| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 英文缩略表 | 第9-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-21页 |
| ·禽流感病毒的生物学特性 | 第10页 |
| ·禽流感病毒的病原学 | 第10页 |
| ·禽流感病毒对禽类的致病性 | 第10页 |
| ·禽流感病毒的公共卫生学意义 | 第10-11页 |
| ·宿主抵抗禽流感病毒的防御机制 | 第11页 |
| ·RLRs的研究进展 | 第11-16页 |
| ·天然免疫系统 | 第11-12页 |
| ·RLRs家族成员结构和功能 | 第12页 |
| ·RLRs介导的信号传导调控机制 | 第12-13页 |
| ·RLRs对病毒的识别 | 第13-14页 |
| ·RIG-I的抗病毒机理 | 第14-15页 |
| ·RIG-I的泛素化修饰 | 第15-16页 |
| ·RIG-I参与炎症反应 | 第16页 |
| ·转基因鸡的国内外研究进展 | 第16-20页 |
| ·转基因鸡研究的发展历程 | 第16-17页 |
| ·转基因鸡模型的建立方法 | 第17-19页 |
| ·转基因鸡模型的应用与前景 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第2章 RIG-I转基因鸡模型的建立与其遗传稳定性研究 | 第21-44页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·质粒、细胞、菌株、新生种蛋 | 第21页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要配制试剂 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-33页 |
| ·引物设计与合成 | 第22-23页 |
| ·pGV205-RIG-I重组慢病毒滴度的测定 | 第23页 |
| ·受精蛋胚盘注射及孵化 | 第23页 |
| ·RIG-I转基因鸡PCR分析 | 第23-26页 |
| ·RIG-I转基因鸡Southern blot分析 | 第26-30页 |
| ·RIG-I转基因鸡RT-PCR分析 | 第30-31页 |
| ·RIG-I转基因鸡Western blot分析 | 第31-32页 |
| ·RIG-I转基因鸡整合位点分析与验证 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-41页 |
| ·pGV205-RIG-I重组慢病毒滴度的测定 | 第33-34页 |
| ·受精蛋胚盘注射及出雏率 | 第34页 |
| ·RIG-I转基因鸡PCR结果 | 第34-36页 |
| ·RIG-I转基因鸡Southern blot结果 | 第36页 |
| ·RIG-I转基因鸡RT-PCR结果 | 第36-37页 |
| ·RIG-I转基因鸡Western blot结果 | 第37-38页 |
| ·F0代RIG-I转基因鸡整合位点分析与验证 | 第38-41页 |
| ·讨论 | 第41-44页 |
| 第3章 RIG-I转基因鸡CEF细胞抑制流感病毒活性的研究 | 第44-56页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·实验动物、病毒株和细胞 | 第44页 |
| ·主要仪器、耗材 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| ·引物设计与合成 | 第44-45页 |
| ·RIG-I转基因鸡CEF细胞制备 | 第45-46页 |
| ·F1代鸡胚组织的分子生物学分析 | 第46页 |
| ·CEF细胞分组 | 第46页 |
| ·荧光定量PCR检测TG组CEF细胞中RIG-I基因mRNA含量 | 第46-47页 |
| ·Western blot分析TG组CEF细胞中RIG-I蛋白表达情况 | 第47页 |
| ·IFA分析F1代CEF细胞中禽流感病毒的复制 | 第47-48页 |
| ·TCID50测定禽流感病毒的病毒滴度 | 第48页 |
| ·荧光定量PCR检测RIG-I下游细胞因子和PB2基因mRNA含量 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-53页 |
| ·F1代鸡胚组织的分子生物学结果 | 第48-50页 |
| ·荧光定量PCR分析TG组CEF细胞中RIG-I基因mRNA含量 | 第50-51页 |
| ·Western blot分析TG组CEF细胞中RIG-I蛋白表达 | 第51页 |
| ·IFA分析F1代CEF细胞中禽流感病毒的复制 | 第51-52页 |
| ·TCID50测定禽流感病毒的病毒滴度 | 第52页 |
| ·荧光定量PCR检测鸡IFNβ 和PB2基因mRNA含量 | 第52-53页 |
| ·荧光定量PCR检测RIG-I下游细胞因子mRNA含量 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| 第4章 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
