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不成熟DC外泌体抗原特异性治疗实验性自身免疫性重症肌无力的实验研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-14页
前言第14-18页
第一部分 小鼠抗原特异性不成熟DC外泌体的获得及其特性第18-45页
 1 实验材料第18-20页
   ·试验动物第18页
   ·主要试剂第18-19页
   ·主要仪器与设备第19-20页
 2 实验方法第20-27页
   ·髓源树突状细胞的培养第20-21页
   ·MiniMACS免疫磁性分离系统纯化树突状细胞第21-22页
   ·流式细胞学检测DC纯度第22页
   ·流式细胞学检测DC负载抗原后的表型变化第22页
   ·microRNA-146a转染,和microRNA realtime PCR检测第22-25页
   ·microRNA-146a mimics转染前后DC成熟度检测第25-26页
   ·不成熟DC来源外泌体的提取制备第26页
   ·外泌体的电镜检测第26-27页
   ·外泌体的流式检测第27页
   ·分析及统计方法第27页
 3 结果第27-37页
   ·DC的培养及分选纯化第27-29页
   ·负载Tα146-162肽段对DC表型及细胞因子分泌的影响第29-32页
   ·microRNA146a mimcs转染树突状细胞量效观察第32页
   ·转染microRNA-146a mimics后,DC的表型及其分泌细胞因子水平分析第32-35页
   ·imDC的培养,imDex提取第35-36页
   ·imDex和mDex表型比较第36-37页
 4 讨论第37-44页
   ·DC成熟分化与抗原刺激第37-38页
   ·DC的激活及耐受第38-39页
   ·DC成熟分化与microRNA第39-42页
   ·DC与外泌体第42-44页
 5 结论第44-45页
第二部分 抗原特异性不成熟DC来源外泌体对实验性自身免疫性重症肌无力的治疗作用及免疫调节机制第45-74页
 1 实验材料第45-48页
   ·试验动物第45页
   ·主要试剂第45-47页
   ·主要仪器与设备第47-48页
 2 实验方法第48-57页
   ·抗原特异性imDC和mDC来源外泌体的提取制备第48页
   ·T-AchR的提取制备第48-50页
   ·CD4~+T细胞的制备第50-51页
   ·小鼠髓源DC的制备第51页
   ·外泌体对CD4~+T细胞和DC共培养系统中T细胞的影响第51-52页
   ·EAMG模型制备第52页
   ·实验分组第52-53页
   ·血清抗AchR IgG及其亚型抗体的测定第53页
   ·血清细胞因子的测定第53-54页
   ·AChR特异性淋巴细胞增殖反应和细胞因子反应检测第54页
   ·Western-blot检测Th17,Th1,Th2,Treg细胞亚群特异性转录因子第54-57页
 3 结果第57-68页
   ·检测Tα_(146-162)-imDex抑制T-AchR特异性T细胞增殖的能力第57-60页
   ·EAMG小鼠模型的建立第60-61页
   ·不同剂量抗原特异性imDex治疗EAMG的效果第61页
   ·EAMG小鼠治疗前后抗AchR IgG及其亚型的变化第61-63页
   ·imDex对EAMG小鼠血清细胞因子的影响第63-64页
   ·imDex对EAMG小鼠脾脏T淋巴细胞亚群的影响第64-66页
   ·Tα_(146-162)-imDex对EAMG小鼠脾脏T淋巴增殖的影响是呈抗原特异性的第66-68页
 4 讨论第68-74页
   ·外泌体与T淋巴细胞第68-69页
   ·T淋巴细胞与重症肌无力第69-72页
   ·外泌体与自身免疫性疾病的治疗第72-74页
参考文献第74-90页
综述一第90-108页
 参考文献第102-108页
综述二第108-116页
 参考文献第114-116页
攻读学位期间主要的研究成果第116页

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