缩略词对照表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
前言 | 第13-24页 |
1. 上皮向间质细胞转化(EMT) | 第13-16页 |
1.1 EMT的标志蛋白 | 第13页 |
1.2 EMT的发生过程及特点 | 第13-14页 |
1.3 EMT与肿瘤的转移 | 第14-15页 |
1.4 EMT转化中存在的不同种类的细胞 | 第15-16页 |
2. TGF-β1 | 第16-18页 |
2.1 TGF-β家族 | 第16页 |
2.2 TGF-β介导的信号通路 | 第16-17页 |
2.3 TGF-β与EMT的关系 | 第17-18页 |
3. 脂代谢 | 第18-21页 |
3.1 细胞内脂代谢的过程 | 第18-19页 |
3.2 脂代谢在肿瘤细胞中的研究 | 第19-21页 |
4. 乳腺癌的研究的历史和进展 | 第21-22页 |
4.1 乳腺癌研究的历史 | 第21页 |
4.2 乳腺癌研究的方法与思路 | 第21-22页 |
4.2.1 雌激素受体与内分泌治疗 | 第21-22页 |
4.2.2 作用于HER2靶点的药物 | 第22页 |
4.3 乳腺癌治疗的展望 | 第22页 |
5. 研究的目的和意义 | 第22-24页 |
材料与方法 | 第24-39页 |
2.1 实验材料 | 第24-26页 |
2.1.1 细胞株 | 第24页 |
2.1.2 培养基、血清及胰酶 | 第24页 |
2.1.3 Q-PCR-引物合成 | 第24页 |
2.1.4 主要试剂及耗材 | 第24-25页 |
2.1.5 主要仪器 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-39页 |
2.2.1 细胞培养 | 第26-28页 |
2.2.2 TGF-β1处理细胞检测细胞生长(MTS)及细胞ATP含量变化 | 第28页 |
2.2.2.1 TGF-β1处理 | 第28页 |
2.2.2.2 TGF-β1处理细胞检测细胞生长(MTS) | 第28页 |
2.2.2.3 TGF-β1处理细胞检测ATP含量 | 第28页 |
2.2.3 细胞ATP检测 | 第28-29页 |
2.2.4 细胞计数 | 第29-30页 |
2.2.5 DNA提取 | 第30页 |
2.2.6 RT-PCR | 第30-31页 |
2.2.7 Mit Green流式检测 | 第31页 |
2.2.8 Western blot | 第31-35页 |
2.2.9 细胞侵袭实验 | 第35-37页 |
2.2.10 免疫组化 | 第37-39页 |
实验结果 | 第39-50页 |
3.1 TG F-β1诱导MCF-7发生EMT | 第39-43页 |
3.1.1 TGF-β1和Snail1在4种细胞中的表达水平检测 | 第39页 |
3.1.2 TGF-β1诱导MCF-7细胞发生EMT标志蛋白的检测 | 第39-40页 |
3.1.3 TGF-β1诱导MCF-7细胞发生EMT过程中细胞形态的变化 | 第40-41页 |
3.1.4 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT对细胞增殖、侵袭能力和能量水平的影响 | 第41-43页 |
3.1.4.1 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT后细胞侵袭能力增加 | 第41-42页 |
3.1.4.2 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT后细胞增殖能力降低 | 第42页 |
3.1.4.3 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT过程中胞内ATP含量增加 | 第42-43页 |
3.2 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT后细胞增强TCA和线粒体氧化磷酸化途径 | 第43-45页 |
3.2.1 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT后TCA和氧化磷酸化相关蛋白的变化 | 第43-44页 |
3.2.2 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT后线粒体数量增加,线粒体DNA的拷贝数增加 | 第44-45页 |
3.3 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT转化细胞脂肪酸β氧化增强,脂肪酸合成降低 | 第45-47页 |
3.3.1 不同细胞中CPT1和FASN mRNA表达量 | 第45-46页 |
3.3.2 TGF-β1诱导MCF-7发生EMT胞内脂代谢相关基因相对表达量的变化 | 第46-47页 |
3.4 TGF-β1可能通过调控P-AMPK途径调控MCF-7细胞的脂肪代谢 | 第47-48页 |
3.5 临床乳腺癌肿瘤组织中上皮和间质细胞中FASN和CPT1的表达变化 | 第48-50页 |
讨论 | 第50-53页 |
4.1 肿瘤能量代谢重编程 | 第50页 |
4.2 乳腺癌肿瘤细胞发生EMT转化伴随着能量代谢途径的阶段性改变 | 第50-51页 |
4.3 TGF-βl诱导MCF-7发生EMT引起能量代谢途径的改变可能的信号通路 | 第51-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
附录1: 常见溶液的配制方法 | 第60-62页 |
附录2: 硕士研究生期间论文发表和项目参与情况 | 第62-63页 |
综述 | 第63-77页 |
参考文献 | 第72-77页 |
致谢 | 第77页 |