缩略词对照表 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
SUMMARY | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第14-29页 |
1 牦牛相关研究进展 | 第14-18页 |
1.1 牦牛的基础研究 | 第14-16页 |
1.2 雄性牦牛的繁殖生理 | 第16-17页 |
1.3 雌性牦牛繁殖生理 | 第17-18页 |
2 蛋白质组学研究进展 | 第18-21页 |
2.1 蛋白质组学技术与方法 | 第18-19页 |
2.2 蛋白质组学在畜牧业中的研究进展 | 第19-20页 |
2.3 蛋白质组学在动物睾丸发育研究中的应用 | 第20-21页 |
3 支持细胞研究进展 | 第21-25页 |
3.1 支持细胞结构、功能及所在的内环境 | 第22-24页 |
3.2 支持细胞增殖的分子机制 | 第24-25页 |
3.3 支持细胞体外培养的意义 | 第25页 |
4 热休克蛋白研究进展 | 第25-28页 |
4.1 热休克蛋白分类及功能 | 第26页 |
4.2 热休克蛋白60研究进展 | 第26-27页 |
4.3 热休克蛋白60在生殖领域的研究进展 | 第27-28页 |
5 研究的目的和意义 | 第28-29页 |
第二章 天祝白牦牛性成熟前后睾丸差异蛋白质组学研究 | 第29-52页 |
1 试验材料与方法 | 第29-36页 |
1.1 试验材料 | 第29-30页 |
1.2 试剂与仪器 | 第30-33页 |
1.3 方法 | 第33-36页 |
1.4 数据统计分析 | 第36页 |
2 结果与分析 | 第36-44页 |
2.1 不同发育期白牦牛睾丸 2-DE图谱 | 第36-37页 |
2.2 不同发育期差异蛋白点质谱鉴定结果 | 第37-41页 |
2.3 差异蛋白质GO分析结果 | 第41-43页 |
2.4 差异蛋白亚细胞定位分析 | 第43-44页 |
2.5 差异蛋白的western blotting验证 | 第44页 |
3 讨论 | 第44-48页 |
4 小结 | 第48-52页 |
第三章 天祝白牦牛HSP60基因的克隆及其在下丘脑-垂体-睾丸中的表达定位研究 | 第52-78页 |
1 材料与方法 | 第52-64页 |
1.1 材料 | 第52-53页 |
1.2 试剂与仪器 | 第53-54页 |
1.3 方法 | 第54-63页 |
1.4 数据统计 | 第63-64页 |
2 结果与分析 | 第64-74页 |
2.1 白牦牛HSP60基因全长cDNA克隆及测序 | 第64-66页 |
2.2 白牦牛HSP60蛋白理化性质及结构预测 | 第66-67页 |
2.3 白牦牛HSP60的疏/亲水性预测及分析 | 第67页 |
2.4 白牦牛HSP60蛋白氨基酸二级结构和磷酸化位点预测 | 第67-70页 |
2.5 白牦牛HSP60蛋白高级结构的分析 | 第70页 |
2.6 白牦牛与其他物种间HSP60氨基酸序列比较分析 | 第70-71页 |
2.7 HSP60mRNA在白牦牛性腺轴中的表达 | 第71-72页 |
2.8 Western Blotting验证HSP60蛋白在白牦牛性腺轴的表达 | 第72-73页 |
2.9 HSP60阳性细胞在白牦牛性腺轴的分布定位 | 第73-74页 |
3 讨论 | 第74-77页 |
4 小结 | 第77-78页 |
第四章 HSP60对天祝白牦牛原代培养的支持细胞增殖的影响 | 第78-96页 |
1 材料与方法 | 第79-85页 |
1.1 样品 | 第79页 |
1.2 试剂与仪器 | 第79-80页 |
1.3 白牦牛睾丸支持细胞的原代培养及纯化 | 第80-81页 |
1.4 白牦牛睾丸支持细胞的鉴定 | 第81页 |
1.5 靶向HSP60基因siRNA合成及转染 | 第81-82页 |
1.6 靶向HSP60基因过表达载体pIRES2-EGFP-hsp60构建、鉴定及转染 | 第82-84页 |
1.7 MTS法测定细胞增殖 | 第84页 |
1.8 荧光定量检测Cyclin D1和PCNA基因的表达 | 第84页 |
1.9 数据统计与分析 | 第84-85页 |
2 结果和分析 | 第85-93页 |
2.1 白牦牛支持细胞的原代培养 | 第85页 |
2.2 支持细胞的鉴定 | 第85-87页 |
2.3 过表达载体pIRES2-EGFP-HSP60的构建及效果检测 | 第87-89页 |
2.4 siRNA-HSP60的合成及沉默效果检测 | 第89-90页 |
2.5 过表达HSP60基因对白牦牛原代支持细胞增殖的影响 | 第90-91页 |
2.6 沉默HSP60基因对白牦牛原代支持细胞增殖的影响 | 第91页 |
2.7 过表达HSP60基因对支持细胞Cyclin D1和PCNA基因的影响 | 第91-92页 |
2.8 沉默HSP60基因对支持细胞Cyclin D1和PCNA基因的影响 | 第92-93页 |
3 讨论 | 第93-95页 |
4 小结 | 第95-96页 |
全文结论及展望 | 第96-97页 |
1 结论 | 第96页 |
2 展望 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-108页 |
致谢 | 第108-110页 |
导师简介 | 第110-111页 |
个人简介 | 第111-113页 |
附表 | 第113-119页 |
1、HSP60核苷酸和氨基酸序列 | 第113-115页 |
2、GO功能分类 | 第115-119页 |
2.1 分子功能 | 第115-116页 |
2.2 生物学过程 | 第116-118页 |
2.3 细胞组份 | 第118-119页 |