| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第16-42页 |
| 1.1 木瓜蛋白酶概述 | 第16-18页 |
| 1.1.1 木瓜蛋白酶的工业制备 | 第16页 |
| 1.1.2 木瓜蛋白酶的结构及催化机理 | 第16-17页 |
| 1.1.3 木瓜蛋白酶的应用及研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2 酶固定化概述 | 第18-30页 |
| 1.2.1 酶-合成型聚合物纳米凝胶催化剂 | 第19-25页 |
| 1.2.2 酶-聚多巴胺纳米结构催化剂 | 第25-28页 |
| 1.2.3 酶-纤维素纳米晶纳米结构催化剂 | 第28-30页 |
| 1.3 纤维素及纤维素纳米晶 | 第30-33页 |
| 1.3.1 纤维素及纤维素材料 | 第30-31页 |
| 1.3.2 纤维素纳米晶 | 第31-32页 |
| 1.3.3 纤维素纳米晶作为酶载体存在的问题 | 第32-33页 |
| 1.4 二肽类物质及其生物法制备 | 第33-39页 |
| 1.4.1 丙谷二肽 | 第33-34页 |
| 1.4.2 肌肽 | 第34页 |
| 1.4.3 肽的人工合成 | 第34-39页 |
| 1.4.3.1 水相中的酶促肽合成 | 第35-36页 |
| 1.4.3.2 传统有机相中的酶促肽合成 | 第36-38页 |
| 1.4.3.3 新型离子液体中的酶促肽合成 | 第38-39页 |
| 1.5 深度共熔溶剂中的酶催化反应 | 第39-40页 |
| 1.6 本研究的主要内容和意义 | 第40-42页 |
| 第二章 磁性纤维素纳米晶MNCC的制备及表征 | 第42-58页 |
| 2.1 实验材料 | 第42页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第42-43页 |
| 2.3 实验方法 | 第43-45页 |
| 2.3.1 共沉淀-静电自组装法制备磁性纤维素纳米晶（MNCC-A） | 第43页 |
| 2.3.2 共沉淀-交联法制备磁性纤维素纳米晶（MNCC-B） | 第43-44页 |
| 2.3.3 MNCC的扫描电镜分析 | 第44页 |
| 2.3.4 MNCC的透射电镜分析 | 第44页 |
| 2.3.5 MNCC的傅里叶红外光谱（FTIR）分析 | 第44页 |
| 2.3.6 MNCC的X-射线衍射（XRD）分析 | 第44页 |
| 2.3.7 MNCC的磁饱和强度（Ms）分析 | 第44页 |
| 2.3.8 Zeta电位分析 | 第44-45页 |
| 2.3.9 热重分析 | 第45页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第45-56页 |
| 2.4.1 磁性纤维素纳米晶（MNCC-A）的制备及表征 | 第45-50页 |
| 2.4.1.1 MNCC-A的形貌分析 | 第45-46页 |
| 2.4.1.2 MNCC-A的傅里叶红外光谱（FTIR）分析 | 第46-47页 |
| 2.4.1.3 MNCC-A的X-射线衍射（XRD）分析 | 第47-48页 |
| 2.4.1.4 MNCC-A的饱和磁响强度（VSM）分析 | 第48-49页 |
| 2.4.1.5 Zeta（δ-）电位分析 | 第49-50页 |
| 2.4.1.6 MNCC-A形成机理的探讨 | 第50页 |
| 2.4.2 磁性纤维素纳米晶（MNCC-B）的制备及表征 | 第50-56页 |
| 2.4.2.1 MNCC-B的形貌分析 | 第50-52页 |
| 2.4.2.2 MNCC-B的傅里叶红外光谱（FTIR）分析 | 第52-53页 |
| 2.4.2.3 MNCC-B的X-射线衍射（XRD）分析 | 第53-54页 |
| 2.4.2.4 MNCC-B的饱和磁响应强度（VSM）分析 | 第54-55页 |
| 2.4.2.5 MNCC-B的热重分析 | 第55-56页 |
| 2.4.2.6 MNCC-B的形成机理探讨 | 第56页 |
