迁移 | 第11-12页 |
·OPN 促细胞迁移的相关分子机理 | 第12页 |
·细胞迁移与细胞硬度 | 第12-13页 |
·本文所关心的问题 | 第13页 |
·本文研究的目的、意义以及主要内容 | 第13-15页 |
·本文研究的目的和意义 | 第13页 |
·本文研究的主要内容 | 第13-15页 |
2 rMSCs 的原代分离培养 | 第15-20页 |
·引言 | 第15页 |
·实验材料 | 第15-16页 |
·实验动物 | 第15页 |
·主要仪器、耗材 | 第15页 |
·主要实验药品与试剂 | 第15-16页 |
·主要实验试剂的配制 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-17页 |
·rMSCs 的分离培养 | 第16-17页 |
·流式细胞仪检测细胞表面抗原 | 第17页 |
·实验结果 | 第17页 |
·rMSCs 的形态学观察 | 第17页 |
·rMSCs 表面抗原的表达 | 第17页 |
·讨论 | 第17-19页 |
·本章小结 | 第19-20页 |
3 Integrin β1 介导 OPN 促rMSCs 迁移 | 第20-36页 |
·引言 | 第20-21页 |
·实验材料 | 第21-24页 |
·主要仪器、耗材 | 第21页 |
·主要实验药品与试剂 | 第21-22页 |
·主要实验试剂的配制 | 第22-24页 |
·实验方法 | 第24-30页 |
·Transwell 检测细胞迁移 | 第24页 |
·MTT 法检测细胞增殖 | 第24-25页 |
·RT-PCR 检测基因表达变化 | 第25-27页 |
·Western 蛋白印迹检测蛋白表达变化 | 第27-29页 |
·统计分析 | 第29-30页 |
·实验结果 | 第30-34页 |
·OPN 促rMSCs 定向迁移 | 第30页 |
·OPN 提高integrin β1 基因表达水平 | 第30-32页 |
·OPN 提高integrin β1 蛋白表达量 | 第32-33页 |
·阻断integrin β1 抑制OPN 促细胞迁移 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
·本章小结 | 第35-36页 |
4 FAK/ERK 信号通路介导 OPN 促rMSCs 定向迁移 | 第36-45页 |
·引言 | 第36页 |
·实验材料 | 第36-37页 |
·主要仪器、耗材 | 第36页 |
·主要实验药品与试剂 | 第36-37页 |
·主要实验试剂的配置 | 第37页 |
·实验方法 | 第37页 |
·Transwell 细胞迁移实验 | 第37页 |
·Western 蛋白印迹检测蛋白表达变化 | 第37页 |
·统计分析 | 第37页 |
·实验结果 | 第37-42页 |
·OPN 激活FAK/ERK 信号通路 | 第37-38页 |
·PD98059 和PF-573228 抑制OPN 促rMSCs 定向迁移 | 第38-39页 |
·Integrin β1 介导OPN 激活FAK/ERK 信号通路 | 第39-42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
·本章小结 | 第44-45页 |
5 OPN 对rMSCs 力学性质的影响 | 第45-51页 |
·引言 | 第45-46页 |
·实验材料 | 第46页 |
·主要仪器、耗材 | 第46页 |
·主要实验药品与试剂 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-48页 |
·AFM 检测细胞杨氏模量 | 第46-48页 |
·统计分析 | 第48页 |
·实验结果 | 第48-49页 |
·OPN 降低rMSCs 的杨氏模量 | 第48-49页 |
·阻断integrin β1 受体和FAK/ERK 的激活抑制OPN 降低rMSCs 杨氏模量 | 第49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
·本章小结 | 第50-51页 |
6 结论与展望 | 第51-53页 |
·主要结论 | 第51页 |
·展望 | 第51-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
附录 | 第60页 |