| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-16页 |
| 参考文献 | 第12-16页 |
| 第一部分 miR-98在糖尿病SD大鼠血管内皮细胞增殖中的作用 | 第16-35页 |
| 1 实验材料 | 第16-17页 |
| ·细胞系、实验动物 | 第16页 |
| ·实验试剂 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16-17页 |
| ·常用实验试剂的配制 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-26页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·试剂与高脂高糖饲料配方 | 第18页 |
| ·糖尿病大鼠模型的建立与动物分组 | 第18页 |
| ·Real-time PCR检测血管组织中miR-98的表达 | 第18-20页 |
| ·Western blotting检测组织中Cyclin D2及相关蛋白的表达 | 第20-22页 |
| ·RAOEC细胞的复苏、传代、传板、培养与冻存 | 第22-23页 |
| ·高糖处理RAOEC细胞方法 | 第23页 |
| ·MTT检测高糖对RAOEC细胞增殖的作用 | 第23-24页 |
| ·凯基细胞DNA含量检测试剂盒测定细胞周期 | 第24页 |
| ·Real-time PCR检测高糖处理细胞后miR-98的表达 | 第24-25页 |
| ·Western blotting检测高糖处理细胞后Cyclin D2及其相关蛋白的表达 | 第25页 |
| ·统计方法 | 第25-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-31页 |
| ·SD大鼠体重和血糖的变化 | 第26页 |
| ·Real-time PCR在个体水平检测miR-98的表达 | 第26-27页 |
| ·Western blotting检测组织中Cyclin D2及相关因子的表达 | 第27-28页 |
| ·MTT检测高糖处理对RAOEC细胞增殖的作用 | 第28-29页 |
| ·细胞周期的检测结果 | 第29页 |
| ·Real-time PCR在细胞水平检测miR-98的表达 | 第29-30页 |
| ·Western blotting检测Cyclin D2及相关因子的表达 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-35页 |
| 第二部分 miR-98通过调节Cyclin D2表达抑制RAOEC细胞的增殖 | 第35-57页 |
| 1 实验材料 | 第35-37页 |
| ·细胞系 | 第35页 |
| ·菌种来源 | 第35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35-36页 |
| ·实验主要试剂 | 第36页 |
| ·常用试剂的配制 | 第36-37页 |
| 2 实验方法 | 第37-44页 |
| ·pcDNA-GFP-cyclin D2-3’UTR载体构建 | 第37-40页 |
| ·pcDNA-GFP-cyclin D2-3’UTR载体的中量提取及纯化 | 第40页 |
| ·与cyclin D2基因相关的miRNAs的合成 | 第40-41页 |
| ·pcDNA-GFP-cyclin D2-3’UTR载体与miR-98共转染RAOEC细胞 | 第41页 |
| ·荧光倒置显微镜和流式细胞仪检测GFP的表达情况 | 第41页 |
| ·MTT检测miR-98对RAOEC细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
| ·miR-98对RAOEC细胞周期和细胞凋亡的影响 | 第42页 |
| ·Real-time PCR检测转染后miR-98的表达 | 第42-43页 |
| ·Western blotting检测miR-98调控Cyclin D2及相关因子的表达 | 第43-44页 |
| ·统计方法 | 第44页 |
| 3 实验结果 | 第44-50页 |
| ·重组载体pcDNA-GFP-cyclin D2-3'UTR的酶切鉴定结果 | 第44-45页 |
| ·miR-98对pcDNA-GFP-cyclin D2-3’UTR的调控 | 第45-46页 |
| ·MTT检测miR-98对RAOEC细胞增殖的结果 | 第46页 |
| ·miR-98对RAOEC细胞周期和细胞凋亡的影响 | 第46-47页 |
| ·Real-time PCR检测转染后细胞内miR-98的表达 | 第47-48页 |
| ·Western blotting检测miR-98调控Cyclin D2及相关因子的表达 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 创新和小结 | 第57-58页 |
| 文献综述 | 第58-66页 |
| 1. miRNAs的作用机制 | 第58-59页 |
| 2. miRNAs的检测方法 | 第59页 |
| 3. miRNAs与糖尿病 | 第59-60页 |
| ·miRNAs与1型糖尿病 | 第59页 |
| ·miRNAs与2型糖尿病 | 第59-60页 |
| 4. miRNAs与肿瘤 | 第60-61页 |
| ·miRNAs与肺癌 | 第60页 |
| ·miRNAs与乳腺癌 | 第60页 |
| ·miRNAs与肝细胞癌 | 第60页 |
| ·miRNAs与胰腺癌 | 第60-61页 |
| ·miRNAs与其他癌症 | 第61页 |
| 5. 展望 | 第61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 研究生期间发表的文章 | 第67页 |
