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丁酸钠对H2O2诱导氧化应激HepG2细胞氧化还原稳态及线粒体能量代谢的影响

摘要第3-4页
Abstract第4页
1 绪论第7-13页
    1.1 代谢综合征概述第7页
    1.2 氧化应激和线粒体功能第7-9页
        1.2.1 活性氧自由基与氧化应激第7-8页
        1.2.2 氧化应激与线粒体功能异常第8页
        1.2.3 Nrf2抗氧化信号通路第8-9页
    1.3 丁酸及其研究进展第9-11页
        1.3.1 丁酸概述第9-10页
        1.3.2 NaBu与机体能量代谢第10-11页
        1.3.3 NaBu与氧化应激第11页
    1.4 研究意义和主要内容第11-13页
2 材料与方法第13-19页
    2.1 材料与仪器第13页
        2.1.1 细胞株和主要试剂第13页
        2.1.2 实验主要仪器第13页
    2.2 细胞培养和实验分组第13-14页
        2.2.1 细胞培养第13-14页
        2.2.2 H_2O_2诱导氧化损伤模型的建立第14页
        2.2.3 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞氧化还原稳态的影响第14页
        2.2.4 NaBu孵育对氧化损伤保护作用的机理研究第14页
    2.3 实验方法第14-18页
        2.3.1 MTT法检测细胞存活率第14页
        2.3.2 细胞ROS水平的测定第14页
        2.3.3 细胞抗氧化相关指标的测定第14-15页
        2.3.4 RNA提取及反转录第15页
        2.3.5 实时荧光定量PCR分析第15-16页
        2.3.6 细胞蛋白western blot检测第16-17页
        2.3.7 线粒体DNA拷贝数的测定第17页
        2.3.8 线粒体膜电位的测定第17页
        2.3.9 细胞乙酰CoA含量的测定第17页
        2.3.10 细胞内ATP含量的测定第17页
        2.3.11 线粒体MnSOD和GPX酶活力的测定第17-18页
        2.3.12 细胞内乳酸含量和NADH/NAD+的测定第18页
    2.4 数据处理第18-19页
3 结果与讨论第19-41页
    3.1 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞氧化还原稳态的影响第19-26页
        3.1.1 H_2O_2诱导建立HepG2氧化损伤细胞模型第19页
        3.1.2 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞ROS水平的影响第19-21页
        3.1.3 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞存活率的影响第21-22页
        3.1.4 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞氧化还原状态的影响第22-23页
        3.1.5 硫辛酸、乙酸钠和丙酸钠对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞氧化还原稳态的影响第23-25页
        3.1.6 TSA对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞氧化还原稳态的影响第25-26页
    3.2 NaBu抗氧化作用机制探究第26-29页
        3.2.1 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞Nrf2通路相关基因表达的影响第26-27页
        3.2.2 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞抗氧化关键因子GSK-3β 和Nrf2的调节作用第27-29页
    3.3 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞糖脂代谢的影响第29-33页
        3.3.1 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞糖酵解途径的调节作用第29-32页
        3.3.2 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞 β-氧化代谢的调节作用第32-33页
        3.3.3 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞乙酰CoA的影响第33页
    3.4 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞线粒体能量代谢的影响第33-41页
        3.4.1 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞TCA循环的影响第33-35页
        3.4.2 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞内ATP含量的影响第35-36页
        3.4.3 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞线粒体膜电位的影响第36-37页
        3.4.5 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞线粒体抗氧化酶活性的影响第37页
        3.4.6 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞线粒体DNA拷贝数的影响第37-39页
        3.4.7 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞PGC-1α 的调节作用第39-41页
主要结论与展望第41-42页
    主要结论第41页
    展望第41-42页
致谢第42-43页
参考文献第43-50页
附录A: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第50页

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