中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
縮略词表 | 第8-9页 |
第一章 引言 | 第9-21页 |
·植物花朵衰老概述 | 第9页 |
·植物蛋白质降解的两种途径 | 第9-15页 |
·蛋白水解酶降解蛋白途径 | 第10页 |
·泛素-蛋白酶体系统降解蛋白途径 | 第10-15页 |
·泛素-蛋白酶体途径的靶蛋白 | 第15-20页 |
·乙烯信号途径中的相关蛋白 | 第15-17页 |
·赤霉素信号途径中的相关蛋白 | 第17-18页 |
·其他相关蛋白 | 第18-20页 |
·研究的目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 影响矮牵牛花朵衰老的蛋白酶体相关基因筛选 | 第21-37页 |
·材料与方法 | 第22-30页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌类材料 | 第22页 |
·番茄总RNA提取 | 第22-23页 |
·cDNA合成 | 第23-24页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第24页 |
·半定量RT-PCR | 第24-26页 |
·DNA回收纯化 | 第26-27页 |
·连接 | 第27页 |
·大肠杆菌转化 | 第27页 |
·农杆菌转化 | 第27-28页 |
·菌液PCR检测阳性克隆 | 第28页 |
·VIGS沉默载体构建 | 第28-29页 |
·病毒诱导基因沉默(VIGS) | 第29-30页 |
·花朵寿命检测 | 第30页 |
·结果与分析 | 第30-36页 |
·VIGS筛选与烟草花朵衰老相关的蛋白酶体基因 | 第30-31页 |
·VIGS筛选与矮牵牛花朵衰老相关的蛋白酶体基因 | 第31-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
·病毒诱导基因沉默方法是初步验证基因功能的有效手段 | 第36页 |
·蛋白酶体相关基因对植物生长和花朵衰老的作用 | 第36-37页 |
第三章 矮牵牛蛋白酶体核心颗粒基因RBB的分离和功能验证 | 第37-48页 |
·材料与方法 | 第37-43页 |
·植物材料 | 第37页 |
·菌类材料 | 第37页 |
·矮牵牛总RNA提取 | 第37-38页 |
·cDNA合成 | 第38页 |
·PhPBB基因的克隆和序列分析 | 第38页 |
·矮牵牛PBB诱导沉默转基因植株创制 | 第38-41页 |
·阳性克隆植株的检测 | 第41-42页 |
·PhPBB基因表达量检测 | 第42页 |
·花朵寿命检测 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-47页 |
·矮牵牛蛋白酶体核心颗粒基因PhPBB的分离 | 第43-44页 |
·PBB诱导沉默植株的创制 | 第44-46页 |
·PBB基因沉默对矮牵牛花朵衰老的影响 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
·矮牵牛诱导转化体系是研究蛋白酶体基因功能的良好模型 | 第47页 |
·蛋白酶体核心颗粒基因PBB影响矮牵牛花朵衰老进程 | 第47-48页 |
第四章 蛋白酶体核心颗粒基因PBB影响矮牵牛花朵衰老的功能机制分析 | 第48-78页 |
·材料与方法 | 第49-55页 |
·植物材料 | 第49-50页 |
·菌类材料 | 第50页 |
·总蛋白提取和测量 | 第50-52页 |
·矮牵牛gai诱导过表达转基因植株创制 | 第52页 |
·gai表达水平检测 | 第52页 |
·花朵寿命统计 | 第52页 |
·乙烯生成量检测 | 第52-53页 |
·SAG、ACO、ACS基因的检测 | 第53页 |
·PhFBH4基因的分离 | 第53-54页 |
·激素和非生物胁迫处理 | 第54页 |
·病毒诱导PhFBH4沉默 | 第54页 |
·矮牵牛PhFBH4过表达和反义沉默转基因植株创制 | 第54-55页 |
·PhFBH4表达量检测 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-73页 |
·GAI蛋白表达量在PBB诱导沉默矮牵牛花朵中的变化 | 第55-56页 |
·GAI蛋白表达量在花朵衰老进程中的变化 | 第56页 |
·矮牵牛gai诱导过表达转基因植株的创制 | 第56-58页 |
·gai过表达对矮牵牛生长的影响 | 第58-59页 |
·gai过表达对矮牵牛花朵衰老的影响 | 第59-60页 |
·GAI互作转录因子PhFBH4基因的克隆和序列分析 | 第60-63页 |
·PhFBH4基因在不同组织中的表达 | 第63-64页 |
·PhFBH4在激素和非生物胁迫下的表达变化 | 第64-65页 |
·VIGS沉默PhFBH4对矮牵牛花朵衰老的影响 | 第65-66页 |
·稳定遗传转化系统验证PhFBH4在矮牵牛花朵衰老中的功能 | 第66-68页 |
·PhFBH4对矮牵牛生长的影响 | 第68-70页 |
·PBB-GAI-PhFBH4对乙烯生物合成的影响 | 第70-72页 |
·PBB影响矮牵牛花朵衰老的其他通路 | 第72-73页 |
·讨论 | 第73-78页 |
·PBB通过GAI蛋白影响花朵衰老 | 第73-74页 |
·GAI对矮牵牛生长发育和花朵衰老的作用 | 第74页 |
·bHLH转录因子PhFBH4在PBB-GAI途径中发挥作用 | 第74-75页 |
·PhFBH4对矮牵牛生长发育中十分重要 | 第75-76页 |
·PBB、GAI和PhFBH4对内源乙烯生成量的影响 | 第76页 |
·蛋白酶体通过非乙烯途径调控花朵衰老 | 第76-78页 |
第五章 结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
个人简历 | 第89页 |