| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 第一章 Cr(Ⅵ)对16HBE的损害及聚-ADP-核糖基化在其中的影响分析 | 第14-55页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 1 材料 | 第15-21页 |
| ·细胞及受试物质 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要溶液的配制 | 第18-21页 |
| 2 方法 | 第21-31页 |
| ·倒置显微镜观察细胞形态 | 第21页 |
| ·CCK-8法检测细胞增殖抑制能力 | 第21页 |
| ·免疫荧光分析PAR表达 | 第21-22页 |
| ·流式细胞仪分析细胞周期 | 第22-23页 |
| ·流式细胞仪分析细胞凋亡 | 第23页 |
| ·ELISA三明治法分析细胞调亡 | 第23页 |
| ·单细胞凝胶电泳检测DNA损伤 | 第23-25页 |
| ·荧光定量PCR检测相关基因mRNA表达水平 | 第25-28页 |
| ·Western Blotting检测相关蛋白表达水平 | 第28-31页 |
| ·统计学分析 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-50页 |
| ·细胞活力测定 | 第31-32页 |
| ·Cr(Ⅵ)处理后细胞形态 | 第32-34页 |
| ·Cr(Ⅵ)作用后PAR的表达变化 | 第34-38页 |
| ·聚ADP-核糖基化对Cr(Ⅵ)作用后细胞周期的影响 | 第38-40页 |
| ·聚ADP-核糖基化对Cr(Ⅵ)作用后细胞凋亡的影响 | 第40-42页 |
| ·聚ADP-核糖基化对Cr(Ⅵ)导致DNA损伤的影响 | 第42-45页 |
| ·聚ADP-核糖基化对Cr(Ⅵ)作用后相关基因mRNA表达的影响 | 第45-49页 |
| ·聚ADP-核糖基化对Cr(Ⅵ)作用后相关基因蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-55页 |
| 第二章 聚-ADP-核糖基化在Cr(Ⅵ)诱发16HBE基因组DNA甲基化水平改变中的作用 | 第55-70页 |
| 前言 | 第55-56页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| ·细胞及受试物质 | 第56页 |
| ·主要仪器 | 第56-57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-58页 |
| ·免疫荧光分析5-甲基胞嘧啶 | 第57页 |
| ·荧光定量PCR检测甲基化相关基因的mRNA表达水平 | 第57页 |
| ·Western Blotting检测甲基化相关基因的蛋白表达水平 | 第57-58页 |
| ·统计学分析 | 第58页 |
| 3 结果 | 第58-67页 |
| ·Cr(Ⅵ)作用后两种细胞基因组DNA甲基化水平变化 | 第58-61页 |
| ·甲基化相关蛋白酶基因的mRNA表达 | 第61-66页 |
| ·甲基化相关蛋白酶的表达 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-70页 |
| 第三章 Cr(Ⅵ)对16HBE细胞毒性中PARG功能相关蛋白的筛选及其功能的初步探讨 | 第70-94页 |
| 前言 | 第70-71页 |
| 1 材料 | 第71-76页 |
| ·细胞及受试物质 | 第71页 |
| ·主要仪器 | 第71-72页 |
| ·主要试剂 | 第72页 |
| ·主要溶液的配制 | 第72-76页 |
| 2 方法 | 第76-84页 |
| ·蛋白提取及纯化 | 第76-77页 |
| ·蛋白定量 | 第77页 |
| ·CyDye DIGE最小标记法荧光染料的制备 | 第77-78页 |
| ·标记样品和内标 | 第78-79页 |
| ·染料标记效率测试 | 第79页 |
| ·双向凝胶电泳分离 | 第79-81页 |
| ·凝胶扫描及图像分析 | 第81-82页 |
| ·胶内酶解 | 第82-83页 |
| ·AnchorChip点靶 | 第83页 |
| ·MALDI-TOF-MS/MS分析及数据库检索 | 第83页 |
| ·相关蛋白功能分析 | 第83-84页 |
| ·统计学分析 | 第84页 |
| 3 结果 | 第84-92页 |
| ·蛋白定量标准曲线 | 第84-85页 |
| ·标记效率测试 | 第85-86页 |
| ·2D-DIGE分析 | 第86-89页 |
| ·差异蛋白点的质谱分析和数据库搜索 | 第89-92页 |
| 4 讨论 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-105页 |
| 附录 | 第105-106页 |
| 英文缩略词 | 第105-106页 |
| 综述 | 第106-125页 |
| 参考文献 | 第115-125页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第125页 |
| 攻读学位期间参与的课题 | 第125页 |
| 攻读学位期间获得的奖励 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
