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大豆NBS类抗病基因同源片段的克隆及遗传转化的初步研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 文献综述第10-24页
   ·引言第10-11页
   ·野生大豆的研究进展第11-12页
   ·抗病基因(R)综述第12-17页
     ·大豆 NBS-LRR 类抗病基因同源克隆研究第14-16页
     ·R 基因克隆的方法第16-17页
   ·大豆遗传转化的研究第17-22页
     ·大豆遗传转化的方法第18-20页
     ·大豆遗传转化的再生体系第20-22页
   ·影响农杆菌介导大豆遗传转化的因素第22-23页
     ·大豆品种及受体材料第22页
     ·农杆菌的株型第22-23页
     ·酚类化合物与抗氧化剂第23页
   ·目的与意义第23-24页
2 材料与方法第24-32页
   ·材料第24页
     ·大豆品种第24页
     ·菌株及质粒第24页
     ·药品与试剂盒第24页
     ·主要的仪器设备第24页
   ·实验方法第24-32页
     ·NBS 类抗病基因同源片段的克隆第24-26页
     ·NBS 类抗病基因真核表达载体的构建第26-29页
     ·农杆菌介导大豆子叶节遗传转化及优化体系的研究第29-32页
     ·叶盘法转化烟草第32页
3 结果与分析第32-56页
   ·大豆 NBS 类抗病基因同源片段的克隆及分析鉴定第32-41页
     ·大豆叶片基因组 DNA 的提取及 PCR 扩增第32-33页
     ·RNA 的提取及 RT-PCR第33-34页
     ·目的基因片段的测序及分析鉴定第34-41页
   ·真核表达载体的构建第41-42页
   ·农杆菌介导大豆转化体系的优化第42-51页
     ·消毒时间对大豆种子发芽与污染的影响第42-43页
     ·不同器官外植体对丛芽的影响第43-46页
     ·不同基因型子叶节外植体对丛芽的影响第46-48页
     ·抗氧化剂对农杆菌介导大豆子叶节 GUS 瞬间表达的影响第48-50页
     ·转基因大豆的再生过程第50-51页
   ·转基因大豆阳性植株的检测第51-52页
     ·PCR 检测第51-52页
   ·转基因烟草的再生第52-53页
   ·转基因烟草的 PCR 检测第53-54页
   ·除草剂涂抹检测第54-56页
4 讨论第56-59页
   ·大豆中 NBS 类抗病基因同源片段的克隆与鉴定第56-57页
   ·大豆抗病基因 NBS 同源序列表达检测第57页
   ·大豆遗传转化体系的优化第57页
   ·后续工作第57-59页
5 结论第59-61页
参考文献第61-69页
附录Ⅰ pFGC5941 载体图谱第69-70页
附录Ⅱ 培养基及部分试剂配方第70-71页
致谢第71页

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