| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 缩略词 | 第16-21页 |
| 绪论 | 第21-25页 |
| 1 第一章 炎症因子在肌腱病不同时期的表达谱分析 | 第25-38页 |
| 1.1 引言 | 第25-26页 |
| 1.2 实验试剂与仪器 | 第26-27页 |
| 1.2.1 材料和试剂(如无特殊说明均为invitrogen产品) | 第26页 |
| 1.2.2 实验仪器及材料 | 第26-27页 |
| 1.2.3 相关溶液的配制 | 第27页 |
| 1.3 实验方法 | 第27-31页 |
| 1.3.1 大鼠跟腱肌腱病模型 | 第27页 |
| 1.3.2 炎症因子芯片检测 | 第27-28页 |
| 1.3.3 组织学检测 | 第28-29页 |
| 1.3.4 免疫荧光 | 第29-30页 |
| 1.3.5 统计学分析 | 第30-31页 |
| 1.4 实验结果 | 第31-36页 |
| 1.4.1 炎症因子在急性肌腱损伤中的表达谱 | 第31-33页 |
| 1.4.2 炎症因子在慢性肌腱病中的表达谱 | 第33-36页 |
| 1.5 讨论 | 第36-38页 |
| 2 第二章 炎症因子对于肌腱修复及钙化的调控作用研究 | 第38-57页 |
| 2.1 引言 | 第38-40页 |
| 2.2 实验试剂与仪器 | 第40-41页 |
| 2.2.1 仪器 | 第40页 |
| 2.2.2 材料 | 第40-41页 |
| 2.3 实验方法 | 第41-49页 |
| 2.3.1 hTSPCs细胞培养 | 第41-42页 |
| 2.3.2 hTSPCs功能鉴定 | 第42-44页 |
| 2.3.3 实时荧光定量PCR(real time PCR) | 第44页 |
| 2.3.4 提取RNA | 第44-45页 |
| 2.3.5 逆转录合成cDNA | 第45页 |
| 2.3.6 引物设计 | 第45-47页 |
| 2.3.7 Cell Sheet诱导培养 | 第47页 |
| 2.3.8 骨诱导 | 第47页 |
| 2.3.9 免疫荧光 | 第47-48页 |
| 2.3.10 ELISA | 第48页 |
| 2.3.11 巨噬细胞条件培养基 | 第48页 |
| 2.3.12 统计学分析 | 第48-49页 |
| 2.4 实验结果 | 第49-55页 |
| 2.4.1 促炎症因子对于肌腱修复及钙化的调控作用研究 | 第49-51页 |
| 2.4.2 促炎症因子IL-1β对于TSPCs调控的时效性 | 第51-52页 |
| 2.4.3 抑炎症因子IL-1β对于TSPCs的调控 | 第52-53页 |
| 2.4.4 巨噬细胞分泌的可溶性细胞因子对于Scx表达的调控 | 第53-55页 |
| 2.5 讨论 | 第55-57页 |
| 3 第三章 促炎症因子IL-1B调控TSPCS分化的机制研究 | 第57-81页 |
| 3.1 引言 | 第57-59页 |
| 3.2 实验试剂与仪器 | 第59-60页 |
| 3.2.1 材料和试剂 | 第59页 |
| 3.2.2 质粒、载体及菌株 | 第59页 |
| 3.2.3 试剂配制 | 第59-60页 |
| 3.2.4 实验仪器及材料 | 第60页 |
| 3.2.5 实验动物 | 第60页 |
| 3.2.6 其余试剂仪器 | 第60页 |
| 3.3 实验方法 | 第60-67页 |
| 3.3.1 Scleraxis,Constitutive active HIF-2alpha,Dominant nagetive HIF-2alpha及shRNA逆转录病毒载体构建 | 第60-65页 |
| 3.3.2 荧光定量PCR | 第65页 |
| 3.3.3 小鼠胶原酶肌腱损伤模型 | 第65页 |
| 3.3.4 X-RAY及microCT | 第65页 |
| 3.3.5 组织学 | 第65页 |
| 3.3.6 低氧探针检测 | 第65页 |
| 3.3.7 免疫组化染色 | 第65页 |
| 3.3.8 Western-blot | 第65-66页 |
| 3.3.9 统计学分析 | 第66-67页 |
| 3.4 实验结果 | 第67-80页 |
| 3.4.1 人体及大鼠钙化样本中HIF-2α的表达显著上调 | 第67-69页 |
| 3.4.2 HIF-2α主要高表达在钙化点周围TSPCs中 | 第69页 |
| 3.4.3 HIF-2α的表达在IL-1β信号刺激下显著上调 | 第69-71页 |
| 3.4.4 HIF-2α参与调控IL-1β导致的TSPCs分化异常 | 第71-74页 |
| 3.4.5 HIF-2α抑制TSPCs中SCX的表达 | 第74-77页 |
| 3.4.6 HIF-2α抑制SCX表达参与了异位钙化的发生 | 第77-80页 |
| 3.5 讨论 | 第80-81页 |
| 4 第四章 运用小分子调控炎症反应促进肌腱再生研究 | 第81-95页 |
| 4.1 引言 | 第81页 |
| 4.2 实验试剂与仪器 | 第81页 |
| 4.3 实验方法 | 第81-84页 |
| 4.3.1 大鼠胶原酶损伤模型及治疗 | 第81-82页 |
| 4.3.2 细胞培养 | 第82页 |
| 4.3.3 Cell Sheet诱导分化 | 第82页 |
| 4.3.4 骨系诱导分化 | 第82页 |
| 4.3.5 ELISA | 第82页 |
| 4.3.6 组织学检测 | 第82页 |
| 4.3.7 组织培养 | 第82页 |
| 4.3.8 透射电镜检测修复肌腱的胶原纤维微观结构 | 第82-83页 |
| 4.3.9 统计学分析 | 第83-84页 |
| 4.4 实验结果 | 第84-94页 |
| 4.4.1 地高辛体外抑制HIF-2α调控TSPCs分化 | 第84-86页 |
| 4.4.2 地高辛体内抑制HIF-2α调控肌腱修复 | 第86-88页 |
| 4.4.3 姜黄素体内外促进TSPCs的表型维持 | 第88-92页 |
| 4.4.4 姜黄素调控免疫微环境促进肌腱修复 | 第92-94页 |
| 4.5 讨论 | 第94-95页 |
| 5 总结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-101页 |
| 综述 | 第101-118页 |
| 参考文献 | 第110-118页 |
| 作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第118页 |
