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淡水白鲳细胞寒害致死机理初步研究

序言第1-6页
前言第6-12页
 研究背景第6-9页
 中英文摘要第9-12页
1 材料与方法第12-20页
 1.1 材料第12页
  1.1.1 细胞系第12页
  1.1.2 培养基和试剂第12页
  1.1.3 主要仪器和用具第12页
 1.2 方法第12-20页
  1.2.1 冻存细胞恢复与传代培养第12-13页
   1.2.1.1 主要试剂及配制第12-13页
   1.2.1.2 操作步骤第13页
  1.2.2 低温和镉离子(Cd~(2+))处理第13页
  1.2.3 台盼蓝染色检测细胞膜完整性第13-14页
  1.2.4 荧光染色观察细胞第14页
   1.2.4.1 吖啶橙(AO)第14页
   1.2.4.2 Hochest33258第14页
   1.2.4.3 AO与Hochest33258第14页
   1.2.4.4 PI与Hochest33258双染第14页
  1.2.5 扫描电镜切片第14-15页
   1.2.5.1 主要试剂配制第15页
   1.2.5.2 电镜制片操作步骤第15页
  1.2.6 流式细胞仪测定凋亡百分率第15页
  1.2.7 DNA琼脂糖电泳第15-16页
   1.2.7.1 DNA提取第15-16页
   1.2.7.2 DNA琼脂糖凝胶电泳第16页
  1.2.8 线粒体膜电位测定第16页
  1.2.9 细胞内游离钙离子测定第16-17页
  1.2.10 细胞内超氧阴离子(O_2~-)第17页
  1.2.11 细胞内SOD活性测定第17-20页
   1.2.11.1 淡水白鲳成体不同组织SOD活性第17-18页
   1.2.11.2 培养细胞SOD活性测定第18-20页
2 结果第20-34页
 2.1 相差显微镜观察细胞生长情况第20页
 2.2 台盼兰染色检测细胞活性第20-21页
 2.3 荧光染色观察低温下细胞及其核的变化第21-22页
 2.4 低温对细胞膜通透性的影响第22页
 2.5 低温对细胞超微结构的影响第22-24页
 2.6 低温对细胞死亡率的影响第24-26页
 2.7 低温对细胞凋亡DNA ladder形成的影响第26页
 2.8 低温对细胞线粒体膜电位的影响第26-27页
 2.9 低温对细胞游离钙离子浓度变化的影响第27-29页
 2.10 低温对CBT细胞内超氧阴离子(O_2~-)的影响第29-30页
 2.11 低温对鱼组织及细胞系SOD活性的影响第30-33页
  2.11.1 成体淡水白鲳不同组织SOD活性测定结果第30-31页
  2.11.2 培养细胞SOD活性测定结果第31-33页
 2.12 低温对淡水白鲳生活生长的影响第33-34页
3 分析与讨论第34-41页
 3.1 细胞凋亡与程序性死亡第34-35页
 3.2 细胞凋亡与线粒体膜电位第35-36页
 3.3 Ca2+在凋亡中的作用第36-37页
 3.4 超氧阴离子(O_2~-)与SOD活性在细胞凋亡中的作用第37-38页
 3.5 机体抗逆过程中SOD的作用第38-40页
 3.6 低温对淡水白鲳生活生长的影响第40-41页
参考文献第41-45页
附件第45-62页
 附1: 综述:鱼类细胞培养及其应用第45-54页
 附2: 已发表的论文:线粒体在细胞凋亡中的作用第54-62页
 附3: 学习期间发表的论文摘录第62页

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