| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-14页 |
| 1.1 Bam32分子的结构特点 | 第9-10页 |
| 1.2 Bam32在BCR调节的信号通路中的作用 | 第10-11页 |
| 1.3 Bam32在生发中心发育中的作用 | 第11页 |
| 1.4 Bam32与速发型过敏性疾病 | 第11-12页 |
| 1.5 Bam32与非洲锥虫病 | 第12-13页 |
| 1.6 小结 | 第13-14页 |
| 第2章 Lja-Bam32的分子克隆 | 第14-33页 |
| 2.1 材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第14页 |
| 2.1.2 药品及试剂 | 第14页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第14-15页 |
| 2.2 Lja-Bam323’Race和ORF区的扩增 | 第15-26页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第15页 |
| 2.2.2 cDNA模板的制备 | 第15-17页 |
| 2.2.3 3RACE快速扩增 | 第17-23页 |
| 2.2.4 Lja-Bam32 ORF区的高保真扩增 | 第23-26页 |
| 2.3 结果 | 第26-32页 |
| 2.3.1 单个核白细胞的总RNA提取 | 第26页 |
| 2.3.2 3’RACEcDNA模板检验 | 第26-27页 |
| 2.3.3 Lja-Bam32开放阅读框的扩增 | 第27-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32页 |
| 2.5 小结 | 第32-33页 |
| 第3章 Lja-Bam32分子生物信息学分析 | 第33-43页 |
| 3.1 结果 | 第33-42页 |
| 3.1.1 一级结构分析 | 第33-35页 |
| 3.1.2 功能结构域预测 | 第35-36页 |
| 3.1.3 二级结构预测 | 第36-37页 |
| 3.1.4 三级结构预测 | 第37页 |
| 3.1.5 同源序列比对 | 第37-38页 |
| 3.1.6 保守基序分析 | 第38-40页 |
| 3.1.7 系统发育分析 | 第40-42页 |
| 3.2 讨论 | 第42页 |
| 3.3 小结 | 第42-43页 |
| 第4章 Lja-Bam32分子的蛋白表达、纯化及抗体的制备 | 第43-59页 |
| 4.1 材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第43页 |
| 4.1.2 药品与试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第43-44页 |
| 4.2 Lja-Bam32表达载体的构建 | 第44-47页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第44页 |
| 4.2.2 表达载体的构建 | 第44-47页 |
| 4.3 Lja-Bam32蛋白的诱导表达 | 第47-48页 |
| 4.4 Lja-Bam32包涵体蛋白的纯化 | 第48-49页 |
| 4.5 Lja-Bam32多克隆抗体的制备与纯化 | 第49-51页 |
| 4.5.1 兔抗Lja-Bam32多克隆抗体的兔免疫程序 | 第49页 |
| 4.5.2 ELISA法检测抗体的效价 | 第49-50页 |
| 4.5.3 多克隆抗体的纯化 | 第50-51页 |
| 4.6 结果 | 第51-58页 |
| 4.6.1 构建pET32a-Bam32原核表达重组质粒 | 第51-53页 |
| 4.6.2 Lja-Bam32蛋白诱导表达 | 第53-54页 |
| 4.6.3 包涵体蛋白Lja-Bam32的鉴定 | 第54-55页 |
| 4.6.4 重组蛋白Lja-Bam32的纯化 | 第55-56页 |
| 4.6.5 ELISA检测兔抗Lja-Bam32抗体的效价 | 第56-57页 |
| 4.6.6 Lja-Bam32多克隆抗体的纯化 | 第57-58页 |
| 4.7 讨论 | 第58页 |
| 4.8 小结 | 第58-59页 |
| 第5章 Lja-Bam32在组织中的表达及相关免疫学研究 | 第59-67页 |
| 5.1 材料 | 第59页 |
| 5.1.1 药品及试剂 | 第59页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第59页 |
| 5.2 QPCR法检测Lja-Bam32在各组织中的相对表达量 | 第59-61页 |
| 5.2.1 方法 | 第59-60页 |
| 5.2.2 QPCR | 第60-61页 |
| 5.3 Western Blot检测兔抗Lja-Bam32多克隆抗体特异性 | 第61-62页 |
| 5.3.1 方法 | 第61页 |
| 5.3.2 Western blot鉴定抗体的特异性 | 第61-62页 |
| 5.4 Western blot检测Lja-Bam32蛋白在各组织中的表达情况 | 第62页 |
| 5.5 结果 | 第62-66页 |
| 5.5.1 QPCR检测Lja-Bam32在各组织中的相对表达量 | 第62-64页 |
| 5.5.2 Lja-Bam32多克隆抗体特异性的检测 | 第64-65页 |
| 5.5.3 Western blot检测Bam32在七鳃鳗各组织中的相对表达量 | 第65-66页 |
| 5.6 讨论 | 第66页 |
| 5.7 小结 | 第66-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 本论文的创新点 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 附录A 不同物种的Bam32的FASTA格式氨基酸序列 | 第73-77页 |
| 附录B pET-32a质粒图谱 | 第77-78页 |
| 附录C 蛋白质浓度测定标准曲线 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
