| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 引言 | 第10-18页 |
| 第一部分 轮状病毒免疫原的制备 | 第18-30页 |
| 一 实验材料 | 第18-19页 |
| 1. 细胞系和毒株 | 第18页 |
| 2. 主要试剂及耗材 | 第18-19页 |
| 3. 主要仪器 | 第19页 |
| 二 实验方法 | 第19-23页 |
| 1. MA104细胞的复苏 | 第19-20页 |
| 2. MA104细胞的传代培养 | 第20页 |
| 3. 轮状病毒的增殖培养 | 第20-21页 |
| 4. 轮状病毒的超滤 | 第21页 |
| 5. 轮状病毒的离子交换层析纯化 | 第21页 |
| 6. 轮状病毒的脱盐纯化 | 第21-22页 |
| 7. EUSA检测轮状病毒抗原量 | 第22-23页 |
| 三 实验结果 | 第23-26页 |
| 1. 轮状病毒的增值培养 | 第23-24页 |
| 2. 轮状病毒的离子交换层析纯化 | 第24页 |
| 3. 轮状病毒的脱盐纯化 | 第24-26页 |
| 4. ELISA检测轮状病毒抗原量 | 第26页 |
| 四 讨论 | 第26-29页 |
| 五 小结 | 第29-30页 |
| 第二部分 轮状病毒免疫原的鉴定 | 第30-44页 |
| 一 实验材料 | 第30-32页 |
| 1. 细胞系和毒株 | 第30页 |
| 2. 主要试剂及耗材 | 第30-31页 |
| 3. 主要仪器 | 第31-32页 |
| 二 实验方法 | 第32-36页 |
| 1. MA104细胞在96孔细胞培养板中的培养 | 第32页 |
| 2. 轮状病毒感染性滴度的测定(免疫荧光法,以CCID_(50)表示) | 第32-34页 |
| 3. 轮状病毒基因组RNA的提取 | 第34页 |
| 4. 逆转录PCR(RT-PCR)扩增轮状病毒基因组RNA | 第34-35页 |
| 5. 轮状病毒基因组RNA逆转录PCR(RT-PCR)产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第35页 |
| 6. 轮状病毒基因组RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | 第35-36页 |
| 三 实验结果 | 第36-39页 |
| 1. 轮状病毒感染性滴度的测定(免疫荧光法,以CCID_(50)表示) | 第36-38页 |
| 2. 轮状病毒基因组RNA逆转录PCR(RT-PCR)产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第38-39页 |
| 3. 轮状病毒基因组RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | 第39页 |
| 四 讨论 | 第39-42页 |
| 五 小结 | 第42-44页 |
| 第三部分 单价和多价轮状病毒免疫原免疫效果的比较与评价 | 第44-82页 |
| 一 实验材料 | 第44-46页 |
| 1. 细胞系和毒株 | 第44页 |
| 2. 主要试剂及耗材 | 第44-45页 |
| 3. 主要仪器 | 第45页 |
| 4. 实验动物 | 第45-46页 |
| 二 实验方法 | 第46-50页 |
| 1. 轮状病毒免疫原免疫实验动物 | 第46页 |
| 2. 检测用血清样本的制备 | 第46页 |
| 3. ELISA检测血清轮状病毒特异性IgG抗体水平 | 第46-47页 |
| 4. MA104细胞在96孔细胞培养板中的培养 | 第47页 |
| 5. 中和试验检测血清轮状病毒特异性中和抗体滴度 | 第47-48页 |
| 6. 轮状病毒免疫后血清IgA浓度的检测 | 第48-49页 |
| 7. 统计学分析方法 | 第49-50页 |
| 三 实验结果 | 第50-72页 |
| 1. 轮状病毒免疫原免疫实验动物 | 第50-51页 |
| 2. ELISA检测血清轮状病毒特异性IgG抗体水平 | 第51-58页 |
| 3. 中和试验检测血清轮状病毒特异性中和抗体滴度 | 第58-66页 |
| 4. 轮状病毒免疫后血清IgA浓度的测定 | 第66-72页 |
| 四 讨论 | 第72-80页 |
| 五 小结 | 第80-82页 |
| 展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-92页 |
| 附录 | 第92-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
