摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1 绪论 | 第7-13页 |
1.1 代谢综合征概述 | 第7页 |
1.2 氧化应激和线粒体功能 | 第7-9页 |
1.2.1 活性氧自由基与氧化应激 | 第7-8页 |
1.2.2 氧化应激与线粒体功能异常 | 第8页 |
1.2.3 Nrf2抗氧化信号通路 | 第8-9页 |
1.3 丁酸及其研究进展 | 第9-11页 |
1.3.1 丁酸概述 | 第9-10页 |
1.3.2 NaBu与机体能量代谢 | 第10-11页 |
1.3.3 NaBu与氧化应激 | 第11页 |
1.4 研究意义和主要内容 | 第11-13页 |
2 材料与方法 | 第13-19页 |
2.1 材料与仪器 | 第13页 |
2.1.1 细胞株和主要试剂 | 第13页 |
2.1.2 实验主要仪器 | 第13页 |
2.2 细胞培养和实验分组 | 第13-14页 |
2.2.1 细胞培养 | 第13-14页 |
2.2.2 H_2O_2诱导氧化损伤模型的建立 | 第14页 |
2.2.3 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞氧化还原稳态的影响 | 第14页 |
2.2.4 NaBu孵育对氧化损伤保护作用的机理研究 | 第14页 |
2.3 实验方法 | 第14-18页 |
2.3.1 MTT法检测细胞存活率 | 第14页 |
2.3.2 细胞ROS水平的测定 | 第14页 |
2.3.3 细胞抗氧化相关指标的测定 | 第14-15页 |
2.3.4 RNA提取及反转录 | 第15页 |
2.3.5 实时荧光定量PCR分析 | 第15-16页 |
2.3.6 细胞蛋白western blot检测 | 第16-17页 |
2.3.7 线粒体DNA拷贝数的测定 | 第17页 |
2.3.8 线粒体膜电位的测定 | 第17页 |
2.3.9 细胞乙酰CoA含量的测定 | 第17页 |
2.3.10 细胞内ATP含量的测定 | 第17页 |
2.3.11 线粒体MnSOD和GPX酶活力的测定 | 第17-18页 |
2.3.12 细胞内乳酸含量和NADH/NAD+的测定 | 第18页 |
2.4 数据处理 | 第18-19页 |
3 结果与讨论 | 第19-41页 |
3.1 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞氧化还原稳态的影响 | 第19-26页 |
3.1.1 H_2O_2诱导建立HepG2氧化损伤细胞模型 | 第19页 |
3.1.2 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞ROS水平的影响 | 第19-21页 |
3.1.3 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞存活率的影响 | 第21-22页 |
3.1.4 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞氧化还原状态的影响 | 第22-23页 |
3.1.5 硫辛酸、乙酸钠和丙酸钠对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞氧化还原稳态的影响 | 第23-25页 |
3.1.6 TSA对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞氧化还原稳态的影响 | 第25-26页 |
3.2 NaBu抗氧化作用机制探究 | 第26-29页 |
3.2.1 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞Nrf2通路相关基因表达的影响 | 第26-27页 |
3.2.2 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞抗氧化关键因子GSK-3β 和Nrf2的调节作用 | 第27-29页 |
3.3 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞糖脂代谢的影响 | 第29-33页 |
3.3.1 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞糖酵解途径的调节作用 | 第29-32页 |
3.3.2 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞 β-氧化代谢的调节作用 | 第32-33页 |
3.3.3 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞乙酰CoA的影响 | 第33页 |
3.4 NaBu干预对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞线粒体能量代谢的影响 | 第33-41页 |
3.4.1 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞TCA循环的影响 | 第33-35页 |
3.4.2 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞内ATP含量的影响 | 第35-36页 |
3.4.3 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞线粒体膜电位的影响 | 第36-37页 |
3.4.5 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞线粒体抗氧化酶活性的影响 | 第37页 |
3.4.6 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞线粒体DNA拷贝数的影响 | 第37-39页 |
3.4.7 NaBu对H_2O_2诱导氧化损伤HepG2细胞PGC-1α 的调节作用 | 第39-41页 |
主要结论与展望 | 第41-42页 |
主要结论 | 第41页 |
展望 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-50页 |
附录A: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |