摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
主要符号、缩略词、术语等注释说明表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-13页 |
一 材料和方法 | 第13-27页 |
·材料 | 第13-14页 |
·标本 | 第13页 |
·试剂 | 第13-14页 |
·主要仪器设备 | 第14页 |
·免疫组化检测C/EBPβ蛋白质在子宫颈癌组织中的表达 | 第14-15页 |
·石蜡切片制备 | 第14-15页 |
·用SP 法免疫组化染色检测C/EBPβ蛋白蛋白的表达 | 第15页 |
·判断标准 | 第15页 |
·统计学处理 | 第15页 |
·实时定量PCR 实验 | 第15-19页 |
·引物序列(2OD ,PAGE 级) | 第15-16页 |
·样本Total RNA 提取- Trizol 法提取组织、细胞Total RNA | 第16页 |
·Total RNA 质量检测 | 第16-17页 |
·DNaseI 消化基因组DNA | 第17页 |
·总RNA 纯化 | 第17页 |
·Total RNA 纯化效果验证 | 第17-18页 |
·Total RNA 消化效果验证 | 第18页 |
·RNA 逆转录- Oligo(dT)15 法RNA 逆转录 | 第18-19页 |
·RealTime PCR 反应 | 第19页 |
·C/EBPβ基因克隆载体的构建 | 第19-23页 |
·实验流程描述 | 第19-20页 |
·载体的线性化 | 第20页 |
·目的基因片段的获取 | 第20-21页 |
·重组克隆制备 | 第21-23页 |
·阳性克隆的PCR 鉴定 | 第23页 |
·子宫颈癌HeLa 细胞的复苏、传代及转染 | 第23-25页 |
·细胞复苏 | 第23-24页 |
·细胞的换液 | 第24页 |
·细胞的传代 | 第24页 |
·细胞的冻存 | 第24页 |
·细胞转染 | 第24-25页 |
·免疫组织化学法检测 HeLa 细胞中的表达 | 第25页 |
·细胞爬片 | 第25页 |
·免疫组织化学染色 | 第25页 |
·共聚焦显微镜检测HeLa 细胞中的表达 | 第25页 |
·细胞爬片 | 第25页 |
·激光共聚焦显微镜检测 | 第25页 |
·MTT 法测定重组质粒组、空载体组、空白对照组HeLa 细胞存活数量 | 第25-26页 |
·原理 | 第25页 |
·方法 | 第25-26页 |
·AnnexinV/PI 双色法流式细胞仪检测转导HeLa 细胞凋亡的影响 | 第26-27页 |
·方法 | 第26-27页 |
二 结果 | 第27-41页 |
·免疫组化分析C/EBPβ蛋白在子宫颈组织中的表达 | 第27-29页 |
·新疆地区维吾尔族、汉族子宫颈组织C/EBPβ蛋白检测结果分析 | 第28页 |
·新疆维吾尔族、汉族子宫颈癌组织C/EBPβ蛋白表达与病理分级的关系 | 第28页 |
·新疆维吾尔族、汉族子宫颈癌组织C/EBPβ蛋白表达与临床分期的关系 | 第28-29页 |
·C/EBPβ基因在子宫颈癌组织中转录水平的表达 | 第29-33页 |
·RealTime RT-PCR 产物电泳检测 | 第29-30页 |
·看家基因扩增曲线图 | 第30-31页 |
·看家基因溶解曲线图 | 第31-33页 |
·目的基因过表达载体构建、测序结果 | 第33-37页 |
·PCR 扩增目的基因图 | 第33页 |
·PCR 片段的酶切图 | 第33-34页 |
·C/EBPβ5’测序结果 | 第34-37页 |
·真核转染实验验证CEBPβ基因功能 | 第37-41页 |
·免疫组织化学检测转染后CEBPβ基因蛋白质表达水平 | 第37-38页 |
·转染后激光共聚焦检测结果 | 第38页 |
·真核转染HeLa 细胞后MTT 结果 | 第38-39页 |
·AnnexinV/PI 双色法流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第39-41页 |
三 讨论 | 第41-45页 |
四 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
文献综述 | 第49-54页 |
参考文献 | 第52-54页 |
附录一 | 第54-59页 |
附录二 | 第59-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简历 | 第62页 |