| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| 第一节 SWI/SNF染色质重塑复合物的组成及其生物学活性 | 第11-16页 |
| 1. 表观遗传及其调控 | 第11页 |
| 2. ATP依赖的染色质重塑复合物 | 第11-12页 |
| 3. SWI/SNF染色质重塑复合物 | 第12-14页 |
| 4. SWI/SNF染色质重塑复合物的生物学功能 | 第14-16页 |
| 第二节 SWI/SNF复合物与人、鼠胚胎干细胞及鼠顶胚层干细胞 | 第16-21页 |
| 1. SWI/SNF复合物与鼠胚胎干细胞 | 第16-18页 |
| 2. SWI/SNF复合物与人胚胎干细胞 | 第18-19页 |
| 3. SWI/SNF复合物与鼠顶胚层干细胞 | 第19页 |
| 4. 人、鼠胚胎干细胞及鼠顶胚层干细胞的特征及异同 | 第19-21页 |
| 第三节 BRG1-SWI/SNF复合物中核心组分的功能及作用机制的研究 | 第21-28页 |
| 1. BRG1-SWI/SNF染色质重塑复合物核心组分的功能 | 第21-22页 |
| 2. BRG1-SWI/SNF的表观调控作用机制的研究 | 第22-26页 |
| 3. BRG1-SWI/SNF在胚胎干细胞中作用调节机制的研究 | 第26-28页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第28-55页 |
| 第一节 实验材料 | 第28-32页 |
| 1. 菌株 | 第28页 |
| 2. 细胞系 | 第28页 |
| 3. 质粒 | 第28-29页 |
| 4. 抗体 | 第29-30页 |
| 5. 主要试剂及试剂盒 | 第30-31页 |
| 6. 主要耗材及仪器 | 第31-32页 |
| 第二节 实验方法 | 第32-55页 |
| 1. 质粒转化 | 第32页 |
| 2. 质粒小量提取 | 第32页 |
| 3. 质粒大量提取 | 第32-33页 |
| 4. 主要细胞其细胞培养液的配制 | 第33-35页 |
| 5. 29 3 T细胞及Hela细胞的培养 | 第35页 |
| 6. 人的胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)的复苏及培养 | 第35-37页 |
| 7. 人的胚胎干细胞的传代培养方法 | 第37-38页 |
| 8. 人胚胎干细胞稳定细胞系的建立 | 第38-39页 |
| 9 小鼠胚胎干细胞(mESCs)的培养传代 | 第39页 |
| 10. 小鼠外胚层干细胞(mEpiSCs)的培养 | 第39-41页 |
| 11. RNA的抽提 | 第41页 |
| 12. RNA的反转录 | 第41-42页 |
| 13. Q-RT-PCR(实时定量PCR) | 第42-43页 |
| 14. 碱性磷酸酶染色(Alkaline Phosphatase Staining,AP Staining) | 第43-44页 |
| 15. 组蛋白抽提 | 第44页 |
| 16. 蛋白质免疫印迹(Western B1otting) | 第44-48页 |
| 17. 染色质免疫共沉淀实验(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) | 第48-54页 |
| 18. H3K27ac-ChIP-seq | 第54-55页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第55-76页 |
| 第一部分 BRG1-SWI/SNF在mEpiSCs中的功能研究 | 第55-62页 |
| 1. 鼠顶胚层干细胞(mEpiSCs)的培养与鉴定 | 第55-56页 |
| 2. SWI/SNF主要核心组分在mEpiSCs中具有重要的功能 | 第56-59页 |
| 3. BRG1-SWI/SNF复合物中催化亚基BRG1敲低后对mEpiSCs的基因表达谱有影响 | 第59-62页 |
| 第二部分 BRGl-SWI/SNF在hESCs中的功能及分子机制的研究 | 第62-76页 |
| 1. BAF53a在hESCs中具有重要功能 | 第62-64页 |
| 2. BRG1在hESCs中的前期研究 | 第64-66页 |
| 3. BRG1长时沉默会引起基因组水平上H3K27ac修饰的普遍上升 | 第66-71页 |
| 4. BRG1特异性结合在H3K27ac修饰上升的区域 | 第71-72页 |
| 5. BRG1的缺陷不影响其结合基因在H3K27me3修饰的水平 | 第72-73页 |
| 6. 发育相关基因的表达上升主要与依赖于BRG1的H3K27ac修饰调节有关 | 第73-76页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第76-79页 |
| 附录 | 第79-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