| 2.5 本章小结 | 第56-58页 |
| 第三章 基于磁性纤维素纳米晶固定化酶的研究 | 第58-85页 |
| 3.1 实验材料 | 第58页 |
| 3.2 主要仪器设备 | 第58-59页 |
| 3.3 实验方法 | 第59-65页 |
| 3.3.1 活化交联法制备磁性纤维素纳米晶-木瓜蛋白酶催化剂（PA-c-MNCC）的研究 | 第59-62页 |
| 3.3.1.1 活化交联法制备PA-c-MNCC的方法及固定化条件优化 | 第59-61页 |
| 3.3.1.2 PA-c-MNCC与游离木瓜蛋白酶的酶学性质研究 | 第61-62页 |
| 3.3.2 沉淀-交联法制备磁性纤维素纳米晶-木瓜蛋白酶催化剂（PA@MNCC）的研究 | 第62-65页 |
| 3.3.2.1 沉淀-交联法制备PA@MNCC的方法及固定化条件优化 | 第62-64页 |
| 3.3.2.2 PA@MNCC与游离木瓜蛋白酶的酶学性质研究 | 第64-65页 |
| 3.3.2.3 PA@MNCC的电镜分析及游离与固定化酶的二级结构含量分析 | 第65页 |
| 3.3.2.4 沉淀-交联法固定化酶的普适性初探 | 第65页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第65-83页 |
| 3.4.1 活化交联法制备磁性纤维素纳米晶-木瓜蛋白酶催化剂（PA-c-MNCC）的研究 | 第65-72页 |
| 3.4.1.1 固定化条件对PA-c-MNCC酶固定化效果的影响规律 | 第65-67页 |
| 3.4.1.2 PA-c-MNCC与游离木瓜蛋白酶的酶学性质对比研究 | 第67-72页 |
| 3.4.2 沉淀-交联法制备磁性纤维素纳米晶-木瓜蛋白酶催化剂（PA@MNCC）的研究 | 第72-83页 |
| 3.4.2.1 固定化条件对PA@MNCC酶固定化效果的影响规律 | 第72-76页 |
| 3.4.2.2 PA@MNCC与游离木瓜蛋白酶酶学性质对比研究 | 第76-81页 |
| 3.4.2.3 PA@MNCC的电镜分析 | 第81页 |
| 3.4.2.4 PA@MNCC以及游离木瓜蛋白酶二级结构含量对比研究 | 第81-82页 |
| 3.4.2.5 沉淀-交联法固定化酶的普适性初探 | 第82-83页 |
| 3.5 本章小结 | 第83-85页 |
| 第四章 MNCC与木瓜蛋白酶相互作用的分子动力学模拟研究 | 第85-96页 |
| 4.1 模拟方法 | 第85-87页 |
| 4.1.1 木瓜蛋白酶结构的获取 | 第85页 |
| 4.1.2 MNCC的模型简化思路与模型构建 | 第85-86页 |
| 4.1.3 模拟方法 | 第86-87页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第87-95页 |
| 4.2.1 分子模拟过程的体系预平衡 | 第87-89页 |
| 4.2.1.1 能量最小化过程 | 第87-88页 |
| 4.2.1.2 NVT与NPT平衡过程 | 第88-89页 |
| 4.2.2 磁性纤维素纳米晶-木瓜蛋白酶相互作用过程的分子动力学研究 | 第89-92页 |
| 4.2.2.1 PA-MNCC相互作用的径向分布函数分析 | 第89页 |
| 4.2.2.2 PA-MNCC相互作用的体系能量研究 | 第89-91页 |
| 4.2.2.3 PA-MNCC相互作用的氢键作用 | 第91-92页 |
| 4.2.3 磁性纤维素纳米晶-木瓜蛋白酶相互作用对酶结构的影响 | 第92-95页 |
| 4.2.3.1 PA-MNCC相互作用对酶活性中心的影响 | 第92-93页 |
| 4.2.3.2 MNCC-PA相互作用对酶活性位点二级结构环境的影响 | 第93-94页 |
| 4.2.3.3 PA-MNCC模拟相互作用对酶二级结构含量的影响 | 第94-95页 |
| 4.3 本章小结 | 第95-96页 |
| 第五章 深度共熔溶剂中木瓜蛋白酶催化二肽高效合成的研究 | 第96-112页 |
| 5.1 实验材料 | 第97页 |
| 5.2 主要仪器设备 | 第97-98页 |
