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RNA干扰技术研究五氯酚PCP对MCF-7细胞类固醇激素相关基因表达的影响

縮写与符号第1-7页
摘要第7-9页
Abstracts第9-12页
第1章 文献综述第12-22页
   ·五氯酚的污染现状第12-13页
   ·五氯酚对生物体的毒性研究第13-14页
   ·五氯酚干扰内分泌系统的研究第14-17页
     ·受体介导反应第15-16页
     ·非受体介导反应第16页
     ·影响内分泌系统、神经系统与免疫系统的综合效应第16-17页
   ·RNA干扰技术的简介第17-19页
     ·RNAi的作用机制与特点第17-18页
     ·RNAi的应用第18-19页
   ·类固醇合成酶关键基因的功能研究第19-22页
     ·CYP17第19-20页
     ·CYP19第20页
     ·StAR第20-21页
     ·17β-HSD第21-22页
第2章 绪论第22-26页
   ·选题的背景及意义第22页
   ·研究目的和主要研究内容第22-23页
     ·研究目的第22-23页
     ·研究内容第23页
   ·创新之处第23-24页
   ·技术路线第24-26页
第3章 五氯酚对MCF-7和U2-OS细胞中类固醇激素合成酶关键基因的影响第26-40页
   ·引言第26页
   ·实验材料第26-27页
   ·实验方法第27-33页
     ·细胞培养第27页
     ·细胞冻存第27-28页
     ·MTT法检测MCF-7和U2-OS细胞的抑制作用第28页
     ·细胞总RNA的提取第28-30页
     ·cDNA样品的制备第30-31页
     ·荧光定量RCR的引物的设计合成与检测第31-32页
     ·Real-time PCR第32-33页
     ·数据统计分析第33页
   ·实验结果第33-37页
     ·MTT法检测MCF-7和U2-OS细胞抑制的结果第33-34页
     ·细胞总RNA提取结果第34-35页
     ·PCP对MCF-7细胞中类固醇激素合成酶关键基因表达的影响第35-36页
     ·PCP对U2-OS细胞中类固醇激素合成酶关键基因表达的影响第36-37页
   ·讨论第37-39页
   ·结论第39-40页
第4章 PCP对ERa基因干扰后的MCF-7细胞中类固醇激素合成酶关键基因的影响第40-52页
   ·前言第40页
   ·实验材料第40-41页
   ·实验方法第41-45页
     ·ERa RNA干扰质粒载体的构建第41-42页
     ·G418筛选稳定表达的MCF-7细胞系第42页
     ·质粒的转染第42-43页
     ·Real-time PCR检测ER a mRNA的表达第43-44页
     ·western印迹法检测RNAi后ERa蛋白的表达第44-45页
     ·Real-time PCR检测PCP对MCF-7细胞中ER a干扰后类固醇激素合成酶关键基因表达的影响第45页
     ·数据统计分析第45页
   ·实验结果第45-48页
     ·Real-time PCR检测干扰质粒对MCF-7细胞中ER a mRNA表达的影响第45-46页
     ·western免疫印迹法检测干扰质粒对MCF-7细胞中ER a蛋白表达的影响第46-47页
     ·PCP对MCF-7细胞中ER a干扰后类固醇激素合成酶关键基因表达的影响第47-48页
   ·讨论第48-50页
   ·结论第50-52页
第5章 全文总结和展望第52-54页
   ·全文总结第52-53页
   ·展望第53-54页
参考文献第54-62页
致谢第62-64页
附录第64页

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