| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词中英文对照 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-30页 |
| 1 稻飞虱是农业生产上的重要害虫 | 第14-18页 |
| ·灰飞虱的发生规律及为害 | 第14-16页 |
| ·越冬虫态和场所 | 第15页 |
| ·发生世代及各虫态历期 | 第15页 |
| ·田间发生规律及为害 | 第15-16页 |
| ·褐飞虱的发生规律及为害 | 第16-17页 |
| ·目前主要的防治策略及难点 | 第17-18页 |
| ·RNA干扰技术的启示及目前面临的问题 | 第18页 |
| 2 RNA干扰的研究概况 | 第18-27页 |
| ·RNA干扰的研究的历史 | 第18-19页 |
| ·RNA干扰的分子机理 | 第19-23页 |
| ·RNA干扰的起始阶段 | 第20-21页 |
| ·RNA干扰的效应阶段 | 第21-22页 |
| ·RNA干扰的扩增阶段以及干扰信号的传递 | 第22页 |
| ·蛋白质翻译水平基因沉默 | 第22-23页 |
| ·转录水平基因沉默机理 | 第23页 |
| ·不同物种中RNA干扰的特点 | 第23-26页 |
| ·细胞自主性RNA干扰 | 第24-25页 |
| ·系统性RNA干扰 | 第25-26页 |
| ·稻飞虱中RNA干扰研究现状 | 第26-27页 |
| 3 dsRNA代谢相关因子及其研究现状 | 第27-29页 |
| ·dsRNA代谢相关因子中的一类重要蛋白 | 第27-28页 |
| ·昆虫学领域中dsRBP的研究现状 | 第28-29页 |
| 4 本文的研究目的 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-44页 |
| 1 供试昆虫及其饲养方法 | 第30页 |
| 2 主要试剂和仪器设备 | 第30-31页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 3 稻飞虱TRBP和STAU基因的克隆与序列分析 | 第31-39页 |
| ·稻飞虱TRBP和STAU基因片段的筛选 | 第31页 |
| ·稻飞虱TRBP和STAU基因以及几丁质酶基因的克隆 | 第31-39页 |
| ·总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第32-33页 |
| ·5'-RACE-Ready cDNA和3'-RACE-Ready cDNA的合成 | 第33页 |
| ·PCR引物 | 第33-35页 |
| ·PCR反应 | 第35-36页 |
| ·常规分子克隆 | 第36-39页 |
| ·同源基因聚类分析及进化树的构建方法 | 第39页 |
| 4 dsRNA的制备 | 第39-40页 |
| ·体外转录模板的制备 | 第39-40页 |
| ·dsRNA的体外合成 | 第40页 |
| 5 连续喂食dsRNA的试验方法 | 第40-41页 |
| 6 沉默效应观察指标、观察方法和数据统计方法 | 第41-44页 |
| ·目标基因表达量分析 | 第41-43页 |
| ·实时荧光定量PCR引物设计 | 第41-42页 |
| ·实时荧光定量PCR反应体系 | 第42页 |
| ·灰飞虱目标基因表达量分析 | 第42-43页 |
| ·若虫死亡率 | 第43页 |
| ·数据统计方法 | 第43-44页 |
| 第三章 结果与分析 | 第44-64页 |
| 1 由转录组数据获得稻飞虱相关基因片段 | 第44页 |
| 2 灰飞虱TRBP基因的克隆及全长序列分析 | 第44-47页 |
| ·灰飞虱TRBP基因的克隆 | 第44-45页 |
| ·灰飞虱TRBP基因的全长序列的获得及分析 | 第45-47页 |
| 3 灰飞虱STAU基因的克隆及全长序列分析 | 第47-50页 |
| ·灰飞虱STAU基因的克隆 | 第47-48页 |
| ·灰飞虱STAU基因的全长序列的获得及分析 | 第48-50页 |
| 4 褐飞虱TRBP和STAU基因片段的克隆 | 第50-51页 |
| 5 稻飞虱相关基因dsRNA的合成 | 第51-52页 |
| 6 实时定量PCR产物溶解曲线 | 第52-55页 |
| 7 灰飞虱TRBP基因对RNA干扰效应的影响 | 第55-58页 |
| ·连续喂食dsRNA后不同处理试虫死亡率分析 | 第55-56页 |
| ·连续喂食dsRNA后各个目标基因的表达量变化 | 第56-58页 |
| 8 褐飞虱TRBP基因对RNA干扰效应的影响 | 第58-60页 |
| ·连续喂食dsRNA后不同处理试虫死亡率分析 | 第58页 |
| ·连续喂食dsRNA后各个目标基因的表达量变化 | 第58-60页 |
| 9 灰飞虱STAU基因对RNA干扰效应的影响 | 第60-62页 |
| ·连续喂食dsRNA后不同处理试虫死亡率分析 | 第60页 |
| ·连续喂食dsRNA后各个目标基因的表达量变化 | 第60-62页 |
| 10 褐飞虱STAU基因对RNA干扰效应的影响 | 第62-64页 |
| ·连续喂食dsRNA后不同处理试虫死亡率分析 | 第62页 |
| ·连续喂食dsRNA后各个目标基因的表达量变化 | 第62-64页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第64-68页 |
| 1 两种稻飞虱中的TRBP和STAU基因 | 第64页 |
| 2 灰飞虱中的TRBP对RNA干扰效应的影响 | 第64-65页 |
| 3 灰飞虱中的STAU对RNA干扰效应的影响 | 第65页 |
| 4 褐飞虱中的TRBP和STAU对RNA干扰效应的影响 | 第65页 |
| 5 结论 | 第65-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