| 5.3 实验方法 | 第98-103页 |
| 5.3.1 酶蛋白含量的测定方法及木瓜蛋白酶的酶活测定方法 | 第98页 |
| 5.3.2 PA@MNCC固定化酶的制备 | 第98-99页 |
| 5.3.3 深度共熔溶剂DES的制备 | 第99页 |
| 5.3.4 深度共熔溶剂中酶促Z-丙谷二肽（Z-Ala-Gln）合成的常规过程 | 第99-101页 |
| 5.3.4.1 DES反应介质中含水量对PA@MNCC催化Z-Ala-Gln合成的影响规律 | 第99-100页 |
| 5.3.4.2 反应温度对PA@MNCC催化Z-Ala-Gln合成的影响规律 | 第100页 |
| 5.3.4.3 Gln与Z-Ala-OMe摩尔比对PA@MNCC催化Z-Ala-Gln合成的影响规律 | 第100页 |
| 5.3.4.4 TEA浓度对PA@MNCC催化Z-Ala-Gln合成的影响规律 | 第100页 |
| 5.3.4.4 PA@MNCC催化Z-Ala-Gln的重复使用性能 | 第100-101页 |
| 5.3.5 深度共熔溶剂中酶促Z-肌肽（Z-Ala-His）合成的常规过程 | 第101-102页 |
| 5.3.5.1 DES反应介质中含水量对PA@MNCC催化Z-Ala-His合成的影响规律 | 第101页 |
| 5.3.5.2 反应温度对PA@MNCC催化Z-Ala-His合成的影响规律 | 第101页 |
| 5.3.5.3 His与Z-Ala-OMe摩尔比对PA@MNCC催化Z-Ala-His合成的影响规律 | 第101-102页 |
| 5.3.5.4 TEA浓度对PA@MNCC催化Z-Ala-His合成的影响规律 | 第102页 |
| 5.3.5.5 不同含DES反应介质对PA@MNCC催化Z-Ala-His合成的影响规律 | 第102页 |
| 5.3.6 高效液相色谱（HPLC）分析方法 | 第102-103页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第103-110页 |
| 5.4.1 含DES体系中PA@MNCC催化Z-Ala-Gln合成的研究 | 第103-107页 |
| 5.4.1.1 DES反应介质中含水量对PA@MNCC催化Z-Ala-Gln合成的影响规律 | 第103-104页 |
| 5.4.1.2 反应温度对PA@MNCC催化Z-Ala-Gln合成的影响规律 | 第104-105页 |
| 5.4.1.3 亲核试剂Gln与酰基供体Z-Ala-OMe的摩尔比(G/Z ratio)对PA@MNCC催化Z-Ala-Gln合成的影响规律 | 第105页 |
| 5.4.1.4 TEA对PA@MNCC催化Z-Ala-Gln合成的影响规律 | 第105-106页 |
| 5.4.1.5 PA@MNCC的重复使用性能 | 第106-107页 |
| 5.4.2 含DES体系中PA@MNCC催化Z-Ala-His合成的研究 | 第107-110页 |
| 5.4.2.1 DES反应介质中含水量对PA@MNCC催化Z-Ala-His合成的影响 | 第107-108页 |
| 5.4.2.2 反应温度对PA@MNCC催化Z-Ala-His合成的影响规律 | 第108页 |
| 5.4.2.3 亲核试剂His与酰基供体Z-Ala-OMe的摩尔比(H/Z ratio)对PA@MNCC催化Z-Ala-His合成的影响规律 | 第108-109页 |
| 5.4.2.4 TEA对PA@MNCC催化Z-Ala-His合成的影响规律 | 第109页 |
| 5.4.2.5 DES种类对酶催化Z-Ala-His产率的影响 | 第109-110页 |
| 5.5 本章小结 | 第110-112页 |
| 结论与展望 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-130页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第130-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 附件 | 第134页 |
