序言 | 第1-6页 |
前言 | 第6-12页 |
研究背景 | 第6-9页 |
中英文摘要 | 第9-12页 |
1 材料与方法 | 第12-20页 |
1.1 材料 | 第12页 |
1.1.1 细胞系 | 第12页 |
1.1.2 培养基和试剂 | 第12页 |
1.1.3 主要仪器和用具 | 第12页 |
1.2 方法 | 第12-20页 |
1.2.1 冻存细胞恢复与传代培养 | 第12-13页 |
1.2.1.1 主要试剂及配制 | 第12-13页 |
1.2.1.2 操作步骤 | 第13页 |
1.2.2 低温和镉离子(Cd~(2+))处理 | 第13页 |
1.2.3 台盼蓝染色检测细胞膜完整性 | 第13-14页 |
1.2.4 荧光染色观察细胞 | 第14页 |
1.2.4.1 吖啶橙(AO) | 第14页 |
1.2.4.2 Hochest33258 | 第14页 |
1.2.4.3 AO与Hochest33258 | 第14页 |
1.2.4.4 PI与Hochest33258双染 | 第14页 |
1.2.5 扫描电镜切片 | 第14-15页 |
1.2.5.1 主要试剂配制 | 第15页 |
1.2.5.2 电镜制片操作步骤 | 第15页 |
1.2.6 流式细胞仪测定凋亡百分率 | 第15页 |
1.2.7 DNA琼脂糖电泳 | 第15-16页 |
1.2.7.1 DNA提取 | 第15-16页 |
1.2.7.2 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第16页 |
1.2.8 线粒体膜电位测定 | 第16页 |
1.2.9 细胞内游离钙离子测定 | 第16-17页 |
1.2.10 细胞内超氧阴离子(O_2~-) | 第17页 |
1.2.11 细胞内SOD活性测定 | 第17-20页 |
1.2.11.1 淡水白鲳成体不同组织SOD活性 | 第17-18页 |
1.2.11.2 培养细胞SOD活性测定 | 第18-20页 |
2 结果 | 第20-34页 |
2.1 相差显微镜观察细胞生长情况 | 第20页 |
2.2 台盼兰染色检测细胞活性 | 第20-21页 |
2.3 荧光染色观察低温下细胞及其核的变化 | 第21-22页 |
2.4 低温对细胞膜通透性的影响 | 第22页 |
2.5 低温对细胞超微结构的影响 | 第22-24页 |
2.6 低温对细胞死亡率的影响 | 第24-26页 |
2.7 低温对细胞凋亡DNA ladder形成的影响 | 第26页 |
2.8 低温对细胞线粒体膜电位的影响 | 第26-27页 |
2.9 低温对细胞游离钙离子浓度变化的影响 | 第27-29页 |
2.10 低温对CBT细胞内超氧阴离子(O_2~-)的影响 | 第29-30页 |
2.11 低温对鱼组织及细胞系SOD活性的影响 | 第30-33页 |
2.11.1 成体淡水白鲳不同组织SOD活性测定结果 | 第30-31页 |
2.11.2 培养细胞SOD活性测定结果 | 第31-33页 |
2.12 低温对淡水白鲳生活生长的影响 | 第33-34页 |
3 分析与讨论 | 第34-41页 |
3.1 细胞凋亡与程序性死亡 | 第34-35页 |
3.2 细胞凋亡与线粒体膜电位 | 第35-36页 |
3.3 Ca2+在凋亡中的作用 | 第36-37页 |
3.4 超氧阴离子(O_2~-)与SOD活性在细胞凋亡中的作用 | 第37-38页 |
3.5 机体抗逆过程中SOD的作用 | 第38-40页 |
3.6 低温对淡水白鲳生活生长的影响 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
附件 | 第45-62页 |
附1: 综述:鱼类细胞培养及其应用 | 第45-54页 |
附2: 已发表的论文:线粒体在细胞凋亡中的作用 | 第54-62页 |
附3: 学习期间发表的论文摘录 | 第62页 |