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不同发育期白牦牛睾丸蛋白质组学分析及生殖相关候选基因HSP60生物学研究

缩略词对照表第4-6页
中文摘要第6-8页
SUMMARY第8-10页
第一章 文献综述第14-29页
    1 牦牛相关研究进展第14-18页
        1.1 牦牛的基础研究第14-16页
        1.2 雄性牦牛的繁殖生理第16-17页
        1.3 雌性牦牛繁殖生理第17-18页
    2 蛋白质组学研究进展第18-21页
        2.1 蛋白质组学技术与方法第18-19页
        2.2 蛋白质组学在畜牧业中的研究进展第19-20页
        2.3 蛋白质组学在动物睾丸发育研究中的应用第20-21页
    3 支持细胞研究进展第21-25页
        3.1 支持细胞结构、功能及所在的内环境第22-24页
        3.2 支持细胞增殖的分子机制第24-25页
        3.3 支持细胞体外培养的意义第25页
    4 热休克蛋白研究进展第25-28页
        4.1 热休克蛋白分类及功能第26页
        4.2 热休克蛋白60研究进展第26-27页
        4.3 热休克蛋白60在生殖领域的研究进展第27-28页
    5 研究的目的和意义第28-29页
第二章 天祝白牦牛性成熟前后睾丸差异蛋白质组学研究第29-52页
    1 试验材料与方法第29-36页
        1.1 试验材料第29-30页
        1.2 试剂与仪器第30-33页
        1.3 方法第33-36页
        1.4 数据统计分析第36页
    2 结果与分析第36-44页
        2.1 不同发育期白牦牛睾丸 2-DE图谱第36-37页
        2.2 不同发育期差异蛋白点质谱鉴定结果第37-41页
        2.3 差异蛋白质GO分析结果第41-43页
        2.4 差异蛋白亚细胞定位分析第43-44页
        2.5 差异蛋白的western blotting验证第44页
    3 讨论第44-48页
    4 小结第48-52页
第三章 天祝白牦牛HSP60基因的克隆及其在下丘脑-垂体-睾丸中的表达定位研究第52-78页
    1 材料与方法第52-64页
        1.1 材料第52-53页
        1.2 试剂与仪器第53-54页
        1.3 方法第54-63页
        1.4 数据统计第63-64页
    2 结果与分析第64-74页
        2.1 白牦牛HSP60基因全长cDNA克隆及测序第64-66页
        2.2 白牦牛HSP60蛋白理化性质及结构预测第66-67页
        2.3 白牦牛HSP60的疏/亲水性预测及分析第67页
        2.4 白牦牛HSP60蛋白氨基酸二级结构和磷酸化位点预测第67-70页
        2.5 白牦牛HSP60蛋白高级结构的分析第70页
        2.6 白牦牛与其他物种间HSP60氨基酸序列比较分析第70-71页
        2.7 HSP60mRNA在白牦牛性腺轴中的表达第71-72页
        2.8 Western Blotting验证HSP60蛋白在白牦牛性腺轴的表达第72-73页
        2.9 HSP60阳性细胞在白牦牛性腺轴的分布定位第73-74页
    3 讨论第74-77页
    4 小结第77-78页
第四章 HSP60对天祝白牦牛原代培养的支持细胞增殖的影响第78-96页
    1 材料与方法第79-85页
        1.1 样品第79页
        1.2 试剂与仪器第79-80页
        1.3 白牦牛睾丸支持细胞的原代培养及纯化第80-81页
        1.4 白牦牛睾丸支持细胞的鉴定第81页
        1.5 靶向HSP60基因siRNA合成及转染第81-82页
        1.6 靶向HSP60基因过表达载体pIRES2-EGFP-hsp60构建、鉴定及转染第82-84页
        1.7 MTS法测定细胞增殖第84页
        1.8 荧光定量检测Cyclin D1和PCNA基因的表达第84页
        1.9 数据统计与分析第84-85页
    2 结果和分析第85-93页
        2.1 白牦牛支持细胞的原代培养第85页
        2.2 支持细胞的鉴定第85-87页
        2.3 过表达载体pIRES2-EGFP-HSP60的构建及效果检测第87-89页
        2.4 siRNA-HSP60的合成及沉默效果检测第89-90页
        2.5 过表达HSP60基因对白牦牛原代支持细胞增殖的影响第90-91页
        2.6 沉默HSP60基因对白牦牛原代支持细胞增殖的影响第91页
        2.7 过表达HSP60基因对支持细胞Cyclin D1和PCNA基因的影响第91-92页
        2.8 沉默HSP60基因对支持细胞Cyclin D1和PCNA基因的影响第92-93页
    3 讨论第93-95页
    4 小结第95-96页
全文结论及展望第96-97页
    1 结论第96页
    2 展望第96-97页
参考文献第97-108页
致谢第108-110页
导师简介第110-111页
个人简介第111-113页
附表第113-119页
    1、HSP60核苷酸和氨基酸序列第113-115页
    2、GO功能分类第115-119页
        2.1 分子功能第115-116页
        2.2 生物学过程第116-118页
        2.3 细胞组份第118-119页

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