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鸭细胞因子克隆表达及ELISA检测方法的建立

目录第1-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-11页
第一章 文献综述第11-21页
 1 禽类细胞因子的研究进展第11-17页
   ·细胞因子概述第11页
   ·禽类细胞因子基因的克隆第11-12页
   ·细胞因子的分类第12-17页
 2 细胞因子检测第17-21页
   ·生物学检测方法第17页
   ·免疫学检测方法第17-18页
   ·分子生物学检测方法第18-21页
第二章 鸭IFN-γ、IL-2、TNF-α克隆、表达及蛋白纯化第21-39页
 摘要第21-22页
 1 材料与方法第22-28页
   ·材料第22-24页
   ·方法第24-28页
 2 结果第28-36页
   ·细胞因子的克隆第28-29页
   ·细胞因子基因的序列分析第29-32页
   ·重组原核表达质粒的构建第32-33页
   ·重组菌的诱导表达产物鉴定与纯化第33-35页
   ·鸭TNF-α基因全长序列测定结果第35-36页
 3 讨论第36-38页
 ABSTRACT第38-39页
第三章 鸭IFN-γ、IL-2、TNF-α的抗体制备第39-55页
 摘要第39页
 1 材料与方法第39-45页
   ·材料第40-41页
   ·方法第41-45页
 2 结果第45-51页
   ·间接ELISA方法的建立第46-47页
   ·阳性杂交瘤细胞株的建立第47页
   ·阳性杂交瘤细胞株的稳定检测第47-48页
   ·小鼠腹水单抗效价的测定第48页
   ·单克隆抗体的Western blot分析第48-50页
   ·单抗特异性鉴定结果第50页
   ·单抗亚型鉴定结果第50-51页
   ·多克隆抗体效价的测定第51页
   ·多克隆抗体的鉴定第51页
 3 讨论第51-53页
 ABSTRACT第53-55页
第四章 鸭IFN-γ抗原捕获ELISA检测方法的建立第55-63页
 摘要第55页
 1 材料与方法第55-57页
   ·试验材料第55-57页
 2 结果第57-60页
   ·抗体的纯化第57页
   ·最佳抗体包被浓度的确定第57-58页
   ·最佳单克隆抗体包被时间的确定第58页
   ·最佳封闭液的确定第58-59页
   ·最佳封闭时间的确定第59页
   ·最佳显色时间的确定第59页
   ·最低检出限的确定第59-60页
 3 讨论第60-61页
 ABSTRACT第61-63页
参考文献第63-73页
全文总结第73-75页
致谢第75页

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