| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 英文縮略表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-34页 |
| 一、miRNA的形成及生物学功能 | 第14-17页 |
| ·miRNA的形成 | 第14-15页 |
| ·miRNA的生物学功能 | 第15-17页 |
| 二、骨骼肌的遗传控制 | 第17-19页 |
| ·肌肉的形成 | 第17页 |
| ·肌肉的调控 | 第17-19页 |
| 三、miRNA对肌肉生长发育的调控 | 第19-22页 |
| ·对肌肉特异表达的miRNAs | 第19页 |
| ·miRNAs在肌肉中的功能 | 第19-20页 |
| ·miRNAs与肌肉疾病 | 第20-22页 |
| 四、miRNA靶标的实验验证 | 第22-24页 |
| ·生物信息学预测miRNA靶标 | 第23页 |
| ·ΔG法分析(miRNA的易近性) | 第23页 |
| ·miRNA与mRNA相互间的作用 | 第23-24页 |
| ·miRNA和靶基因mRNA的共表达 | 第24页 |
| ·miRNA对靶基因蛋白及其生物功能的影响 | 第24页 |
| 五、miR-21与TGFBI的研究进展 | 第24-25页 |
| ·miR-21基因的研究进展 | 第24-25页 |
| ·TGFBI基因的研究进展 | 第25页 |
| 六、试验的目的和意义 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-34页 |
| 第二章 试验研究 | 第34-74页 |
| 一、实验材料 | 第34-37页 |
| ·实验动物及样品采集 | 第34页 |
| ·试剂 | 第34-36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| ·生物学工具分析软件及网站 | 第36-37页 |
| ·实验设计方案 | 第37页 |
| 二、实验方法 | 第37-47页 |
| ·引物的设计 | 第37-38页 |
| ·总RNA提取 | 第38-39页 |
| ·cDNA的合成 | 第39-40页 |
| ·靶标预测 | 第40页 |
| ·猪TGFBI序列拼接 | 第40页 |
| ·Psi-Check2-TGFBI mRNA 3'UTR载体构建 | 第40-43页 |
| ·细胞的培养 | 第43-44页 |
| ·细胞转染 | 第44页 |
| ·萤光素酶活性检测 | 第44-45页 |
| ·Real-time PCR和Western blot | 第45-46页 |
| ·miR-21和TGFBI定量PCR | 第46页 |
| ·TGFBI生物学信息分析 | 第46-47页 |
| ·统计学处理 | 第47页 |
| 三、实验结果 | 第47-66页 |
| ·RNA质量检测结果 | 第47页 |
| ·靶标预测结果 | 第47-48页 |
| ·猪TGFBI序列拼接 | 第48页 |
| ·Psi-Check2-TGFBI 3'UTR载体的构建 | 第48-50页 |
| ·细胞转染 | 第50-52页 |
| ·双萤光素酶活性检测 | 第52页 |
| ·Real-time PCR和Western blot结果 | 第52-54页 |
| ·miR-21和TGFBI时空表达谱 | 第54-62页 |
| ·TGFBI蛋白序列生物信息学分析 | 第62-66页 |
| 四、讨论 | 第66-69页 |
| ·关于靶标验证 | 第66-67页 |
| ·关于miR-21研究 | 第67页 |
| ·关于TGFBI基因的功能 | 第67-68页 |
| ·miR-21调控TGFBI | 第68-69页 |
| 五、结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 附录 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
