| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 英文縮略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-42页 |
| ·免疫球蛋白的分子结构 | 第12-14页 |
| ·免疫球蛋白种类 | 第12-13页 |
| ·免疫球蛋白的基本结构 | 第13-14页 |
| ·免疫球蛋白的基因结构 | 第14页 |
| ·免疫球蛋白多样性的产生机制 | 第14-31页 |
| ·免疫球蛋白可变区多样性产生机制 | 第15-23页 |
| ·免疫球蛋白的恒定区的转换 | 第23-27页 |
| ·激活诱导胞嘧啶脱氨酶 | 第27-31页 |
| ·免疫球蛋白基因及其表达机制的进化 | 第31-39页 |
| ·免疫球蛋白重链基因的进化 | 第33-37页 |
| ·免疫球蛋白表达机制的进化 | 第37-39页 |
| ·硬骨鱼类的免疫系统 | 第39-40页 |
| ·硬骨鱼类免疫球蛋白的种类 | 第39-40页 |
| ·硬骨鱼类免疫球蛋白重链基因结构 | 第40页 |
| ·硬骨鱼类免疫球蛋白的表达机制 | 第40页 |
| ·斑马鱼模型 | 第40-41页 |
| ·斑马鱼 | 第40-41页 |
| ·斑马鱼在免疫系统研究中的应用 | 第41页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第41-42页 |
| 第二章 材料与方法 | 第42-53页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·实验样本 | 第43页 |
| ·质粒和菌株 | 第43页 |
| ·分子生物学实验试剂及试剂盒 | 第43页 |
| ·主要试剂配制 | 第43-44页 |
| ·实验仪器 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-52页 |
| ·TALEN构建 | 第44页 |
| ·mRNA体外转录 | 第44-45页 |
| ·斑马鱼卵的收集 | 第45页 |
| ·显微注射 | 第45页 |
| ·DNA提取 | 第45-46页 |
| ·RNA提取 | 第46页 |
| ·反转录方法 | 第46页 |
| ·常用PCR体系和条件 | 第46-47页 |
| ·T-A克隆 | 第47页 |
| ·定量RT-PCR实验方法 | 第47-48页 |
| ·斑马鱼血液涂片制作及白细胞计数 | 第48页 |
| ·斑马鱼的免疫 | 第48页 |
| ·斑马鱼血清制备 | 第48-49页 |
| ·斑马鱼血清总蛋白含量测定 | 第49页 |
| ·ELISA法检测斑马鱼卵中特异抗体滴度 | 第49-50页 |
| ·嗜水气单胞杆菌培养和收集 | 第50页 |
| ·嗜水气单胞杆菌OD-CFU曲线测定 | 第50页 |
| ·嗜水气单胞杆菌浸染斑马鱼 | 第50页 |
| ·5’RACE实验方法 | 第50-51页 |
| ·鳗弧菌的培养和收集 | 第51-52页 |
| ·鳗弧菌免疫和攻毒 | 第52页 |
| ·主要数据库及分析软件 | 第52-53页 |
| 第三章 结果与分析 | 第53-106页 |
| ·突变斑马鱼的Aicda基因 | 第53-59页 |
| ·验证斑马鱼Aicda基因组序列信息 | 第53-54页 |
| ·利用锌指酶技术突变斑马鱼的Aicda基因 | 第54-57页 |
| ·利用TALEN技术突变斑马鱼的Aicda基因 | 第57-59页 |
| ·Aicda基因突变斑马鱼品系的建立 | 第59-70页 |
| ·筛选Aicda基因突变的嵌合体F_0代斑马鱼 | 第59页 |
| ·筛选Aicda基因突变的杂合体F_1代斑马鱼 | 第59-61页 |
| ·筛选和鉴定Aicda基因突变的纯合体F_2代斑马鱼 | 第61-70页 |
| ·斑马鱼主要免疫球蛋白的表达 | 第70-76页 |
| ·μ基因在斑马鱼的不同器官中的表达 | 第70-71页 |
| ·ζ基因在斑马鱼的不同器官中的表达分析 | 第71-73页 |
| ·斑马鱼不同发育时期Aicda基因的表达 | 第73-74页 |
| ·斑马鱼不同发育时期μ基因的表达 | 第74-75页 |
| ·斑马鱼不同发育时期ζ基因的表达 | 第75-76页 |
| ·基因组水平检测J_H下游内含子区域的体细胞超突变的发生 | 第76-81页 |
| ·高保真酶的选择 | 第76-77页 |
| ·J_H内含子扩增引物设计 | 第77-78页 |
| ·体细胞超突变分析 | 第78-80页 |
| ·J_H内含子上游CDR3区域的N-P核苷酸分析 | 第80-81页 |
| ·TNP-BSA免疫后斑马鱼的免疫球蛋白可变区分析 | 第81-87页 |
| ·TNP-BSA免疫斑马鱼 | 第81页 |
| ·构建斑马鱼IgM的可变区cDNA文库 | 第81-82页 |
| ·CDR3统计分析 | 第82-84页 |
| ·V_H基因家族使用情况分析 | 第84-85页 |
| ·JH基因片段使用情况分析 | 第85-87页 |
| ·ELISA检测TNP-BSA免疫后血清中特异抗体滴度 | 第87-88页 |
| ·TNP-BSA免疫斑马鱼、获取斑马鱼血清以及血清总蛋白浓度测定 | 第87页 |
| ·ELISA检测斑马鱼中特异抗体的含量 | 第87-88页 |
| ·ELISA检测斑马鱼血清中的IgM和IgZ含量 | 第88-90页 |
| ·斑马鱼血清的获取和浓度测定 | 第88-89页 |
| ·ELISA检测斑马鱼血清中IgM和IgZ的含量 | 第89-90页 |
| ·斑马鱼主要组织器官观察 | 第90-92页 |
| ·嗜水气单胞杆菌浸染斑马鱼 | 第92-96页 |
| ·嗜水气单胞杆菌OD-CFU曲线 | 第92页 |
| ·嗜水气单胞杆菌攻毒实验 | 第92-93页 |
| ·死亡斑马鱼体征 | 第93页 |
| ·死亡斑马鱼内脏团检测 | 第93-94页 |
| ·死亡斑马鱼内脏团嗜水气单胞杆菌的分离 | 第94-95页 |
| ·存活斑马鱼基因组中嗜水气单胞杆菌含量 | 第95-96页 |
| ·鳗弧菌侵染斑马鱼 | 第96-99页 |
| ·制弱鳗弧菌疫苗免疫斑马鱼 | 第96页 |
| ·致病株鳗弧菌侵染未免疫的斑马鱼 | 第96-97页 |
| ·致病株鳗弧菌侵染免疫后的斑马鱼 | 第97-98页 |
| ·ELISA检测免疫后斑马鱼血清中鳗弧菌特异抗体的滴度 | 第98-99页 |
| ·斑马鱼IgM和IgZ类别转换重组研究 | 第99-101页 |
| ·设计类别转换重组检测引物 | 第99-100页 |
| ·巢式PCR扩增J_ζ-C_μ1拼接产物 | 第100-101页 |
| ·讨论与展望 | 第101-106页 |
| 第四章 结论 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-120页 |
| 附录 | 第120-134页 |
| 致谢 | 第134-136页 |
| 个人简历 | 第136页 |
