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小鼠Zhangfei基因过表达和shRNA干扰慢病毒载体的构建和鉴定

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 内质网应激和 Zhangfei 的研究进展第11-18页
   ·内质网应激研究进展第11-14页
     ·内质网应激第11页
     ·未折叠蛋白反应信号通路第11-14页
   ·Zhangfei 的研究进展第14-18页
     ·Zhangfei 基因的发现第14-15页
     ·Zhangfei 的结构特点第15页
     ·Zhangfei 的生物学功能第15-18页
第二章 慢病毒载体介导的 RNAi 的研究进展第18-24页
   ·RNAi 的作用机制第18-19页
     ·小干扰 RNA第18-19页
     ·微小 RNA第19页
   ·慢病毒载体研究进展第19-22页
     ·慢病毒第20页
     ·慢病毒的基本结构第20页
     ·以 HIV-1 为基础的慢病毒载体发展第20-22页
   ·慢病毒介导的 RNAi 的应用前景第22-24页
第三章 小鼠 Zhangfei 基因过表达和 shRNA 干扰慢病毒载体的构建第24-42页
   ·材料第24-25页
     ·菌株和质粒第24页
     ·主要试剂第24页
     ·实验仪器第24-25页
   ·方法第25-32页
     ·Zhangfei 重组慢病毒过表达的构建第25-30页
     ·Zhangfei 基因 shRNA 干扰慢病毒载体的构建第30-32页
   ·实验结果第32-40页
     ·Zhangfei 基因扩增最适退火温度的筛选第32-33页
     ·Zhangfei 基因的回收第33-34页
     ·pMD18-T-Zhangfei 酶切鉴定第34-35页
     ·pMD18-T-Zhangfei 的测序第35-37页
     ·pCD513B-Zhangfei 的酶切鉴定第37-38页
     ·Zhangfei 慢病毒干扰载体 PCR 鉴定第38-39页
     ·pCD513B-U6-shRNA-Zhangfei 测序结果第39-40页
   ·讨论第40-41页
     ·Zhangfei 基因慢病毒过表达载体的构建第40页
     ·Zhangfei 基因慢病毒干扰载体的构建第40-41页
   ·小结第41-42页
第四章 小鼠 Zhangfei 基因重组慢病毒载体的包装和鉴定第42-56页
   ·材料第42-43页
     ·菌株和质粒第42页
     ·主要试剂第42-43页
     ·实验仪器第43页
   ·方法第43-49页
     ·病毒颗粒的包装第43-46页
     ·重组慢病毒载体的鉴定第46-49页
   ·实验结果第49-55页
     ·慢病毒包装质粒和包膜质粒的扩增鉴定第49页
     ·细胞转染用质粒的大量制备与纯化第49-50页
     ·慢病毒过表达载体瞬时转染 HEK 293 细胞第50-51页
     ·慢病毒载体的包装第51页
     ·病毒滴度测定第51-52页
     ·慢病毒干扰载体有效靶点的筛选第52-53页
     ·Zhangfei 基因慢病毒过表达载体感染 NIH 3T3 细胞第53-55页
   ·讨论第55页
   ·小结第55-56页
结论第56-57页
参考文献第57-66页
附录第66-68页
缩略词第68-70页
致谢第70-71页
作者简介第71页

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