摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
英文缩略表 | 第12-14页 |
第一章 引言 | 第14-21页 |
·研究目的与意义 | 第14页 |
·Fosmid文库 | 第14-17页 |
·Fosmid克隆载体 | 第15-16页 |
·Fosmid文库的应用现状 | 第16-17页 |
·Fosmid文库前景 | 第17页 |
·WRKY转录因子 | 第17-21页 |
·WRKY蛋白的分类和结构特点 | 第18页 |
·WRKY转录因子在植物非生物胁迫应答中的功能 | 第18-21页 |
第二章 Ipomoea trifida Fosmid基因组文库的构建及质量评价 | 第21-32页 |
·材料与方法 | 第21-27页 |
·实验材料 | 第21页 |
·实验主要仪器、设备、试剂 | 第21-22页 |
·Ipomoea trifida基因组大小的测定 | 第22页 |
·Ipomoea trifida基因组DNA的提取 | 第22-23页 |
·基因组DNA的剪切与回收 | 第23-24页 |
·连接Fosmid载体,包装成噬菌体 | 第24-25页 |
·转染大肠杆菌、保存单克隆 | 第25-26页 |
·文库插入片段大小及插入率的鉴定 | 第26页 |
·文库覆盖度及基因包含率的计算 | 第26-27页 |
·结果与分析 | 第27-30页 |
·Ipomoea trifida基因组大小的测定 | 第27-28页 |
·Ipomoea trifida基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
·基因组DNA的剪切与回收 | 第29页 |
·文库单克隆的保存 | 第29-30页 |
·文库插入片段大小及插入率的鉴定 | 第30页 |
·文库覆盖度及基因包含率的计算 | 第30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
第三章 文库PCR筛选体系的建立、检验及WRKY基因的分离 | 第32-51页 |
·材料与方法 | 第32-42页 |
·实验材料 | 第32页 |
·实验器材、设备 | 第32页 |
·实验用试剂及培养基、溶液等配方 | 第32-34页 |
·文库PCR筛选体系的建立 | 第34-35页 |
·筛选体系质量检测 | 第35-36页 |
·WRKY全长序列的查找 | 第36-37页 |
·组织总RNA的提取及cDNA获得 | 第37页 |
·WRKY全长基因cDNA序列的获得 | 第37-39页 |
·WRKY基因克隆载体的构建 | 第39页 |
·WRKY植物表达载体的构建 | 第39-40页 |
·农杆菌侵染法转化烟草 | 第40-41页 |
·转基因烟草鉴定及过表达植株的抗旱性鉴定 | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-50页 |
·文库PCR筛选体系的建立 | 第42-43页 |
·筛选体系质量检测 | 第43-44页 |
·WRKY基因全长cDNA序列查找 | 第44页 |
·WRKY全长基因cDNA序列的获得 | 第44-45页 |
·WRKY基因克隆载体构建 | 第45-46页 |
·WRKY植物表达载体的构建 | 第46-47页 |
·农杆菌侵染法转化烟草 | 第47-48页 |
·转基因烟草的鉴定及过表达植株抗旱性鉴定 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
第四章 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61页 |