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罗勒烯信号传导途径高通量活体荧光筛选体系的建立

摘要第4-5页
Abstract第5页
第一章 文献综述第11-21页
    1.1 植物通讯第11-15页
        1.1.1 挥发性有机物质的分类第11页
        1.1.2 挥发性有机物质与昆虫行为的关系第11页
        1.1.3 挥发性有机物质与植物对食草昆虫抗性的关系第11-12页
        1.1.4 挥发性有机物质与植物对病原菌抗性的关系第12-15页
    1.2 β-罗勒烯第15-16页
        1.2.1 罗勒烯的结构与理化性质第15页
        1.2.2 罗勒烯在植物中的分布情况第15-16页
        1.2.3 罗勒烯在植物在植物防御中的作用第16页
    1.3 荧光素酶第16-20页
        1.3.1 荧光素酶的种类第17页
        1.3.2 荧光素酶的发光原理第17-18页
        1.3.3 荧光素酶的应用第18-20页
            1.3.3.1 荧光素酶基因标记基因第18-19页
            1.3.3.2 活体生物体内成像第19页
            1.3.3.3 荧光报告系统第19-20页
    1.4 研究的目的与意义第20-21页
第二章 拟南芥防御途径指示基因PR1、PDF1.2、VSP2基因启动子的生物信息学分析第21-28页
    2.1 实验方法第21页
        2.1.1 方法第21页
    2.2 结果与分析第21-27页
        2.2.1 PR1、PDF1.2、VSP2启动子序列生物信息学分析第21-23页
        2.2.2 PR1启动子序列核心调控元件的分析第23-25页
        2.2.3 PDF1.2启动子序列核心调控元件的分析第25-26页
        2.2.4 VSP2启动子序列核心调控元件的分析第26-27页
    2.3 讨论第27-28页
第三章 PR1、PDF1.2、VSP2基因启动子序列荧光素酶基因表达质粒的构建第28-41页
    3.1 材料与方法第28-36页
        3.1.1 材料第28-29页
            3.1.1.1 供试材料第28页
            3.1.1.2 菌株第28页
            3.1.1.3 载体与质粒第28页
            3.1.1.4 分子生物学试剂第28页
            3.1.1.5 仪器设备第28-29页
            3.1.1.6 培养基第29页
        3.1.2 方法第29-36页
            3.1.2.1 PR1、PDF1.2、VSP2基因启动子序列的特异性引物设计第29-30页
            3.1.2.2 拟南芥总DNA的提取第30-31页
            3.1.2.3 目的基因启动子序列的扩增第31页
            3.1.2.4 PCR产物回收第31-32页
            3.1.2.5 pEASY-Blunt平末端连接及热激法转化大肠杆菌第32页
            3.1.2.6 菌落PCR、提取质粒及双酶切验证第32-34页
            3.1.2.7 菌种保存和测序第34-35页
            3.1.2.8 pPR1、pPDF1.2、pVSP2序列的比对第35页
            3.1.2.9 荧光表达的构建第35页
            3.1.2.10 大肠杆菌DH5α感受态和农杆菌GV3101感受态的转化第35-36页
    3.2 结果与分析第36-41页
        3.2.1 PR1、PDF1.2、VSP2基因启动子序列的扩增第36-37页
        3.2.2 测序结果比对第37-39页
        3.2.3 PR1、PDF1.2、VSP2启动子与荧光素酶基因表达质粒的构建第39页
        3.2.4 荧光素酶基因表达质粒转化根癌农杆菌与菌落PCR检测结果第39-41页
第四章 拟南芥的遗传转化及转化子筛选第41-49页
    4.1 材料与方法第41-46页
        4.1.1 材料第41-43页
            4.1.1.1 供试品种第41页
            4.1.1.2 菌株和载体第41页
            4.1.1.3 药品与试剂第41页
            4.1.1.4 仪器设备第41页
            4.1.1.5 培养基第41-43页
            4.1.1.6 抗生素第43页
        4.1.2 方法第43-46页
            4.1.2.1 拟南芥的种植第43-44页
            4.1.2.2 浸花法转化拟南芥第44页
            4.1.2.3 抗性苗的筛选与检测,第44-45页
            4.1.2.4 转基因植株的纯合子筛选第45-46页
    4.2 结果与分析第46-49页
        4.2.1 转化子的筛选第46页
        4.2.2 PCR检测抗性苗第46-47页
        4.2.3 T_2代转基因植株的分离比统计第47-48页
        4.2.4 转基因纯和植株的筛选第48-49页
第五章 PR1pro和PDF1.2pro纯合子转基因植株的Luciferase荧光检测第49-52页
    5.1 材料与方法第49-50页
        5.1.1 材料第49页
            5.1.1.1 供试材料第49页
            5.1.1.2 药品试剂第49页
            5.1.1.3 仪器设备第49页
        5.1.2 方法第49-50页
            5.1.2.1 纯和转基因植株的处理第49页
            5.1.2.2 高灵敏CCD活体荧光成像系统的组装第49-50页
            5.1.2.3 利用CCD活体荧光成像系统进行荧光检测第50页
    5.2 结果与分析第50-51页
        5.2.1 纯合子转基因植株的荧光检测第50-51页
    5.3 讨论第51-52页
第六章 全文总结与创新点第52-54页
    6.1 总结第52-53页
    6.2 创新点第53-54页
参考文献第54-60页
缩写表第60-62页
致谢第62-64页
作者简介第64页

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