摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 内质网应激和 Zhangfei 的研究进展 | 第11-18页 |
·内质网应激研究进展 | 第11-14页 |
·内质网应激 | 第11页 |
·未折叠蛋白反应信号通路 | 第11-14页 |
·Zhangfei 的研究进展 | 第14-18页 |
·Zhangfei 基因的发现 | 第14-15页 |
·Zhangfei 的结构特点 | 第15页 |
·Zhangfei 的生物学功能 | 第15-18页 |
第二章 慢病毒载体介导的 RNAi 的研究进展 | 第18-24页 |
·RNAi 的作用机制 | 第18-19页 |
·小干扰 RNA | 第18-19页 |
·微小 RNA | 第19页 |
·慢病毒载体研究进展 | 第19-22页 |
·慢病毒 | 第20页 |
·慢病毒的基本结构 | 第20页 |
·以 HIV-1 为基础的慢病毒载体发展 | 第20-22页 |
·慢病毒介导的 RNAi 的应用前景 | 第22-24页 |
第三章 小鼠 Zhangfei 基因过表达和 shRNA 干扰慢病毒载体的构建 | 第24-42页 |
·材料 | 第24-25页 |
·菌株和质粒 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·实验仪器 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-32页 |
·Zhangfei 重组慢病毒过表达的构建 | 第25-30页 |
·Zhangfei 基因 shRNA 干扰慢病毒载体的构建 | 第30-32页 |
·实验结果 | 第32-40页 |
·Zhangfei 基因扩增最适退火温度的筛选 | 第32-33页 |
·Zhangfei 基因的回收 | 第33-34页 |
·pMD18-T-Zhangfei 酶切鉴定 | 第34-35页 |
·pMD18-T-Zhangfei 的测序 | 第35-37页 |
·pCD513B-Zhangfei 的酶切鉴定 | 第37-38页 |
·Zhangfei 慢病毒干扰载体 PCR 鉴定 | 第38-39页 |
·pCD513B-U6-shRNA-Zhangfei 测序结果 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·Zhangfei 基因慢病毒过表达载体的构建 | 第40页 |
·Zhangfei 基因慢病毒干扰载体的构建 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第四章 小鼠 Zhangfei 基因重组慢病毒载体的包装和鉴定 | 第42-56页 |
·材料 | 第42-43页 |
·菌株和质粒 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42-43页 |
·实验仪器 | 第43页 |
·方法 | 第43-49页 |
·病毒颗粒的包装 | 第43-46页 |
·重组慢病毒载体的鉴定 | 第46-49页 |
·实验结果 | 第49-55页 |
·慢病毒包装质粒和包膜质粒的扩增鉴定 | 第49页 |
·细胞转染用质粒的大量制备与纯化 | 第49-50页 |
·慢病毒过表达载体瞬时转染 HEK 293 细胞 | 第50-51页 |
·慢病毒载体的包装 | 第51页 |
·病毒滴度测定 | 第51-52页 |
·慢病毒干扰载体有效靶点的筛选 | 第52-53页 |
·Zhangfei 基因慢病毒过表达载体感染 NIH 3T3 细胞 | 第53-55页 |
·讨论 | 第55页 |
·小结 | 第55-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
附录 | 第66-68页 |
缩略词 | 第68-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简介 | 第71页 |