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大豆PM1蛋白及其N-端短肽对脂质体保护及其作用机理

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第1章 前言第10-22页
    1.1 低温胁迫对植物、植物细胞生长发育的影响第10-12页
        1.1.1 低温胁迫对生物膜系统的影响第10页
        1.1.2 低温胁迫导致活性氧的增加第10-11页
        1.1.3 低温胁迫引起细胞结冰及渗透势的改变第11页
        1.1.4 低温胁迫影响植物光合作用第11页
        1.1.5 低温胁迫对酶系统的破坏第11-12页
    1.2 植物的抗性生理第12-14页
        1.2.1 细胞膜的结构、功能及其抗性生理第12页
        1.2.2 抗氧化系统第12-13页
        1.2.3 调渗物质第13-14页
        1.2.4 基因表达与蛋白质合成第14页
    1.3 胚胎晚期富集蛋白(LEA蛋白)概述第14-19页
        1.3.1 LEA蛋白的理化性质第14-15页
        1.3.2 LEA蛋白的分类第15-17页
        1.3.3 LEA蛋白在耐受胁迫中的多重保护功能第17-19页
        1.3.4 LEA蛋白为固有无序蛋白第19页
    1.4 对大豆PM1蛋白保护功能的研究第19-20页
    1.5 本研究的目的与意义第20-22页
第2章 材料与方法第22-33页
    2.1 材料第22-24页
        2.1.1 菌株和载体第22页
        2.1.2. 试剂、仪器及设备第22-24页
    2.2 主要试剂的配制第24-26页
        2.2.1 培养基的配制第24页
        2.2.2 主要的试剂的配制第24-26页
    2.3 方法第26-33页
        2.3.1 大豆PM1蛋白序列分析第26页
        2.3.2 诱导重组菌表达大豆PM1蛋白及PM1-N和PM-C短肽第26-27页
        2.3.3 亲和层析法分离、纯化PM1蛋白及PM1-N和PM-C短肽第27页
        2.3.4 PM1、PM1-N和PM-C融合蛋白中HIS标签的去除第27-28页
        2.3.5 BCA蛋白定量法检测蛋白浓度第28页
        2.3.6 脂质体的制备第28-29页
        2.3.7 磷脂定量第29页
        2.3.8 低温处理条件第29页
        2.3.9 浊度法第29-30页
        2.3.10 动态光散射法第30页
        2.3.11 显微镜法第30页
        2.3.12 荧光分光光度法第30页
        2.3.13 差式扫描量热法(DSC)第30-31页
        2.3.14 圆二色谱法(CD)第31页
        2.3.15 胰蛋白酶酶解实验第31页
        2.3.16 细胞计数法第31-33页
第3章 结果第33-52页
    3.1 大豆PM1蛋白序列分析第33-36页
    3.2 蛋白质的纯化及SDS-PAGE电泳结果第36-37页
    3.3 PM1及PM1-N蛋白可抑制脂质体浊度的升高第37-39页
        3.3.1 PM1及PM1-N蛋白可抑制POPC脂质体浊度的升高第37-38页
        3.3.2 PM1及PM1-N蛋白可抑制POPC:EPG脂质体浊度的升高第38-39页
    3.4 PM1及PM1-N蛋白可稳定脂质体的粒径第39-41页
        3.4.1 PM1及PM1-N蛋白可稳定POPC脂质体的粒径第39-40页
        3.4.2 PM1及PM1-N蛋白可稳定POPC:EPG脂质体的粒径第40-41页
    3.5 PM1及PM1-N蛋白可抑制脂质体的聚集第41-44页
        3.5.1 PM1及PM1-N蛋白可抑制POPC脂质体的聚集第41-43页
        3.5.2 PM1及PM1-N蛋白可抑制POPC:EPG脂质体的聚集第43-44页
    3.6 PM1及PM1-N蛋白可维持脂质体的流动性第44-46页
        3.6.1 PM1及PM1-N蛋白可维持POPC脂质体的流动性第44-45页
        3.6.2 PM1及PM1-N蛋白可维持POPC:EPG脂质体的流动性第45-46页
    3.7 PM1、PM1-N及PM1-C蛋白不影响脂质体的相变温度第46-47页
    3.8 脂质体不影响PM1、PM1-N及PM1-C蛋白二级结构第47-50页
        3.8.1 CD法鉴定TFE和SDS对PM1蛋白及其短肽二级结构的影响第47-49页
        3.8.2 CD法鉴定POPC和POPC:EPG脂质体对PM1蛋白及其短肽二级结构的影响第49-50页
    3.9 PM1蛋白与脂质体未有明显相互作用第50-51页
    3.10 PM1蛋白对兔红细胞的保护作用第51-52页
第4章 讨论第52-55页
    4.1 低温条件下,PM1和PM1-N蛋白对脂质体具有稳定作用第52-53页
    4.2 低温胁迫下,PM1和PM1-N蛋白能维持脂质体流动性第53-55页
第5章 结论第55-56页
参考文献第56-62页
致谢第62-63页
攻读硕士学位期间的研究成果第63页

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