摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-24页 |
·引言 | 第10-11页 |
·野生大豆的研究进展 | 第11-12页 |
·抗病基因(R)综述 | 第12-17页 |
·大豆 NBS-LRR 类抗病基因同源克隆研究 | 第14-16页 |
·R 基因克隆的方法 | 第16-17页 |
·大豆遗传转化的研究 | 第17-22页 |
·大豆遗传转化的方法 | 第18-20页 |
·大豆遗传转化的再生体系 | 第20-22页 |
·影响农杆菌介导大豆遗传转化的因素 | 第22-23页 |
·大豆品种及受体材料 | 第22页 |
·农杆菌的株型 | 第22-23页 |
·酚类化合物与抗氧化剂 | 第23页 |
·目的与意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-32页 |
·材料 | 第24页 |
·大豆品种 | 第24页 |
·菌株及质粒 | 第24页 |
·药品与试剂盒 | 第24页 |
·主要的仪器设备 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-32页 |
·NBS 类抗病基因同源片段的克隆 | 第24-26页 |
·NBS 类抗病基因真核表达载体的构建 | 第26-29页 |
·农杆菌介导大豆子叶节遗传转化及优化体系的研究 | 第29-32页 |
·叶盘法转化烟草 | 第32页 |
3 结果与分析 | 第32-56页 |
·大豆 NBS 类抗病基因同源片段的克隆及分析鉴定 | 第32-41页 |
·大豆叶片基因组 DNA 的提取及 PCR 扩增 | 第32-33页 |
·RNA 的提取及 RT-PCR | 第33-34页 |
·目的基因片段的测序及分析鉴定 | 第34-41页 |
·真核表达载体的构建 | 第41-42页 |
·农杆菌介导大豆转化体系的优化 | 第42-51页 |
·消毒时间对大豆种子发芽与污染的影响 | 第42-43页 |
·不同器官外植体对丛芽的影响 | 第43-46页 |
·不同基因型子叶节外植体对丛芽的影响 | 第46-48页 |
·抗氧化剂对农杆菌介导大豆子叶节 GUS 瞬间表达的影响 | 第48-50页 |
·转基因大豆的再生过程 | 第50-51页 |
·转基因大豆阳性植株的检测 | 第51-52页 |
·PCR 检测 | 第51-52页 |
·转基因烟草的再生 | 第52-53页 |
·转基因烟草的 PCR 检测 | 第53-54页 |
·除草剂涂抹检测 | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-59页 |
·大豆中 NBS 类抗病基因同源片段的克隆与鉴定 | 第56-57页 |
·大豆抗病基因 NBS 同源序列表达检测 | 第57页 |
·大豆遗传转化体系的优化 | 第57页 |
·后续工作 | 第57-59页 |
5 结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
附录Ⅰ pFGC5941 载体图谱 | 第69-70页 |
附录Ⅱ 培养基及部分试剂配方 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |