| 目录 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 缩写词 | 第14-15页 |
| 第一章 综述 | 第15-29页 |
| 1 植物花色变化的影响因素 | 第15-18页 |
| ·植物花色变化的内在原因 | 第15-17页 |
| ·影响植物花色变化的主要环境因子 | 第17-18页 |
| 2 植物花色形成机理研究进展 | 第18-22页 |
| ·植物主要色素生物合成途径 | 第18-20页 |
| ·花色基因的转录调控研究进展 | 第20-21页 |
| ·植物花色基因工程改良研究进展 | 第21-22页 |
| 3 水仙花色研究进展 | 第22-25页 |
| ·水仙花的分类 | 第22-23页 |
| ·水仙花色及色素组成 | 第23页 |
| ·水仙花色素合成途径相关酶基因的研究进展 | 第23-24页 |
| ·中国水仙花色育种进展 | 第24-25页 |
| 4 抑制差减杂交技术与应用 | 第25-27页 |
| ·差异基因分离技术 | 第25页 |
| ·抑制差减杂交技术 | 第25-27页 |
| ·抑制差减杂交技术在园艺植物上的应用 | 第27页 |
| 5 本研究的设计思路 | 第27-29页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| ·本研究的内容和技术路线 | 第28-29页 |
| 第二章 多花水仙花期类黄酮和类胡萝卜素物质测定与分析 | 第29-39页 |
| 1 材料与方法 | 第29-32页 |
| ·试验材料 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-36页 |
| ·类黄酮物质和类胡萝卜素物质含量的测定结果 | 第32-34页 |
| ·花期主要色素物质含量的变化分析 | 第34-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| ·提取技术的选择 | 第36页 |
| ·色谱条件的选择 | 第36页 |
| ·水仙花的主要色素组分和花期含量变化 | 第36-37页 |
| ·水仙主要色素物质与花色的关系 | 第37-38页 |
| 4 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 多花水仙花瓣抑制消减杂交 cDNA 文库的构建与分析 | 第39-59页 |
| 1 材料与方法 | 第39-41页 |
| ·试验材料 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-53页 |
| ·总 RNA 质量检测及引物验证 | 第41-42页 |
| ·双链 cDNA 的合成、纯化和消化结果与分析 | 第42-43页 |
| ·连接效率检测 | 第43页 |
| ·抑制消减杂交后第二次 PCR 结果和消减效率检测 | 第43-45页 |
| ·插入片段的 PCR 鉴定和测序结果 | 第45页 |
| ·正、反向文库测序结果 GO 功能分类分析 | 第45-48页 |
| ·正、反向文库中差异基因的获取 | 第48-53页 |
| 3 讨论 | 第53-57页 |
| ·高质量的 RNA 和 dscDNA 是文库构建的关键环节 | 第53-54页 |
| ·假阳性克隆的去除问题 | 第54-55页 |
| ·GO 分类的应用 | 第55-56页 |
| ·花色素的形成可能涉及多条代谢途径 | 第56-57页 |
| 4 小结 | 第57-59页 |
| 第四章 花色差异相关基因二次筛选与分析 | 第59-67页 |
| 1 材料与方法 | 第59-60页 |
| ·试验材料 | 第59页 |
| ·试验方法 | 第59-60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-62页 |
| ·引物特异性和扩增效率分析 | 第60-61页 |
| ·内参基因（Actin）的相对表达量分析 | 第61页 |
| ·正、反向文库中候选基因的相对表达量分析 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-65页 |
| ·内参基因的应用 | 第62页 |
| ·消减文库测序结果的筛选 | 第62-63页 |
| ·花色相关候选基因分析 | 第63-65页 |
| 4 小结 | 第65-67页 |
| 第五章 花色相关基因 CDNA 全长克隆与生物信息学分析 | 第67-99页 |
| 1 材料与方法 | 第67-68页 |
| ·试验材料 | 第67页 |
| ·试验方法 | 第67-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-97页 |
| ·多花水仙 NtIPI 基因 cDNA 全长克隆与生物信息学分析 | 第68-76页 |
| ·多花水仙 NtCRTISO 基因 cDNA 全长克隆与生物信息学分析 | 第76-83页 |
| ·多花水仙 NtNCED 基因 cDNA 全长克隆与生物信息学分析 | 第83-90页 |
| ·多花水仙 NtF3’MO‐like 基因 cDNA 全长克隆与生物信息学分析 | 第90-97页 |
| 3 讨论 | 第97-99页 |
| 第六章 多花水仙开花过程中花色相关基因的表达分析 | 第99-109页 |
| 1 材料与方法 | 第99页 |
| ·试验材料 | 第99页 |
| ·试验方法 | 第99页 |
| 2 结果与分析 | 第99-106页 |
| ·多花水仙四个时期花瓣、副冠的总 RNA 质量 | 第99-100页 |
| ·熔解曲线和扩增曲线分析 | 第100-101页 |
| ·多花水仙开花过程中相关基因的差异表达分析 | 第101-106页 |
| 3 讨论 | 第106-108页 |
| ·NtIPI 基因与水仙花色的关系 | 第106页 |
| ·NtPSY 基因与水仙花色的关系 | 第106-107页 |
| ·NtCRTISO 基因与水仙花色的关系 | 第107页 |
| ·NtNCED 基因与水仙花色的关系 | 第107-108页 |
| ·NtF3’MO‐like 基因与水仙花色的关系 | 第108页 |
| 4 小结 | 第108-109页 |
| 第七章 黄花水仙 2 号 NTPSY 基因 5’端侧翼的克隆及序列分析 | 第109-122页 |
| 1 材料与方法 | 第109-111页 |
| ·材料 | 第109-110页 |
| ·试验方法 | 第110-111页 |
| 2 结果与分析 | 第111-120页 |
| ·黄花水仙 2 号叶片基因组 DNA 的提取与检测 | 第111-112页 |
| ·黄花水仙 2 号 PSY 5’端 UTR DNA 部分序列获取 | 第112-113页 |
| ·第一次步移结果与验证 | 第113页 |
| ·第二次步移结果与验证 | 第113-114页 |
| ·黄花水仙 2 号 PSY5’端侧翼序列生物信息学分析 | 第114-120页 |
| 3 讨论 | 第120-121页 |
| ·NtPSY 基因 5’端 UTR 的内含子 | 第120页 |
| ·NtPSY 基因 5’端侧翼的顺式作用元件 | 第120-121页 |
| 4 小结 | 第121-122页 |
| 小结与展望 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-135页 |
| 附录 | 第135-149页 |
| 附录1 本研究设计的引物序列 | 第135-139页 |
| 附录2 用于 RACE 克隆的候选基因 UNIESTS 序列 | 第139-141页 |
| 附录3 花色相关基因拼接全长及 RACE 说明图 | 第141-147页 |
| 附录4 黄花水仙 2 号 NTPSY 基因 5`端侧翼序列 | 第147-149页 |
| 在学期间发表与待发表的文章 | 第149-150页 |
| 致谢 | 第150页 |
