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家蚕核型多角体病毒ORF79基因(bm79)的结构和蛋白互作分析

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第12-28页
   ·杆状病毒概述第12-15页
     ·杆状病毒分类第12-13页
     ·杆状病毒的形态与结构第13-14页
     ·杆状病毒的生活周期第14-15页
   ·杆状病毒的分子生物学特征第15-19页
     ·杆状病毒的基因组序列第15页
     ·杆状病毒的基因组复制与转录第15-16页
     ·杆状病毒的保守基因及功能第16-19页
   ·杆状病毒侵染路径第19-24页
     ·杆状病毒侵染路径第19-20页
     ·杆状病毒侵染相关基因第20-24页
   ·分子荧光互补(BiFC)与蛋白相互作用研究第24-28页
     ·BiFC原理第24-25页
     ·BIFC的优缺点及应用第25-28页
第二章 引言第28-30页
   ·研究背景及目的意义第28页
   ·研究内容第28-29页
   ·技术路线第29-30页
第三章 bm79基因克隆及转录分析第30-38页
   ·材料与方法第30-32页
     ·数据和材料第30页
     ·主要仪器第30-31页
     ·主要试剂第31页
     ·主要溶液及配制第31-32页
   ·实验方法第32-34页
     ·计算机软件分析方法第32页
     ·引物设计第32页
     ·RNA提取方法第32-33页
     ·RNA的反转录成cDNA第33页
     ·cDNA的完整性检测第33-34页
     ·PCR扩增检测bm79在病毒感染后不同时间点的转录情况第34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·bm79的核苷酸及其编码的氨基酸的序列特征第34-35页
     ·BM79的同源性分析第35-36页
     ·bm79基因转录时相分析第36-37页
   ·讨论第37-38页
第四章 BM79蛋白表达及核定位信号鉴定第38-58页
   ·材料、试剂和仪器第38-40页
     ·实验材料第38页
     ·实验仪器第38页
     ·主要试剂第38-39页
     ·主要溶液及配制第39-40页
   ·实验方法与步骤第40-50页
     ·构建BM79蛋白表达载体第40-46页
     ·昆虫细胞培养技术第46-47页
     ·细胞转染及免疫荧光技术第47-48页
     ·构建BM79蛋白截短突变载体第48-50页
   ·结果与讨论第50-55页
     ·BM79蛋白在宿主细胞中的亚细胞定位第50-52页
     ·BmNPV感染对BM79蛋白在细胞中分布的影响第52-53页
     ·BM79蛋白的核定位信号鉴定第53-55页
   ·讨论第55-58页
第五章 BM79蛋白与其他蛋白的相互作用第58-76页
   ·实验材料与主要试剂第58-61页
     ·实验材料第58页
     ·实验仪器第58页
     ·主要试剂第58页
     ·主要溶液及配制第58-61页
   ·实验方法第61-68页
     ·构建BiFC载体质粒第61-63页
     ·CaCl_2法制备新鲜感受态细胞第63页
     ·转座第63-64页
     ·重组病毒Bacmid DNA的提取第64页
     ·重组病毒Bacmid DNA的PCR鉴定第64-65页
     ·重组病毒Bacmid DNA对昆虫细胞的的转染第65页
     ·BV病毒的收取及滴度的测定第65-66页
     ·病毒虫体感染增殖第66页
     ·免疫共沉淀(Co-IP)方法第66-68页
   ·结果与分析第68-73页
     ·重组病毒转座载体的构建与鉴定第68-69页
     ·BiFC重组病毒的构建与鉴定第69-70页
     ·BiFC重组病毒感染BmN-SWU1细胞后阳性荧光信号检测第70-71页
     ·免疫共沉淀鉴定蛋白质间的相互作用第71-73页
   ·讨论第73-76页
第六章 结论第76-78页
参考文献第78-88页
致谢第88-90页
附录一 缩略词表第90-96页
附录二 硕士在读期间发表的文章及参研课题情况第96页

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