| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 绪论 | 第14-39页 |
| 1.1 糖尿病的危害与防治 | 第14-19页 |
| 1.1.1 糖尿病的普遍性与危害 | 第14页 |
| 1.1.2 糖尿病的形成与类型 | 第14-15页 |
| 1.1.3 糖尿病的治疗 | 第15-17页 |
| 1.1.4 DPP-Ⅳ抑制剂 | 第17-19页 |
| 1.2 DPP-Ⅳ抑制肽的研究进展 | 第19-31页 |
| 1.2.1 DPP-Ⅳ抑制肽的原料来源 | 第19-22页 |
| 1.2.2 DPP-Ⅳ抑制肽的分离纯化与结构鉴定 | 第22-26页 |
| 1.2.3 DPP-Ⅳ抑制肽的活性评价 | 第26-31页 |
| 1.3 南极磷虾的资源特性 | 第31-37页 |
| 1.3.1 南极磷虾的资源捕捞量 | 第31-32页 |
| 1.3.2 南极磷虾的营养价值 | 第32-34页 |
| 1.3.3 南极磷虾中氟含量及其脱氟方法 | 第34-35页 |
| 1.3.4 南极磷虾的研究开发现状 | 第35-37页 |
| 1.3.5 制备DPP-Ⅳ抑制肽的可行性 | 第37页 |
| 1.4 本课题的立项依据及目的意义 | 第37页 |
| 1.5 主要研究内容及技术路线 | 第37-39页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第37-38页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第38-39页 |
| 2 南极磷虾DPP-Ⅳ抑制肽酶法制备工艺优化 | 第39-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第39页 |
| 2.1.1 原料与试剂 | 第39页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 2.2.1 南极磷虾蛋白酶解方法 | 第39-40页 |
| 2.2.2 DPP-Ⅳ抑制率测定 | 第40页 |
| 2.2.3 可溶性蛋白测定 | 第40页 |
| 2.2.4 单因素实验 | 第40页 |
| 2.2.5 酶解工艺优化 | 第40-41页 |
| 2.2.6 数据分析 | 第41页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第41-49页 |
| 2.3.1 单因素实验 | 第41-44页 |
| 2.3.2 响应面法优化酶解条件 | 第44-49页 |
| 2.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 3 南极磷虾DPP-Ⅳ抑制肽的分离纯化与结构鉴定 | 第50-64页 |
| 3.1 材料与方法 | 第50-51页 |
| 3.1.1 材料与试剂 | 第50页 |
| 3.1.2 仪器与设备 | 第50-51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-52页 |
| 3.2.1 DPP-Ⅳ抑制率的测定 | 第51页 |
| 3.2.2 酶解液的制备方法 | 第51页 |
| 3.2.3 酶解液脱氧 | 第51页 |
| 3.2.4 酶解产物的膜分离 | 第51页 |
| 3.2.5 氟含量的测定 | 第51-52页 |
| 3.2.6 Sephacryl S-100 凝胶装柱分离 | 第52页 |
| 3.2.7 RP-HPLC分离纯化 | 第52页 |
| 3.2.8 氨基酸组成的测定 | 第52页 |
| 3.2.9 质谱测定 | 第52页 |
| 3.2.10 数据分析 | 第52页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第52-63页 |
| 3.3.1 南极磷虾酶解物分离纯化DPP-Ⅳ抑制肽 | 第52-54页 |
| 3.3.2 氟含量的监测 | 第54-56页 |
| 3.3.3 Sephacryl S-100 凝胶柱分离纯化 | 第56页 |
| 3.3.4 RP-HPLC分离纯化 | 第56-57页 |
| 3.3.5 氨基酸组成分析结果 | 第57-58页 |
| 3.3.6 氨基酸序列鉴定 | 第58-63页 |
| 3.4 本章小结 | 第63-64页 |
| 4 斑马鱼模型的建立与DPP-Ⅳ抑制肽体内活性评价 | 第64-85页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第64-65页 |
| 4.1.1 材料与试剂 | 第64页 |
| 4.1.2 仪器与设备 | 第64-65页 |
| 4.2 实验方法 | 第65-67页 |
| 4.2.1 合成DPP-Ⅳ抑制肽的HPLC | 第65页 |
| 4.2.2 糖尿病斑马鱼模型的建立 | 第65页 |
| 4.2.3 DPP-Ⅳ抑制肽的喂养 | 第65页 |
| 4.2.4 指标评价方法 | 第65-67页 |
| 4.2.5 数据分析 | 第67页 |
| 4.3 结果与分析 | 第67-84页 |
| 4.3.1 合成DPP-Ⅳ抑制肽身份的印证 | 第67-73页 |
| 4.3.2 糖尿病斑马鱼模型评价 | 第73-76页 |
| 4.3.3 DPP-Ⅳ抑制肽的体内活性评价 | 第76-84页 |
| 4.4 本章小结 | 第84-85页 |
| 5 DPP-Ⅳ抑制肽与DPP-Ⅳ的作用机制 | 第85-97页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第85页 |
| 5.1.1 材料与试剂 | 第85页 |
| 5.1.2 仪器与设备 | 第85页 |
| 5.2 实验方法 | 第85-87页 |
| 5.2.1 DPP-Ⅳ抑制肽抑制率测定 | 第85页 |
| 5.2.2 DPP-Ⅳ抑制动力学研究 | 第85-86页 |
| 5.2.3 分子对接 | 第86-87页 |
| 5.2.4 数据分析 | 第87页 |
| 5.3 结果与分析 | 第87-96页 |
| 5.3.1 DPP-Ⅳ酶与DPP-Ⅳ抑制肽抑制类型的筛选 | 第87-90页 |
| 5.3.2 DPP-Ⅳ抑制肽与DPP-Ⅳ的分子对接 | 第90-96页 |
| 5.4 本章小结 | 第96-97页 |
| 6 南极磷虾酶解产物降血糖功效评价 | 第97-104页 |
| 6.1 材料与仪器 | 第97页 |
| 6.1.1 材料与试剂 | 第97页 |
| 6.1.2 仪器与设备 | 第97页 |
| 6.2 实验方法 | 第97-98页 |
| 6.2.1 糖尿病斑马鱼模型的建立 | 第97页 |
| 6.2.2 南极磷虾酶解产物的制备 | 第97-98页 |
| 6.2.3 3000-100Da酶解产物的喂养 | 第98页 |
| 6.2.4 数据分析 | 第98页 |
| 6.3 结果与分析 | 第98-103页 |
| 6.3.1 南极磷虾 3000-100Da酶解组分对糖尿病斑马鱼理化指标的影响 | 第98-100页 |
| 6.3.2 南极磷虾 3000-100Da酶解组分对糖尿病斑马鱼血糖相关基因表达水平的影响 | 第100-103页 |
| 6.4 本章小结 | 第103-104页 |
| 7 结论与展望 | 第104-106页 |
| 7.1 主要结论 | 第104页 |
| 7.2 展望 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 作者简介 | 第120-121页 |
| 导师简介 | 第121页 |
