| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-26页 |
| ·猪圆环病毒(PCV)的研究进展 | 第10-17页 |
| ·猪圆环病毒 | 第10页 |
| ·PCV基因组结构和编码蛋白 | 第10-12页 |
| ·PCV2相关疾病,机理,检测及防控 | 第12-15页 |
| ·PCV2疫苗的研究现状 | 第15-17页 |
| ·大肠杆菌表达系统概述 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌表达系统的特点 | 第17页 |
| ·大肠杆菌表达系统的发展及应用 | 第17-18页 |
| ·毕赤酵母表达系统概述 | 第18-21页 |
| ·毕赤酵母表达系统的特性 | 第19页 |
| ·毕赤酵母表达系统的发展及应用 | 第19-21页 |
| ·杆状病毒表达系统概述 | 第21-24页 |
| ·杆状病毒系统的生物学特征 | 第21-22页 |
| ·杆状病毒/昆虫表达系统的进展及应用 | 第22-24页 |
| ·Cap蛋白表达生产研究现状 | 第24-25页 |
| ·本论文的主要内容和意义 | 第25-26页 |
| 第2章 tCap在大肠杆菌中的表达生产 | 第26-39页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·基因及引物 | 第26页 |
| ·实验药品与试剂 | 第26页 |
| ·实验试剂的配制 | 第26-29页 |
| ·实验方法 | 第29-33页 |
| ·大肠杆菌的培养及菌种保藏 | 第29页 |
| ·tCap蛋白表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·tCap蛋白表达菌株的构建及表达 | 第30-33页 |
| ·实验结果 | 第33-36页 |
| ·tCap蛋白表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·重组表达菌株中tCap的表达检测 | 第34-36页 |
| ·tCap蛋白的纯化 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-39页 |
| 第3章 tCap在毕赤酵母中的表达生产 | 第39-53页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·实验材料 | 第39-41页 |
| ·实验方法 | 第41-45页 |
| ·菌种的培养及保藏 | 第41页 |
| ·毕赤酵母表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·毕赤酵母表达菌株的构建 | 第42-43页 |
| ·毕赤酵母表达菌株的筛选 | 第43页 |
| ·毕赤酵母高表达菌株的高密度发酵 | 第43-44页 |
| ·毕赤酵母表达的tCap的免疫实验及检测 | 第44-45页 |
| ·实验结果 | 第45-52页 |
| ·tCap蛋白表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·毕赤酵母表达菌株的构建 | 第46-47页 |
| ·高拷贝阳性重组菌株的摇瓶诱导表达 | 第47-49页 |
| ·5L生物反应器高密度发酵表达 | 第49-51页 |
| ·tCap蛋白的免疫实验 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 第4章 tCap在杆状病毒中的表达生产 | 第53-65页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·实验材料 | 第53-55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| ·菌种及细胞的培养和保藏 | 第55页 |
| ·转移载体的构建 | 第55-56页 |
| ·重组穿梭杆状病毒质粒的构建 | 第56页 |
| ·Bacmid-tcap重组杆状病毒的验证 | 第56页 |
| ·Bacmid-tcap重组杆状病毒质粒转染Sf9细胞 | 第56-57页 |
| ·P1代Bacmid-tcap重组杆状病毒的收获 | 第57页 |
| ·Bacmid-tcap重组杆状病毒的扩增 | 第57页 |
| ·重组蛋白的表达检测 | 第57-58页 |
| ·重组蛋白在Sf9细胞中表达的优化 | 第58页 |
| ·重组蛋白在Sf9细胞中表达的体外活性检测 | 第58-59页 |
| ·实验结果 | 第59-63页 |
| ·tCap转移载体的构建 | 第59页 |
| ·Bacmid-tcap重组杆状病毒的验证 | 第59页 |
| ·P3代Bacmid-tcap重组杆状病毒的收获及滴度检测 | 第59-61页 |
| ·P3代感染重组蛋白的表达检测 | 第61页 |
| ·重组蛋白在Sf9细胞中表达条件的优化结果 | 第61页 |
| ·Sf9细胞表达重组蛋白的活性检测 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63页 |
| ·本章小结 | 第63-65页 |
| 第5章 总结和展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 发表论文 | 第74页 |