摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第10-22页 |
1.1 低温胁迫对植物、植物细胞生长发育的影响 | 第10-12页 |
1.1.1 低温胁迫对生物膜系统的影响 | 第10页 |
1.1.2 低温胁迫导致活性氧的增加 | 第10-11页 |
1.1.3 低温胁迫引起细胞结冰及渗透势的改变 | 第11页 |
1.1.4 低温胁迫影响植物光合作用 | 第11页 |
1.1.5 低温胁迫对酶系统的破坏 | 第11-12页 |
1.2 植物的抗性生理 | 第12-14页 |
1.2.1 细胞膜的结构、功能及其抗性生理 | 第12页 |
1.2.2 抗氧化系统 | 第12-13页 |
1.2.3 调渗物质 | 第13-14页 |
1.2.4 基因表达与蛋白质合成 | 第14页 |
1.3 胚胎晚期富集蛋白(LEA蛋白)概述 | 第14-19页 |
1.3.1 LEA蛋白的理化性质 | 第14-15页 |
1.3.2 LEA蛋白的分类 | 第15-17页 |
1.3.3 LEA蛋白在耐受胁迫中的多重保护功能 | 第17-19页 |
1.3.4 LEA蛋白为固有无序蛋白 | 第19页 |
1.4 对大豆PM1蛋白保护功能的研究 | 第19-20页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第20-22页 |
第2章 材料与方法 | 第22-33页 |
2.1 材料 | 第22-24页 |
2.1.1 菌株和载体 | 第22页 |
2.1.2. 试剂、仪器及设备 | 第22-24页 |
2.2 主要试剂的配制 | 第24-26页 |
2.2.1 培养基的配制 | 第24页 |
2.2.2 主要的试剂的配制 | 第24-26页 |
2.3 方法 | 第26-33页 |
2.3.1 大豆PM1蛋白序列分析 | 第26页 |
2.3.2 诱导重组菌表达大豆PM1蛋白及PM1-N和PM-C短肽 | 第26-27页 |
2.3.3 亲和层析法分离、纯化PM1蛋白及PM1-N和PM-C短肽 | 第27页 |
2.3.4 PM1、PM1-N和PM-C融合蛋白中HIS标签的去除 | 第27-28页 |
2.3.5 BCA蛋白定量法检测蛋白浓度 | 第28页 |
2.3.6 脂质体的制备 | 第28-29页 |
2.3.7 磷脂定量 | 第29页 |
2.3.8 低温处理条件 | 第29页 |
2.3.9 浊度法 | 第29-30页 |
2.3.10 动态光散射法 | 第30页 |
2.3.11 显微镜法 | 第30页 |
2.3.12 荧光分光光度法 | 第30页 |
2.3.13 差式扫描量热法(DSC) | 第30-31页 |
2.3.14 圆二色谱法(CD) | 第31页 |
2.3.15 胰蛋白酶酶解实验 | 第31页 |
2.3.16 细胞计数法 | 第31-33页 |
第3章 结果 | 第33-52页 |
3.1 大豆PM1蛋白序列分析 | 第33-36页 |
3.2 蛋白质的纯化及SDS-PAGE电泳结果 | 第36-37页 |
3.3 PM1及PM1-N蛋白可抑制脂质体浊度的升高 | 第37-39页 |
3.3.1 PM1及PM1-N蛋白可抑制POPC脂质体浊度的升高 | 第37-38页 |
3.3.2 PM1及PM1-N蛋白可抑制POPC:EPG脂质体浊度的升高 | 第38-39页 |
3.4 PM1及PM1-N蛋白可稳定脂质体的粒径 | 第39-41页 |
3.4.1 PM1及PM1-N蛋白可稳定POPC脂质体的粒径 | 第39-40页 |
3.4.2 PM1及PM1-N蛋白可稳定POPC:EPG脂质体的粒径 | 第40-41页 |
3.5 PM1及PM1-N蛋白可抑制脂质体的聚集 | 第41-44页 |
3.5.1 PM1及PM1-N蛋白可抑制POPC脂质体的聚集 | 第41-43页 |
3.5.2 PM1及PM1-N蛋白可抑制POPC:EPG脂质体的聚集 | 第43-44页 |
3.6 PM1及PM1-N蛋白可维持脂质体的流动性 | 第44-46页 |
3.6.1 PM1及PM1-N蛋白可维持POPC脂质体的流动性 | 第44-45页 |
3.6.2 PM1及PM1-N蛋白可维持POPC:EPG脂质体的流动性 | 第45-46页 |
3.7 PM1、PM1-N及PM1-C蛋白不影响脂质体的相变温度 | 第46-47页 |
3.8 脂质体不影响PM1、PM1-N及PM1-C蛋白二级结构 | 第47-50页 |
3.8.1 CD法鉴定TFE和SDS对PM1蛋白及其短肽二级结构的影响 | 第47-49页 |
3.8.2 CD法鉴定POPC和POPC:EPG脂质体对PM1蛋白及其短肽二级结构的影响 | 第49-50页 |
3.9 PM1蛋白与脂质体未有明显相互作用 | 第50-51页 |
3.10 PM1蛋白对兔红细胞的保护作用 | 第51-52页 |
第4章 讨论 | 第52-55页 |
4.1 低温条件下,PM1和PM1-N蛋白对脂质体具有稳定作用 | 第52-53页 |
4.2 低温胁迫下,PM1和PM1-N蛋白能维持脂质体流动性 | 第53-55页 |
第5章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第63页 |