摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-14页 |
第一章 绪论 | 第14-27页 |
·小球藻概述 | 第14-15页 |
·小球藻基因工程研究进展 | 第15-19页 |
·选择标记 | 第15页 |
·启动子 | 第15-16页 |
·小球藻遗传转化方法 | 第16-19页 |
·微藻生物合成叶黄素的代谢途径及其相关酶和编码基因 | 第19-24页 |
·代谢途径 | 第19-21页 |
·相关酶和编码基因 | 第21-24页 |
·小球藻合成叶黄素的研究进展 | 第24-25页 |
·叶黄素概述 | 第24页 |
·影响小球藻生长和叶黄素合成的营养因子 | 第24-25页 |
·影响小球藻生长和叶黄素合成的环境因子 | 第25页 |
·立题意义和研究内容 | 第25-27页 |
第二章 根癌农杆菌介导产叶黄素小球藻遗传转化体系的建立 | 第27-37页 |
·实验材料 | 第27-29页 |
·藻株、菌株和质粒 | 第27页 |
·培养基和培养条件 | 第27-28页 |
·主要实验试剂及其配制 | 第28-29页 |
·研究方法 | 第29-33页 |
·根癌农杆菌和小球藻抗生素敏感性检测 | 第29页 |
·根癌农杆菌的转化 | 第29页 |
·根癌农杆菌介导小球藻的转化 | 第29-30页 |
·小球藻阳性转化子的表型验证 | 第30页 |
·小球藻阳性转化子基因组 DNA 的提取及 PCR 验证 | 第30-31页 |
·转化子的 RT-PCR 验证 | 第31-33页 |
·结果与讨论 | 第33-36页 |
·根癌农杆菌和小球藻的抗生素敏感性检测 | 第33页 |
·根癌农杆菌阳性转化子获得 | 第33-34页 |
·小球藻阳性转化子的筛选和表型验证 | 第34-35页 |
·小球藻转化子的 PCR 验证 | 第35-36页 |
·小球藻转化子的 RT-PCR 验证 | 第36页 |
·本章小结 | 第36-37页 |
第三章 IPP 异构酶基因(idi)在产叶黄素小球藻中的整合表达研究 | 第37-48页 |
·实验材料 | 第37-38页 |
·藻株、菌株和质粒 | 第37页 |
·培养基和培养条件 | 第37-38页 |
·主要实验试剂及其配制 | 第38页 |
·研究方法 | 第38-42页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化方法 | 第38-39页 |
·重组 DNA 技术 | 第39页 |
·大肠杆菌 DH5α基因组的提取 | 第39页 |
·引物设计及 PCR 反应条件 | 第39-40页 |
·双元载体 pCAMBIA2301-idi 的构建 | 第40-41页 |
·根癌农杆菌的转化 | 第41页 |
·根癌农杆菌介导小球藻的转化 | 第41页 |
·小球藻阳性转化子的表型验证 | 第41页 |
·小球藻阳性转化子基因组 DNA 的提取及 PCR 验证 | 第41-42页 |
·小球藻生物量的测定 | 第42页 |
·小球藻叶黄素含量的测定 | 第42页 |
·结果与讨论 | 第42-47页 |
·双元载体 pCAMBIA2301-idi 的构建 | 第42-43页 |
·根癌农杆菌阳性转化子获得 | 第43-44页 |
·小球藻阳性转化子的筛选和表型验证 | 第44页 |
·小球藻转化子的 PCR 验证 | 第44-45页 |
·小球藻生物量的测定 | 第45-46页 |
·小球藻叶黄素含量的测定 | 第46-47页 |
·本章小结 | 第47-48页 |
第四章 透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在产叶黄素小球藻中的整合表达研究 | 第48-57页 |
·实验材料 | 第48-49页 |
·藻株、菌株和质粒 | 第48页 |
·培养基和培养条件 | 第48页 |
·主要实验试剂及其配制 | 第48-49页 |
·研究方法 | 第49-51页 |
·引物设计及 PCR 反应条件 | 第49页 |
·双元载体 pCAMBIA2301- vgb 的构建 | 第49-50页 |
·根癌农杆菌的转化 | 第50页 |
·根癌农杆菌介导小球藻的转化 | 第50页 |
·小球藻阳性转化子的表型验证 | 第50页 |
·小球藻阳性转化子基因组 DNA 的提取及 PCR 验证 | 第50页 |
·小球藻生物量的测定 | 第50页 |
·小球藻叶黄素含量的测定 | 第50-51页 |
·结果与讨论 | 第51-55页 |
·双元载体 pCAMBIA2301- vgb 的构建 | 第51-52页 |
·根癌农杆菌阳性转化子获得 | 第52页 |
·小球藻阳性转化子的筛选和表型验证 | 第52-53页 |
·小球藻转化子的 PCR 验证 | 第53页 |
·小球藻生物量的测定 | 第53-54页 |
·小球藻叶黄素的测定 | 第54-55页 |
·本章小结 | 第55-57页 |
第五章 葡萄糖转运蛋白基因(Glut1)在产叶黄素小球藻中的整合表达研究 | 第57-68页 |
·实验材料 | 第57-58页 |
·藻株、菌株和质粒 | 第57页 |
·培养基和培养条件 | 第57页 |
·主要实验试剂及其配制 | 第57-58页 |
·研究方法 | 第58-62页 |
·RT-PCR 扩增 Glut1 基因 | 第58-59页 |
·引物设计及 PCR 反应条件 | 第59-60页 |
·双元载体 pCAMBIA2301- Glut1 的构建 | 第60页 |
·根癌农杆菌的转化 | 第60页 |
·根癌农杆菌介导小球藻的转化 | 第60-61页 |
·小球藻阳性转化子的表型验证 | 第61页 |
·小球藻阳性转化子基因组 DNA 的提取及 PCR 验证 | 第61页 |
·小球藻生物量的测定 | 第61页 |
·葡萄糖利用量的测定 | 第61页 |
·小球藻叶黄素含量的测定 | 第61-62页 |
·结果与讨论 | 第62-67页 |
·双元载体 pCAMBIA2301-Glut1 的构建 | 第62-63页 |
·根癌农杆菌阳性转化子获得 | 第63页 |
·小球藻阳性转化子的筛选和表型验证 | 第63-64页 |
·小球藻转化子的 PCR 验证 | 第64页 |
·小球藻生物量的测定 | 第64-65页 |
·葡萄糖利用量的测定 | 第65-66页 |
·小球藻叶黄素的测定 | 第66-67页 |
·本章小结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
硕士期间发表的学位论文 | 第74页 |