| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-39页 |
| ·血液凝固与蛇毒调节凝血蛋白的研究进展 | 第13-18页 |
| ·血液凝固的生理过程 | 第13-15页 |
| ·调节血液凝固过程的 C-型凝集素类似蛋白 | 第15-18页 |
| ·凝血因子 IX/X 结合蛋白家族的研究进展 | 第18-23页 |
| ·凝血因子 IX/X 结合蛋白家族的发现 | 第18-20页 |
| ·凝血因子 IX/X 结合蛋白家族的生理生化性质 | 第20-23页 |
| ·凝血因子 IX 和凝血因子 X 及它们纯化方法的研究进展 | 第23-39页 |
| ·凝血因子 IX 研究进展 | 第23-26页 |
| ·凝血因子 X 研究进展 | 第26-28页 |
| ·凝血因子 IX 的纯化 | 第28-30页 |
| ·凝血因子 X 的纯化 | 第30-39页 |
| 第二章 蛇毒抗凝血因子 ACF Ⅱ 抗凝血活性及其机理、结构稳定性及其影响因素对活性的影响 | 第39-81页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·实验仪器和材料 | 第39-40页 |
| ·实验仪器 | 第39-40页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-47页 |
| ·ACF Ⅰ 和 ACF Ⅱ 的纯化 | 第40-41页 |
| ·ACF Ⅰ 和 ACF Ⅱ 的对大鼠在体抗凝血实验 | 第41页 |
| ·ACF Ⅱ 和 FX 的电泳结合实验 | 第41页 |
| ·表面等离子体共振法（SPR）测定ACF Ⅱ 和FX 的结合动力学 | 第41-42页 |
| ·表面等离子体共振法（SPR）测定ACF Ⅱ 和FIX 的结合动力学 | 第42页 |
| ·等温滴定微量热法（ITC）测定ACF Ⅱ 和金属离子的结合动力学 | 第42-43页 |
| ·荧光分光光度法测定金属离子对ACF Ⅱ 的热力学稳定性和的影响 | 第43-44页 |
| ·荧光分光光度法测定金属离子对 ACF Ⅱ 的化学稳定性的影响 | 第44-45页 |
| ·圆二色谱法（CD）测定金属离子对ACF Ⅱ 的热稳定性的影响 | 第45页 |
| ·圆二色谱法（CD）测定金属离子对ACF Ⅱ 的化学稳定性的影响 | 第45-46页 |
| ·差示扫描微量热法（DSC）测定金属离子对ACF Ⅱ 的热稳定性的影响 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-73页 |
| ·ACF Ⅰ和 ACF Ⅱ 的纯化 | 第47-49页 |
| ·ACF Ⅰ和 ACF Ⅱ 的对大鼠在体抗凝血实验 | 第49-52页 |
| ·等温滴定微量热（ITC）检测金属离子与ACF Ⅱ 的结合 | 第52-55页 |
| ·金属离子结合 ACF Ⅱ 对其结构的影响 | 第55-57页 |
| ·通过PAGE 检测金属离子调控ACF Ⅱ 和 FX 结合 | 第57-58页 |
| ·使用SPR 分析金属离子对ACF Ⅱ 与FX_a 结合反应的影响 | 第58-60页 |
| ·通过PAGE 检测金属离子调控ACF Ⅱ 和 FIX 结合 | 第60-61页 |
| ·使用SPR 分析金属离子对ACF Ⅱ 与FIX_a 结合反应的影响 | 第61-63页 |
| ·荧光检测金属离子对GdnHCl 诱导apo-ACF Ⅱ 解折叠的影响 | 第63-65页 |
| ·CD 分析金属离子对GdnHCl 诱导apo-ACF Ⅱ 解折叠的影响 | 第65-67页 |
| ·金属离子对ACF Ⅱ 热稳定性的影响 | 第67-69页 |
| ·DSC分析金属离子对ACF Ⅱ热稳定性的影响 | 第69-73页 |
| ·实验讨论 | 第73-81页 |
| 第三章 高效亲和层析纯化凝血因子 IX 和凝血因子 X | 第81-101页 |
| ·引言 | 第81-82页 |
| ·实验仪器和材料 | 第82-83页 |
| ·实验仪器 | 第82-83页 |
| ·实验材料 | 第83页 |
| ·实验方法 | 第83-87页 |
| ·CNBr-actived Sepharose 48 偶联ACF Ⅰ 的制备 | 第83页 |
| ·血液的采集和血浆的制备 | 第83-84页 |
| ·钡盐吸附法获得维生素-K 依赖性蛋白混合粗提物 | 第84页 |
| ·Sephadex A-50 柱层析法获得维生素-K 依赖性蛋白混合粗提物 | 第84页 |
| ·ACF I-Sepharose 48 亲和色谱 | 第84-85页 |
| ·凝血因子 X 的活性检测 | 第85页 |
| ·凝血因子 IX 的活性检测 | 第85-86页 |
| ·快速蛋白质液相层析（FPLC）分离FIX 和FX | 第86页 |
| ·高效液相色谱-电喷雾串联质谱法（LC-ESI-MS/MS）分析 | 第86-87页 |
| ·表面等离子体共振法（SPR）测定ACF Ⅱ 与FIX/FX 的结合活性 | 第87页 |
| ·实验结果 | 第87-95页 |
| ·凝血因子IX 和凝血因子X 的混合物的分离制备 | 第87-89页 |
| ·FPLC 对凝血因子IX 和凝血因子X 进一步纯化 | 第89-90页 |
| ·测定酶活力并计算两步色谱法的收率 | 第90-91页 |
| ·鸟枪法蛋白质组学鉴定凝血因子IX 及凝血因子X | 第91-94页 |
| ·SPR 鉴定凝血因子IX 及凝血因子X 与ACF Ⅱ 的结合活性 | 第94-95页 |
| ·实验讨论 | 第95-101页 |
| 第三章 蛇毒多功能蛋白 ACF Ⅱ 降血压活性及其机理 | 第101-115页 |
| ·引言 | 第101页 |
| ·实验仪器和材料 | 第101-102页 |
| ·实验仪器 | 第101页 |
| ·实验材料 | 第101-102页 |
| ·实验方法 | 第102-103页 |
| ·大鼠在体心血管实验 | 第102页 |
| ·离体血管环的舒张实验 | 第102-103页 |
| ·数据统计与分析 | 第103页 |
| ·实验结果 | 第103-111页 |
| ·ACF Ⅱ 对麻醉的正常血压大鼠的降血压作用 | 第103-106页 |
| ·ACF Ⅱ 介导 NO 释放的降血压作用 | 第106-108页 |
| ·ACF Ⅱ 对苯肾上腺素预收缩的动脉血管环的舒张作用 | 第108-110页 |
| ·NO 介导 ACF Ⅱ 对动脉血管环的舒张作用 | 第110-111页 |
| ·实验讨论 | 第111-113页 |
| ·实验讨论 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第119-121页 |
