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三氧化二砷(As2O3)对小鼠卵母细胞线粒体DNA的损伤机制研究

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第一章 前言第14-32页
   ·砷的毒性作用简介第14-16页
     ·人体砷暴露途径第14-15页
     ·砷对人体的毒性作用第15页
     ·砷的毒性作用机制第15-16页
   ·砷的生殖毒性第16-20页
     ·砷对生殖细胞的影响第16-17页
     ·砷对胚胎发育的影响第17-18页
     ·砷对生殖器官及生殖能力的影响第18页
     ·砷在胚胎发育过程中的致畸、致癌作用第18-19页
     ·砷对生殖内分泌激素的影响第19页
     ·砷对人类生殖的影响第19-20页
   ·线粒体第20-24页
     ·卵母细胞中线粒体的特殊性第21-22页
     ·线粒体及mtDNA在卵母细胞发育过程中的重要性第22-23页
     ·卵胞质ATP含量对卵子和胚胎的影响第23-24页
   ·自由基第24-27页
     ·自由基的产生第24-25页
     ·自由基引起DNA损伤的实质第25-26页
     ·自由基的清除第26-27页
   ·mtDNA损伤及修复第27-29页
     ·mtDNA损伤的生物学标记第27-28页
     ·mtDNA的损伤修复第28-29页
   ·砷对线粒体的毒性作用第29-30页
   ·砷诱导自由基的生成第30页
   ·研究目的及意义第30-32页
第二章 As_2O_3对小鼠血液、肝脏及肾脏的氧化损伤作用第32-38页
   ·实验动物第32页
   ·实验仪器和设备第32页
   ·主要试剂第32页
   ·实验方法第32-33页
     ·动物染毒第32-33页
     ·动物体重及脏器指数的测定第33页
     ·砷含量,MDA含量及SOD,GSH-Px活力测定第33页
   ·统计分析第33页
   ·实验结果第33-38页
     ·砷染毒对小鼠体重及脏器指数的影响第33-34页
     ·砷在小鼠肝肾脏及血液内的富集及NAC的干预作用第34页
     ·砷染毒对小鼠MDA含量,SOD及GSH-Px活力的影响及NAC的保护作用第34-35页
     ·砷染毒对小鼠抗氧化指数(GSH-Px活性/MDA含量)的影响及NAC的保护作用第35-38页
第三章 As_2O_3对卵母细胞mtDNA的影响初探第38-52页
   ·实验动物第38页
   ·实验仪器和设备第38页
   ·主要试剂第38-39页
   ·主要溶液配制第39-40页
   ·实验方法第40-46页
     ·卵母细胞培养及染毒(体外实验)第40页
     ·动物实验及剂量选择(体内实验)第40-41页
     ·卵母细胞中ROS含量的测定第41-42页
     ·卵母细胞中ATP含量的测定第42页
     ·卵母细胞mtDNA的提取第42-43页
     ·卵母细胞mtDNA拷贝数的检测第43-45页
     ·卵母细胞mtDNA 3867 bp缺失检测第45-46页
   ·统计分析第46页
   ·实验结果第46-52页
     ·As_2O_3对卵母细胞ROS含量的影响(体外实验)第46页
     ·As_2O_3对卵母细胞ATP含量及mtDNA拷贝数的影响(体外实验)#33第46-49页
     ·As_2O_3+NAC对卵母细胞ROS、ATP含量及mtDNA损伤的影响(体外实验)第49-50页
     ·As_2O_3或As_2O_3+NAC对卵母细胞ROS、ATP含量及mtDNA损伤的影响(体内实验)第50-52页
第四章 As_2O_3对卵母细胞mtDNA的损伤机制探讨第52-72页
   ·实验动物第52页
   ·实验仪器和设备第52页
   ·主要试剂第52-53页
   ·主要溶液配制第53-55页
   ·实验方法第55-62页
     ·卵母细胞培养及染毒(体外实验)第55页
     ·动物实验及剂量选择(体内实验)第55页
     ·卵母细胞中ROS含量的测定第55页
     ·卵母细胞nDNA及mtDNA的提取第55-57页
     ·小鼠卵母细胞nDNA/mtDNA中8-OHdG含量的测定第57-58页
     ·小鼠卵母细胞β-半乳糖苷酶活性的测定第58-59页
     ·小鼠卵母细胞溶酶体荧光染色第59页
     ·小鼠卵母细胞内mtTFA/polγ蛋白表达量的检测第59-62页
   ·统计分析第62页
   ·实验结果第62-72页
     ·As_2O_3或As_2O_3+NAC/Tempo对卵母细胞ROS含量的影响(体外实验)第62页
     ·As_2O_3或As_2O_3+NAC/Tempo对卵母细胞nDNA/mtDNA中8-OHdG含量的影响(体外实验)第62-64页
     ·As_2O_3通过ROS途径对小鼠卵母细胞β-半乳糖苷酶活性的影响(体外实验)第64-65页
     ·As_2O_3通过ROS途径对小鼠卵母细胞Lyso-Tracker Red荧光强度的影响(体外实验)第65-66页
     ·As_2O_3通过ROS依赖途径对小鼠卵母细胞mtTFA和polγ蛋白表达水平的影响(体外实验)第66-67页
     ·As_2O_3通过ROS依赖途径造成小鼠卵母细胞mtDNA损伤机制的体内实验验证第67-72页
第五章 讨论第72-80页
   ·As_2O_3对小鼠抗氧化酶系统的影响第73-74页
   ·As_2O_3对卵母细胞线粒体功能的影响第74-76页
   ·ROS在As_2O_3致卵母细胞线粒体损伤中的作用第76-77页
   ·As_2O_3对卵母细胞mtDNA的损伤作用及机制第77-80页
第六章 结论第80-82页
   ·主要结论第80页
   ·研究展望第80-82页
参考文献第82-96页
在学期间的研究成果第96-97页
致谢第97-98页

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