| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| ·植酸和植酸酶 | 第14-15页 |
| ·植酸酶的来源 | 第15-16页 |
| ·植物来源的植酸酶 | 第15页 |
| ·动物来源的植酸酶 | 第15页 |
| ·微生物来源的植酸酶 | 第15-16页 |
| ·植酸酶的分类 | 第16-17页 |
| ·新型植酸酶 | 第17页 |
| ·植酸酶基因工程表达系统 | 第17-18页 |
| ·植酸酶的应用及发展 | 第18-21页 |
| ·植酸酶作为添加剂的应用 | 第18-20页 |
| ·植酸酶生物技术的应用 | 第20页 |
| ·植酸酶的发展前景 | 第20-21页 |
| ·本课题设计思路 | 第21-24页 |
| ·研究内容和意义 | 第21-22页 |
| ·实验方案及流程 | 第22-23页 |
| ·研究创新点 | 第23-24页 |
| 第二章 植酸酶appAM8在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第24-38页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第24页 |
| ·试剂、酶和试剂盒 | 第24页 |
| ·主要的溶液配制 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·层析柱 | 第25页 |
| ·主要的仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-33页 |
| ·大肠杆菌工程菌pET-28a(+)-appAM8的构建 | 第26-29页 |
| ·感受态细胞BL21(DE3)制备与重组质粒转化 | 第29-30页 |
| ·重组植酸酶appAM8在大肠杆菌中的诱导表达 | 第30页 |
| ·重组植酸酶在大肠杆菌中的表达检测 | 第30-31页 |
| ·重组植酸酶appAM8的大量表达及纯化 | 第31-32页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-36页 |
| ·pET-28a(+)-appAM8表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·重组植酸酶appAM8的小量表达及鉴定 | 第34-35页 |
| ·植酸酶appAM8在大肠杆菌中的大量表达和纯化 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 重组植酸酶appAM8的性质研究 | 第38-46页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·主要的试剂 | 第38页 |
| ·主要的仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·植酸酶酶活力的测定 | 第38-39页 |
| ·重组植酸酶appAM8的性质 | 第39-40页 |
| ·实验结果 | 第40-44页 |
| ·重组植酸酶E-appAM8和P-appAM8的最适pH和最适温度 | 第40-41页 |
| ·植酸酶E-appAM8和P-appAM8的耐热性和热稳定性 | 第41-42页 |
| ·植酸酶E-appAM8和P-appAM8的动力学常数Km和Vmax | 第42-43页 |
| ·植酸酶E-appAM8和P-appAM8的热稳定性荧光光谱分析 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 重组植酸酶appA-2QN在毕赤酵母中的高效表达 | 第46-51页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·菌株和质粒 | 第46页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-48页 |
| ·菌种的活化 | 第47页 |
| ·重组酵母在5L发酵罐中发酵表达植酸酶 | 第47页 |
| ·表达产物植酸酶的SDS-PAGE分析 | 第47页 |
| ·蛋白浓度测定和植酸酶活性测定 | 第47页 |
| ·发酵过程中甲醇含量的测定 | 第47-48页 |
| ·发酵过程中甘油含量的测定 | 第48页 |
| ·结果和分析 | 第48-50页 |
| ·在5 L发酵罐中重组菌株的生长与植酸酶的表达 | 第48页 |
| ·重组植酸酶的SDS-PAGE分析 | 第48-49页 |
| ·发酵过程中甘油含量的测定 | 第49页 |
| ·发酵过程中甲醇含量的测定 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 总结与展望 | 第59-61页 |
| 附录Ⅰ | 第61-62页 |
| 附录Ⅱ | 第62-63页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 个人简况及联系方式 | 第65-66页 |
| 承诺书 | 第66-67页 |
