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TGF-β1诱导乳腺癌细胞发生EMT转化过程中能量代谢的研究

缩略词对照表第6-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
前言第13-24页
    1. 上皮向间质细胞转化(EMT)第13-16页
        1.1 EMT的标志蛋白第13页
        1.2 EMT的发生过程及特点第13-14页
        1.3 EMT与肿瘤的转移第14-15页
        1.4 EMT转化中存在的不同种类的细胞第15-16页
    2. TGF-β1第16-18页
        2.1 TGF-β家族第16页
        2.2 TGF-β介导的信号通路第16-17页
        2.3 TGF-β与EMT的关系第17-18页
    3. 脂代谢第18-21页
        3.1 细胞内脂代谢的过程第18-19页
        3.2 脂代谢在肿瘤细胞中的研究第19-21页
    4. 乳腺癌的研究的历史和进展第21-22页
        4.1 乳腺癌研究的历史第21页
        4.2 乳腺癌研究的方法与思路第21-22页
            4.2.1 雌激素受体与内分泌治疗第21-22页
            4.2.2 作用于HER2靶点的药物第22页
        4.3 乳腺癌治疗的展望第22页
    5. 研究的目的和意义第22-24页
材料与方法第24-39页
    2.1 实验材料第24-26页
        2.1.1 细胞株第24页
        2.1.2 培养基、血清及胰酶第24页
        2.1.3 Q-PCR-引物合成第24页
        2.1.4 主要试剂及耗材第24-25页
        2.1.5 主要仪器第25-26页
    2.2 实验方法第26-39页
        2.2.1 细胞培养第26-28页
        2.2.2 TGF-β1处理细胞检测细胞生长(MTS)及细胞ATP含量变化第28页
            2.2.2.1 TGF-β1处理第28页
            2.2.2.2 TGF-β1处理细胞检测细胞生长(MTS)第28页
            2.2.2.3 TGF-β1处理细胞检测ATP含量第28页
        2.2.3 细胞ATP检测第28-29页
        2.2.4 细胞计数第29-30页
        2.2.5 DNA提取第30页
        2.2.6 RT-PCR第30-31页
        2.2.7 Mit Green流式检测第31页
        2.2.8 Western blot第31-35页
        2.2.9 细胞侵袭实验第35-37页
        2.2.10 免疫组化第37-39页
实验结果第39-50页
    3.1 TG F-β1诱导MCF-7发生EMT第39-43页
        3.1.1 TGF-β1和Snail1在4种细胞中的表达水平检测第39页
        3.1.2 TGF-β1诱导MCF-7细胞发生EMT标志蛋白的检测第39-40页
        3.1.3 TGF-β1诱导MCF-7细胞发生EMT过程中细胞形态的变化第40-41页
        3.1.4 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT对细胞增殖、侵袭能力和能量水平的影响第41-43页
            3.1.4.1 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT后细胞侵袭能力增加第41-42页
            3.1.4.2 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT后细胞增殖能力降低第42页
            3.1.4.3 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT过程中胞内ATP含量增加第42-43页
    3.2 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT后细胞增强TCA和线粒体氧化磷酸化途径第43-45页
        3.2.1 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT后TCA和氧化磷酸化相关蛋白的变化第43-44页
        3.2.2 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT后线粒体数量增加,线粒体DNA的拷贝数增加第44-45页
    3.3 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT转化细胞脂肪酸β氧化增强,脂肪酸合成降低第45-47页
        3.3.1 不同细胞中CPT1和FASN mRNA表达量第45-46页
        3.3.2 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT胞内脂代谢相关基因相对表达量的变化第46-47页
    3.4 TGF-β1可能通过调控P-AMPK途径调控MCF-7细胞的脂肪代谢第47-48页
    3.5 临床乳腺癌肿瘤组织中上皮和间质细胞中FASN和CPT1的表达变化第48-50页
讨论第50-53页
    4.1 肿瘤能量代谢重编程第50页
    4.2 乳腺癌肿瘤细胞发生EMT转化伴随着能量代谢途径的阶段性改变第50-51页
    4.3 TGF-βl诱导MCF-7发生EMT引起能量代谢途径的改变可能的信号通路第51-53页
结论第53-54页
参考文献第54-60页
附录1: 常见溶液的配制方法第60-62页
附录2: 硕士研究生期间论文发表和项目参与情况第62-63页
综述第63-77页
    参考文献第72-77页
致谢第77页

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