| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 缩略语表 | 第13-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-39页 |
| ·军团菌 | 第15-19页 |
| ·军团菌病的散发、暴发和流行 | 第15-17页 |
| ·军团菌在环境中的污染情况 | 第17页 |
| ·公共场所、集中空调与军团菌 | 第17-18页 |
| ·军团菌与气溶胶 | 第18-19页 |
| ·小结 | 第19页 |
| ·军团菌的检测 | 第19-21页 |
| ·培养法 | 第19页 |
| ·PCR技术 | 第19-20页 |
| ·免疫学方法 | 第20-21页 |
| ·小结 | 第21页 |
| ·微生物活性方法概述 | 第21-29页 |
| ·DVC法 | 第21-22页 |
| ·基于RNA的PCR技术 | 第22-23页 |
| ·NASBA技术 | 第23-24页 |
| ·荧光原位杂交 | 第24页 |
| ·LIVE/DEAD BacLightTM Bacterial Viability Kit | 第24-25页 |
| ·CTC/INT | 第25-26页 |
| ·ChemChrome V6 | 第26-27页 |
| ·5(6)cFDA | 第27页 |
| ·MTT比色法 | 第27-28页 |
| ·ATP生物发光法 | 第28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| ·EMA和PMA国内外研究现况 | 第29-35页 |
| ·EMA/PMA作用原理 | 第29-32页 |
| ·EMA/PMA方法的应用 | 第32-33页 |
| ·EMA/PMA作用效果的影响因素 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| ·EMA/PMA-军团菌 | 第35-39页 |
| ·文献总结 | 第35-37页 |
| ·EMA/PMA的选择 | 第37页 |
| ·EMA溶剂的选择 | 第37-38页 |
| ·孵育温度的选择 | 第38页 |
| ·在环境样品中的应用 | 第38-39页 |
| 第二章 研究目的和技术路线 | 第39-40页 |
| ·研究目的 | 第39页 |
| ·技术路线 | 第39-40页 |
| 第三章 实验材料、试剂和仪器 | 第40-42页 |
| ·菌株 | 第40页 |
| ·耗材 | 第40页 |
| ·仪器 | 第40页 |
| ·普通PCR的引物 | 第40-41页 |
| ·荧光定量PCR的探针、引物和质粒标准品 | 第41-42页 |
| 第四章 实验方法 | 第42-47页 |
| ·菌液制备与基本实验流程 | 第42-44页 |
| ·细菌培养和菌液制备 | 第42页 |
| ·EMA工作液的制备 | 第42页 |
| ·EMA处理 | 第42-43页 |
| ·DNA提取 | 第43页 |
| ·普通PCR和电泳 | 第43页 |
| ·荧光定量PCR | 第43-44页 |
| ·EMA处理条件的优化 | 第44页 |
| ·EMA光照时间的优化 | 第44页 |
| ·EMA孵育时间的优化 | 第44页 |
| ·EMA浓度的优化 | 第44页 |
| ·杂菌的影响 | 第44-45页 |
| ·气溶胶模拟样品 | 第45-46页 |
| ·气溶胶吸收液的配制 | 第45页 |
| ·切割型浓缩器+Biosampler联合采样法 | 第45页 |
| ·气溶胶模拟样品的制备 | 第45-46页 |
| ·气溶胶模拟样品的处理 | 第46页 |
| ·EMA-qPCR方法的现场验证 | 第46-47页 |
| ·场所选择、现场采样点分布和气溶胶样品采集 | 第46页 |
| ·现场样品预处理 | 第46-47页 |
| 第五章 实验结果 | 第47-61页 |
| ·细菌的培养计数和荧光定量PCR的标准曲线 | 第47-50页 |
| ·细菌的培养计数结果 | 第47页 |
| ·标准曲线、灵敏度、特异度 | 第47-50页 |
| ·EMA处理条件的优化 | 第50-53页 |
| ·孵育时间的优化 | 第50-51页 |
| ·光照时间的优化 | 第51-52页 |
| ·EMA浓度的优化 | 第52-53页 |
| ·杂菌的影响 | 第53-56页 |
| ·气溶胶模拟样品 | 第56-57页 |
| ·公共场所气溶胶样品检测结果 | 第57-61页 |
| 第六章 结果讨论 | 第61-65页 |
| ·方法的选择 | 第61页 |
| ·EMA处理条件 | 第61-62页 |
| ·杂菌的影响 | 第62页 |
| ·气溶胶模拟样品的结果 | 第62-63页 |
| ·EMA-qPCR与其它活性检测方法的比较 | 第63页 |
| ·气溶胶样品采样方式 | 第63-64页 |
| ·气溶胶样品检测 | 第64-65页 |
| 第七章 结论与展望 | 第65-67页 |
| ·结论 | 第65页 |
| ·研究的局限性与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 附1 DNA提取操作规程 | 第77-79页 |
| 附2 公共场所环境现况调查表 | 第79-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 个人简历 | 第86-88页 |
| 研究生在读期间发表论文 | 第88-97页 |