黄芩苷通过激活Nrf2-ARE信号通路减轻大鼠肠缺再灌注损伤

【摘要】：目的：研究黄芩苷对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用,探讨Nrf2-ARE信号通路在减轻肠黏膜损伤中的作用。方法：雄性Wistar大鼠32只,随机分为假手术(sham-operated, SO)组、黄芩苷(bacalin, BA)组、肠缺血再灌注(ⅡR)组、黄芩苷+肠缺血再灌注(BA+ⅡR)组。通过阻断大鼠肠系膜上动脉1h,恢复血流2h建立大鼠肠缺血再灌注模型。BA组和BA+ⅡR组于造模前30 min腹腔注射黄芩苷100 mg/kg体重,SO组和ⅡR组给予等量生理盐水。再灌注2h后取材,HE染色观察小肠组织损伤程度,硫代巴比妥酸法测定血清丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量,ELISA法检测血浆D-乳酸含量,水溶性四唑盐1(water soluble tetrazolium salt 1, WST-1)法测定血清超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)活性,免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)法检测核因子相关因子2(NF-E2-related factor 2, Nrf2)、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1, HO-1)、NF-κBp65、TNF-α、Occludin蛋白表达。Western blot(WB)法检测Nrf2、HO-1在小肠组织中的表达。结果：ⅡR组与SO组比较,大鼠小肠黏膜损伤Chiu氏评分升高、血清SOD活性降低、MDA含量增加、血浆D-乳酸含量增多(P值均0.01),大鼠小肠组织中Nrf2、HO-1表达增加(IHC:P0.05, WB:P0.01), NF-icBp65、TNF-α表达增加(P0.01),Occludin蛋白表达减少(P0.01)。BA组小肠组织Nrf2、HO-1表达比SO组显著增加(IHC:P0.05, WB:P0.01)。BA+IIR组与ⅡR组相比,小肠黏膜损伤Chiu氏评分降低、血清SOD活性升高、MDA含量减少、血浆D-乳酸含量减少、小肠组织Nrf2、HO-1表达增加(P0.01), NF-KBp65、TNF-α表达减少(P0.01), Occludin蛋白表达增加(P0.05)。结论：黄芩苷对大鼠肠缺血再灌注损伤有良好的保护作用,其机制可能是激活Nrf2-ARE信号通路进而增加HO-1表达,增强肠组织清除氧自由基的能力,抑制NF-κB的活化转位,减少TNF-α的表达,从而抑制了Occludin表达的下调,对肠缺血再灌注损伤肠黏膜上皮细胞紧密连接起保护作用。
【关键词】：肠缺血再灌注损伤 黄芩 Occludin 核因子相关性因子2 核因子-κB
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R285.5