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感病草鱼脾脏的比较转录组分析

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 文献综述第11-22页
 1 草鱼出血病的症状与病原第11-12页
   ·症状与感染第11页
   ·病原第11-12页
   ·草鱼出血病病毒株系第12页
 2 草鱼免疫相关因子第12-18页
   ·免疫球蛋白第12-13页
   ·主要组织相容性复合体及相关蛋白第13页
   ·干扰素及相关因子第13-14页
   ·肿瘤坏死及抑制相关因子第14-15页
   ·补体因子第15-16页
   ·凝集素第16-17页
   ·其他免疫相关因子第17-18页
 3 鱼类凝血因子第18-20页
 4 转录组与鱼类抗病育种第20-21页
 5 论文研究目的与意义第21-22页
第二章 感染草鱼出血病毒前后草鱼脾脏转录组分析第22-44页
 1 材料和方法第22-26页
   ·材料第22页
     ·健康草鱼种第22页
     ·草鱼出血病毒第22页
   ·方法第22-26页
     ·人工攻毒第22-23页
     ·取样第23页
     ·样品RNA提取第23页
     ·cDNA文库的制备和测序第23-24页
     ·测序数据分析第24-25页
     ·测序评估第25页
     ·基因表达注释第25页
     ·基因差异表达分析第25-26页
 2 结果分析第26-39页
   ·RNA提取与质量检测第26-27页
   ·产量统计第27-28页
   ·组装结果统计第28-29页
   ·All-unigene的功能注释第29-31页
     ·All-unigene的COG分类第30页
     ·All-unigene GO分类第30-31页
     ·All-unigene的代谢通路分析第31页
   ·编码蛋白框预测第31-32页
   ·表达差异uingene分析第32-39页
     ·差异表达基因筛选第32页
     ·差异表达基因GO分类第32-34页
     ·差异表达基因的通路富集分析第34-38页
     ·与草鱼出血病毒紧密关联的差异uingene第38-39页
 3 讨论第39-42页
   ·草鱼脾脏转录组数据库的库容第39-40页
   ·草鱼体内应激草鱼出血病毒的免疫通路第40-41页
   ·草鱼机体免疫草鱼出血病毒的因子第41-42页
 4 小结第42-44页
第三章 免疫草鱼出血病信号因子筛选与周期表达第44-56页
 1 材料和方法第44-46页
   ·材料第44页
   ·方法第44-46页
     ·人工攻毒第44页
     ·取样第44页
     ·样品RNA提取及cDNA模板的合成第44-45页
     ·荧光定量PCR引物设计第45页
     ·待测样品荧光定量PCR第45-46页
     ·计算基因的相对定量表达第46页
 2 结果分析第46-53页
   ·差异表达基因质量第47页
   ·差异表达基因的组织表达第47-53页
 3 讨论第53-55页
   ·草鱼补体旁路途径是机体防御出血病毒的特异性途径第53-54页
   ·趋化因子等细胞因子的协同作用使草鱼机体的补体旁路途径与凝血途径产生免疫级联反应对草鱼出血病进行防御第54-55页
 4 小结第55-56页
第四章 草鱼凝血因子FⅧ和补体C5-1CDNA克隆分析第56-72页
 1 材料和方法第57-61页
   ·材料第57页
   ·方法第57-61页
     ·人工攻毒第57页
     ·取样第57页
     ·样品RNA提取第57页
     ·cDNA的合成第57-58页
     ·引物设计第58页
     ·草鱼F7基因cDNA片段的扩增第58-59页
     ·PCR产物的回收与纯化第59-60页
     ·制备感受态细胞第60页
     ·目的片段连接和转化第60-61页
     ·序列分析第61页
     ·系统发育树的构建第61页
 2 结果分析第61-70页
   ·FⅦ因cDNA序列及分析第61-66页
     ·FⅦ3’-Race和5'-Race PCR扩增结果第61-63页
     ·FⅦ氨基酸序列分析第63页
     ·FⅦ推导氨基酸及保守序列的三级结构第63-64页
     ·FⅦ氨基酸序列同源性分析第64-65页
     ·FⅦ基因系统进化树构建第65-66页
   ·C5-1基因cDNA序列及分析第66-70页
     ·C5-1基因部分序列及推导氨基酸分析第66-68页
     ·C5-1基因部分序列氨基酸序列同源性分析和系统进化树构建第68-70页
 3 讨论第70-71页
 4 小结第71-72页
结论、创新点及研究展望第72-74页
参考文献第74-86页
致谢第86-87页
作者简介第87-88页

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