| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| 第一节 微卫星分子标记 | 第14-21页 |
| 1.微卫星 DNA 的构成及分类 | 第14-15页 |
| 2.微卫星 DNA 的特点及分布 | 第15-16页 |
| 3.筛选微卫星 DNA 序列的方法 | 第16-17页 |
| ·搜索公共数据库法 | 第16页 |
| ·查找已发表引物法 | 第16页 |
| ·近缘物种引物借鉴法 | 第16-17页 |
| ·构建基因组文库法 | 第17页 |
| 4. 在鱼类遗传图谱构建上的应用 | 第17-19页 |
| ·微卫星标记的构图原理 | 第18页 |
| ·微卫星标记在构图上的具体应用 | 第18-19页 |
| 5. 在鱼类中的其他应用 | 第19-21页 |
| ·鱼类遗传多样性分析 | 第19-20页 |
| ·QTL 定位 | 第20-21页 |
| ·鱼类种质资源保护 | 第21页 |
| 第二节 大菱鲆研究现状 | 第21-26页 |
| 1. 大菱鲆生物学特性 | 第21-22页 |
| 2. 我国大菱鲆的养殖现状 | 第22-23页 |
| ·养殖基本状况 | 第22-23页 |
| ·养殖上存在的问题 | 第23页 |
| 3. 大菱鲆遗传育种研究 | 第23-26页 |
| ·国外遗传育种研究 | 第23-25页 |
| ·大菱鲆国内研究现状 | 第25-26页 |
| 第三节 研究课题的目的及意义 | 第26-28页 |
| 第二章 大菱鲆微卫星序列的筛选 | 第28-44页 |
| 1. 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.实验方法 | 第29-33页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第29页 |
| ·小片段文库的制备 | 第29-30页 |
| ·磁珠富集微卫星序列 | 第30-31页 |
| ·PCR 扩增、切胶纯化 | 第31页 |
| ·扩增片断的克隆 | 第31-32页 |
| ·阳性克隆的二次筛选 | 第32-33页 |
| 3. 大菱鲆微卫星 DNA 序列筛选情况 | 第33-37页 |
| ·大菱鲆基因组 DNA 提取 | 第33-34页 |
| ·基因组 DNA 的酶切、连接 | 第34页 |
| ·连接产物的扩增、浓缩 | 第34页 |
| ·大菱鲆微卫星 DNA 序列的磁珠捕获、扩增富集及回收纯化 | 第34-35页 |
| ·DNA 片段与载体的连接和转化 | 第35-36页 |
| ·含有微卫星 DNA 序列阳性克隆的 PCR 筛选 | 第36页 |
| ·微卫星 DNA 序列统计与分析 | 第36-37页 |
| 4. 所筛微卫星的特征分析 | 第37-41页 |
| 5. 讨论 | 第41-44页 |
| ·酶切片段与微卫星引物设计 | 第41-42页 |
| ·探针选择与微卫星重复单元 | 第42-44页 |
| 第三章 大菱鲆微卫星标记的筛选 | 第44-62页 |
| 1. 试剂和仪器 | 第44页 |
| 2. 微卫星引物开发 | 第44-46页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·微卫星引物的设计 | 第45页 |
| ·引物 PCR 扩增条件优化 | 第45-46页 |
| 3. 微卫星标记的初筛 | 第46-48页 |
| ·PCR 扩增 | 第46页 |
| ·扩增产物初步检测 | 第46-47页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第47-48页 |
| ·数据统计 | 第48页 |
| 4. F1 代中微卫星标记分离情况 | 第48-49页 |
| ·分析群体 | 第48页 |
| ·引物来源 | 第48页 |
| ·DNA 提取、PCR 反应和 PAGE 电泳 | 第48页 |
| ·微卫星条带统计 | 第48-49页 |
| ·微卫星标记遗传模式分析 | 第49页 |
| 5. 试验结果 | 第49-60页 |
| ·微卫星引物设计情况 | 第49-51页 |
| ·微卫星标记初筛情况 | 第51-54页 |
| ·微卫星标记在 F1 代中的分离结果 | 第54-60页 |
| 6. 讨论 | 第60-62页 |
| ·关于引物设计的讨论 | 第60-61页 |
| ·关于微卫星标记分离模式的讨论 | 第61-62页 |
| 小结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-76页 |
| 附录 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |