| Abstract | 第2页 |
| 1 Background | 第6-13页 |
| 1.1 miRNA literature review | 第6-11页 |
| 1.1.1 Plant miRNA research trend | 第6页 |
| 1.1.2 miR397a family | 第6-7页 |
| 1.1.3 miR397 involvement in plant growth and development | 第7-8页 |
| 1.1.4 miR397 involvement in abiotic stress response | 第8-11页 |
| 1.2 Literature review of miR397a target gene, LAC | 第11页 |
| 1.2.1 LAC gene research progress | 第11页 |
| 1.2.2 mi R397a-mediated regulation of LAC | 第11页 |
| 1.3 Aim and Objectives | 第11-13页 |
| 2 Expression pattern analysis of Zma-miR397a and ZmLAC gene in maize | 第13-28页 |
| 2.1 Experimental materials | 第13-14页 |
| 2.1.1 Plant materials, growth conditions and treatments | 第13页 |
| 2.1.2 Laboratory reagents used | 第13页 |
| 2.1.3 Laboratory equipment | 第13-14页 |
| 2.2 Methodology | 第14-17页 |
| 2.2.1 RNA extraction | 第14页 |
| 2.2.2 qRT-PCR Primer design | 第14-15页 |
| 2.2.3 First strand cDNA synthesis | 第15-17页 |
| 2.2.4 qRT-PCR | 第17页 |
| 2.3 Results and analysis | 第17-25页 |
| 2.3.1 Zma-miR397a and ZmLAC gene expression during abiotic stress and hormone treatment | 第18-23页 |
| 2.3.2 Expression analysis of Zma-miR397a and ZmLAC in various maize tissues | 第23-25页 |
| 2.4 Discussion | 第25-27页 |
| 2.5 Summary | 第27-28页 |
| 3 Cloning of Zma-pre-miR397a and expression vector construction | 第28-40页 |
| 3.1 Experimental materials | 第28-29页 |
| 3.1.1 Plant materials | 第28页 |
| 3.1.2 Laboratory reagents | 第28页 |
| 3.1.3 Laboratory equipment | 第28-29页 |
| 3.2 Methodology | 第29-36页 |
| 3.2.1 Genomic DNA extraction | 第29页 |
| 3.2.2 Zma-pre-miR397a cloning | 第29-33页 |
| 3.2.3 Maize expression vector construction | 第33-36页 |
| 3.3 Results and analysis | 第36-38页 |
| 3.3.1 Cloning of Zma-pre-miR397a | 第36-37页 |
| 3.3.2 Sequence analysis of Zma-pre-mi R397a | 第37页 |
| 3.3.3 Plant expression vector construction | 第37-38页 |
| 3.4 Discussion | 第38-39页 |
| 3.5 Summary | 第39-40页 |
| 4 Cloning and bioinformatic analysis of ZmLAC | 第40-73页 |
| 4.1 Experimental materials | 第40页 |
| 4.1.1 Plant materials | 第40页 |
| 4.1.2 Laboratory reagents | 第40页 |
| 4.2 Methodology | 第40-59页 |
| 4.2.1 Total maize RNA extraction | 第40-41页 |
| 4.2.2 Cloning of the ZmLAC conserved region | 第41-44页 |
| 4.2.3 Cloning of the ZmLAC gene 3? end with 3? RACE PCR | 第44-47页 |
| 4.2.4 Cloning of the ZmLAC gene 5? end with 5? RACE PCR | 第47-51页 |
| 4.2.5 ZmLAC gene ORF cloning | 第51-53页 |
| 4.2.6 Bioinformatic analysis of the ZmLAC sequence | 第53-54页 |
| 4.2.7 Plant expression vector construction | 第54-59页 |
| 4.3 Results and analysis | 第59-71页 |
| 4.3.1 Cloning of ZmLAC gene conserved region | 第59-60页 |
| 4.3.2 ZmLAC gene 3? end cloning | 第60-61页 |
| 4.3.3 ZmLAC 5? end cloning | 第61-63页 |
| 4.3.4 Bioinformatic analysis of ZmLAC | 第63-67页 |
| 4.3.5 Plant expression vector construction | 第67-71页 |
| 4.4 Discussion | 第71-72页 |
| 4.5 Summary | 第72-73页 |
| 5 Overexpression of ZmLAC in tobacco | 第73-84页 |
| 5.1 Experimental materials | 第73-74页 |
| 5.1.1 Plant materials | 第73页 |
| 5.1.2 Laboratory reagents | 第73页 |
| 5.1.3 Laboratory equipment | 第73-74页 |
| 5.2 Methodology | 第74-78页 |
| 5.2.1 Tobacco transformation | 第74-75页 |
| 5.2.2 Molecular screening of OXLAC transgenic tobacco plants | 第75-78页 |
| 5.2.3 Physiological analysis of OXLAC transgenic tobacco plants | 第78页 |
| 5.3 Results and analysis | 第78-82页 |
| 5.3.1 Tobacco transformation | 第78-79页 |
| 5.3.2 Molecular screening of OXLAC transgenic plants | 第79-80页 |
| 5.3.3 Physiological analysis of OXLAC transgenic tobacco plants | 第80-82页 |
| 5.4 Discussion | 第82-83页 |
| 5.5 Summary | 第83-84页 |
| Conclusion | 第84-85页 |
| Future perspective | 第85-86页 |
| References | 第86-90页 |
| APPENDIX A: Abbreviations | 第90-91页 |
| APPENDIX B: DNA Markers | 第91-92页 |
| APPENDIX C: Vectors | 第92-93页 |
| Publications | 第93-94页 |
| Acknowledgements | 第94-96页 |
