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甘薯近缘种Ipomoea trifida(Kunth)G.Don基因组Fosmid文库构建及WRKY基因分离

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
英文缩略表第12-14页
第一章 引言第14-21页
   ·研究目的与意义第14页
   ·Fosmid文库第14-17页
     ·Fosmid克隆载体第15-16页
     ·Fosmid文库的应用现状第16-17页
     ·Fosmid文库前景第17页
   ·WRKY转录因子第17-21页
     ·WRKY蛋白的分类和结构特点第18页
     ·WRKY转录因子在植物非生物胁迫应答中的功能第18-21页
第二章 Ipomoea trifida Fosmid基因组文库的构建及质量评价第21-32页
   ·材料与方法第21-27页
     ·实验材料第21页
     ·实验主要仪器、设备、试剂第21-22页
     ·Ipomoea trifida基因组大小的测定第22页
     ·Ipomoea trifida基因组DNA的提取第22-23页
     ·基因组DNA的剪切与回收第23-24页
     ·连接Fosmid载体,包装成噬菌体第24-25页
     ·转染大肠杆菌、保存单克隆第25-26页
     ·文库插入片段大小及插入率的鉴定第26页
     ·文库覆盖度及基因包含率的计算第26-27页
   ·结果与分析第27-30页
     ·Ipomoea trifida基因组大小的测定第27-28页
     ·Ipomoea trifida基因组DNA的提取第28-29页
     ·基因组DNA的剪切与回收第29页
     ·文库单克隆的保存第29-30页
     ·文库插入片段大小及插入率的鉴定第30页
     ·文库覆盖度及基因包含率的计算第30页
   ·讨论第30-32页
第三章 文库PCR筛选体系的建立、检验及WRKY基因的分离第32-51页
   ·材料与方法第32-42页
     ·实验材料第32页
     ·实验器材、设备第32页
     ·实验用试剂及培养基、溶液等配方第32-34页
     ·文库PCR筛选体系的建立第34-35页
     ·筛选体系质量检测第35-36页
     ·WRKY全长序列的查找第36-37页
     ·组织总RNA的提取及cDNA获得第37页
     ·WRKY全长基因cDNA序列的获得第37-39页
     ·WRKY基因克隆载体的构建第39页
     ·WRKY植物表达载体的构建第39-40页
     ·农杆菌侵染法转化烟草第40-41页
     ·转基因烟草鉴定及过表达植株的抗旱性鉴定第41-42页
   ·结果与分析第42-50页
     ·文库PCR筛选体系的建立第42-43页
     ·筛选体系质量检测第43-44页
     ·WRKY基因全长cDNA序列查找第44页
     ·WRKY全长基因cDNA序列的获得第44-45页
     ·WRKY基因克隆载体构建第45-46页
     ·WRKY植物表达载体的构建第46-47页
     ·农杆菌侵染法转化烟草第47-48页
     ·转基因烟草的鉴定及过表达植株抗旱性鉴定第48-50页
   ·讨论第50-51页
第四章 结论第51-52页
参考文献第52-60页
致谢第60-61页
作者简历第61页

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