中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
前言 | 第14-18页 |
第一部分 小鼠抗原特异性不成熟DC外泌体的获得及其特性 | 第18-45页 |
1 实验材料 | 第18-20页 |
·试验动物 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·主要仪器与设备 | 第19-20页 |
2 实验方法 | 第20-27页 |
·髓源树突状细胞的培养 | 第20-21页 |
·MiniMACS免疫磁性分离系统纯化树突状细胞 | 第21-22页 |
·流式细胞学检测DC纯度 | 第22页 |
·流式细胞学检测DC负载抗原后的表型变化 | 第22页 |
·microRNA-146a转染,和microRNA realtime PCR检测 | 第22-25页 |
·microRNA-146a mimics转染前后DC成熟度检测 | 第25-26页 |
·不成熟DC来源外泌体的提取制备 | 第26页 |
·外泌体的电镜检测 | 第26-27页 |
·外泌体的流式检测 | 第27页 |
·分析及统计方法 | 第27页 |
3 结果 | 第27-37页 |
·DC的培养及分选纯化 | 第27-29页 |
·负载Tα146-162肽段对DC表型及细胞因子分泌的影响 | 第29-32页 |
·microRNA146a mimcs转染树突状细胞量效观察 | 第32页 |
·转染microRNA-146a mimics后,DC的表型及其分泌细胞因子水平分析 | 第32-35页 |
·imDC的培养,imDex提取 | 第35-36页 |
·imDex和mDex表型比较 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-44页 |
·DC成熟分化与抗原刺激 | 第37-38页 |
·DC的激活及耐受 | 第38-39页 |
·DC成熟分化与microRNA | 第39-42页 |
·DC与外泌体 | 第42-44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
第二部分 抗原特异性不成熟DC来源外泌体对实验性自身免疫性重症肌无力的治疗作用及免疫调节机制 | 第45-74页 |
1 实验材料 | 第45-48页 |
·试验动物 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45-47页 |
·主要仪器与设备 | 第47-48页 |
2 实验方法 | 第48-57页 |
·抗原特异性imDC和mDC来源外泌体的提取制备 | 第48页 |
·T-AchR的提取制备 | 第48-50页 |
·CD4~+T细胞的制备 | 第50-51页 |
·小鼠髓源DC的制备 | 第51页 |
·外泌体对CD4~+T细胞和DC共培养系统中T细胞的影响 | 第51-52页 |
·EAMG模型制备 | 第52页 |
·实验分组 | 第52-53页 |
·血清抗AchR IgG及其亚型抗体的测定 | 第53页 |
·血清细胞因子的测定 | 第53-54页 |
·AChR特异性淋巴细胞增殖反应和细胞因子反应检测 | 第54页 |
·Western-blot检测Th17,Th1,Th2,Treg细胞亚群特异性转录因子 | 第54-57页 |
3 结果 | 第57-68页 |
·检测Tα_(146-162)-imDex抑制T-AchR特异性T细胞增殖的能力 | 第57-60页 |
·EAMG小鼠模型的建立 | 第60-61页 |
·不同剂量抗原特异性imDex治疗EAMG的效果 | 第61页 |
·EAMG小鼠治疗前后抗AchR IgG及其亚型的变化 | 第61-63页 |
·imDex对EAMG小鼠血清细胞因子的影响 | 第63-64页 |
·imDex对EAMG小鼠脾脏T淋巴细胞亚群的影响 | 第64-66页 |
·Tα_(146-162)-imDex对EAMG小鼠脾脏T淋巴增殖的影响是呈抗原特异性的 | 第66-68页 |
4 讨论 | 第68-74页 |
·外泌体与T淋巴细胞 | 第68-69页 |
·T淋巴细胞与重症肌无力 | 第69-72页 |
·外泌体与自身免疫性疾病的治疗 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-90页 |
综述一 | 第90-108页 |
参考文献 | 第102-108页 |
综述二 | 第108-116页 |
参考文献 | 第114-116页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第116页 |