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MicroRNA-192和-215通过靶基因BIVM参与人胃细胞生物学功能研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
前言第8-10页
第1章 筛选BIVM是microRNA-192 和-215 在胃细胞的靶基因第10-14页
    1.1 实验材料与方法第10-12页
        1.1.1 细胞培养第10-11页
        1.1.2 细胞转染第11页
            1.1.2.1 试剂和材料第11页
            1.1.2.2 实验步骤第11页
        1.1.3 基因表达谱芯片测试第11-12页
        1.1.4 microRNA靶基因预测引擎第12页
            1.1.4.1 搜索miR靶基因预测引擎第12页
            1.1.4.2 软件预测方法第12页
    1.2 实验结果第12-13页
        1.2.1 基因表达谱芯片第12-13页
        1.2.2 靶基因预测引擎显示BIVM是microRNA-192 和-215 潜在的靶基因第13页
    1.3 结论第13-14页
第2章 确认BIVM是microRNA-192 和-215 在胃细胞中的靶基因第14-35页
    2.1 实验材料与方法第14-28页
        2.1.1 实时荧光定量PCR第14-17页
            2.1.1.1 试剂和材料第14页
            2.1.1.2 实验步骤第14-17页
        2.1.2 Western Blotting第17-20页
            2.1.2.1 试剂和材料第17-18页
            2.1.2.2 实验步骤第18-20页
        2.1.3 荧光素酶报告系统检测BIVM与miR-192 和mi R-215 的相互作用第20-28页
            2.1.3.1 试剂和材料第20-21页
            2.1.3.2 方法第21-28页
    2.2 实验结果第28-34页
        2.2.1 实时荧光定量PCR确认micRNA-192 和-215 调控BIVM的m RNA第28-29页
        2.2.2 Western Blotting确认micRNA-192 和-215 调控BIVM蛋白第29-30页
        2.2.3 荧光素酶报告系统检测确认BIVM是micRNA-192 和-215 的靶基因第30-34页
            2.2.3.1 BIVM基因的 3’UTR区载体的构建第30-31页
            2.2.3.2 BIVM 3'UTR mut质粒的测序与比对结果第31-33页
            2.2.3.3 荧光素酶报告系统检测miR-192 和-215 与BIVM的 3'UTR区的结合情况第33-34页
    2.3 结论第34-35页
第3章 BIVM参与调控的胃细胞生物学功能第35-44页
    3.1 实验材料和方法第35-38页
        3.1.1 肿瘤细胞划痕愈合实验第35页
            3.1.1.1 实验细胞第35页
            3.1.1.2 实验试剂与仪器第35页
            3.1.1.3 实验方法第35页
        3.1.2 cck-8 细胞增殖实验第35-36页
            3.1.2.1 实验细胞第35-36页
            3.1.2.2 实验试剂与仪器第36页
            3.1.2.3 实验方法第36页
        3.1.3 采用流式细胞术(PI染色法)检测细胞周期第36-37页
            3.1.3.1 实验细胞第36页
            3.1.3.2 实验试剂与仪器第36-37页
            3.1.3.3 实验方法第37页
        3.1.4 Annexin V-FITC/PI细胞凋亡的检测第37-38页
            3.1.4.1 实验细胞第37页
            3.1.4.2 实验试剂与仪器第37页
            3.1.4.3 实验方法第37-38页
    3.2 实验结果第38-43页
        3.2.1 BIVM抑制细胞的迁移能力第38-39页
        3.2.2 cck-8 细胞增殖实验第39-40页
        3.2.3 采用流式细胞术(PI染色法)检测细胞周期第40-41页
        3.2.4 BIVM抑制细胞凋亡第41-43页
    3.3 结论第43-44页
第4章 BIVM基因对胃癌细胞体内生物学特性的影响第44-46页
    4.1 实验材料和方法第44页
        4.1.1 裸鼠皮下成瘤实验第44页
            4.1.1.1 实验细胞第44页
            4.1.1.2 实验试剂与仪器第44页
            4.1.1.3 方法第44页
    4.2 实验结果第44-45页
    4.3 结论第45-46页
第5章 讨论第46-48页
参考文献第48-51页
致谢第51-52页
附录:英语缩略词表第52-54页
攻读硕士学位期间的研究成果第54页

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