| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一部分 试验研究 肌肉特异性表达MSTN siRNA与hFAD3在牛NCAPG-LCORL位点定点整合研究 | 第11-56页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 1 材料与方法 | 第13-32页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第13页 |
| ·方法 | 第13-32页 |
| 2 结果 | 第32-48页 |
| ·MRF4启动子细胞水平验证结果 | 第32-34页 |
| ·gRNA的设计及切割载体的构建结果 | 第34-35页 |
| ·打靶载体的构建及鉴定结果 | 第35-39页 |
| ·细胞水平的功能验证结果 | 第39-43页 |
| ·单克隆细胞筛选结果 | 第43-47页 |
| ·转基因克隆胚胎的生产 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| ·整合位点的选择及打靶载体的构建 | 第48页 |
| ·肌肉特异性双向共表达载体对相关基因表达的影响 | 第48-50页 |
| ·肌肉特异性双向共表达载体对脂肪酸中n6/n3比值的影响 | 第50页 |
| ·转基因单克隆细胞克隆胚胎的发育效率 | 第50-51页 |
| 4 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 第二部分 文献综述 CRISPR/Cas9在哺乳动物基因组定点编辑的研究进展 | 第56-67页 |
| 1 CRISPR/Cas系统的发展历程 | 第56-57页 |
| 2 新型CRISPR/Cas9系统 | 第57-59页 |
| ·Cas9 nickase (Cas9n) | 第57页 |
| ·Dead Cas9 (dCas9) | 第57-58页 |
| ·Light-activated Cas9 | 第58-59页 |
| 3 CRISPR/Cas9在哺乳动物基因组定点编辑中的应用 | 第59-62页 |
| ·CRISPR/Cas9在哺乳动物基因组定点敲除中的应用 | 第60-61页 |
| ·CRISPR/Cas9在哺乳动物基因组定点敲入中的应用 | 第61-62页 |
| 4 结语 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第68页 |
