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根癌农杆菌介导产叶黄素小球藻遗传转化的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-14页
第一章 绪论第14-27页
   ·小球藻概述第14-15页
   ·小球藻基因工程研究进展第15-19页
     ·选择标记第15页
     ·启动子第15-16页
     ·小球藻遗传转化方法第16-19页
   ·微藻生物合成叶黄素的代谢途径及其相关酶和编码基因第19-24页
     ·代谢途径第19-21页
     ·相关酶和编码基因第21-24页
   ·小球藻合成叶黄素的研究进展第24-25页
     ·叶黄素概述第24页
     ·影响小球藻生长和叶黄素合成的营养因子第24-25页
     ·影响小球藻生长和叶黄素合成的环境因子第25页
   ·立题意义和研究内容第25-27页
第二章 根癌农杆菌介导产叶黄素小球藻遗传转化体系的建立第27-37页
   ·实验材料第27-29页
     ·藻株、菌株和质粒第27页
     ·培养基和培养条件第27-28页
     ·主要实验试剂及其配制第28-29页
   ·研究方法第29-33页
     ·根癌农杆菌和小球藻抗生素敏感性检测第29页
     ·根癌农杆菌的转化第29页
     ·根癌农杆菌介导小球藻的转化第29-30页
     ·小球藻阳性转化子的表型验证第30页
     ·小球藻阳性转化子基因组 DNA 的提取及 PCR 验证第30-31页
     ·转化子的 RT-PCR 验证第31-33页
   ·结果与讨论第33-36页
     ·根癌农杆菌和小球藻的抗生素敏感性检测第33页
     ·根癌农杆菌阳性转化子获得第33-34页
     ·小球藻阳性转化子的筛选和表型验证第34-35页
     ·小球藻转化子的 PCR 验证第35-36页
     ·小球藻转化子的 RT-PCR 验证第36页
   ·本章小结第36-37页
第三章 IPP 异构酶基因(idi)在产叶黄素小球藻中的整合表达研究第37-48页
   ·实验材料第37-38页
     ·藻株、菌株和质粒第37页
     ·培养基和培养条件第37-38页
     ·主要实验试剂及其配制第38页
   ·研究方法第38-42页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化方法第38-39页
     ·重组 DNA 技术第39页
     ·大肠杆菌 DH5α基因组的提取第39页
     ·引物设计及 PCR 反应条件第39-40页
     ·双元载体 pCAMBIA2301-idi 的构建第40-41页
     ·根癌农杆菌的转化第41页
     ·根癌农杆菌介导小球藻的转化第41页
     ·小球藻阳性转化子的表型验证第41页
     ·小球藻阳性转化子基因组 DNA 的提取及 PCR 验证第41-42页
     ·小球藻生物量的测定第42页
     ·小球藻叶黄素含量的测定第42页
   ·结果与讨论第42-47页
     ·双元载体 pCAMBIA2301-idi 的构建第42-43页
     ·根癌农杆菌阳性转化子获得第43-44页
     ·小球藻阳性转化子的筛选和表型验证第44页
     ·小球藻转化子的 PCR 验证第44-45页
     ·小球藻生物量的测定第45-46页
     ·小球藻叶黄素含量的测定第46-47页
   ·本章小结第47-48页
第四章 透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在产叶黄素小球藻中的整合表达研究第48-57页
   ·实验材料第48-49页
     ·藻株、菌株和质粒第48页
     ·培养基和培养条件第48页
     ·主要实验试剂及其配制第48-49页
   ·研究方法第49-51页
     ·引物设计及 PCR 反应条件第49页
     ·双元载体 pCAMBIA2301- vgb 的构建第49-50页
     ·根癌农杆菌的转化第50页
     ·根癌农杆菌介导小球藻的转化第50页
     ·小球藻阳性转化子的表型验证第50页
     ·小球藻阳性转化子基因组 DNA 的提取及 PCR 验证第50页
     ·小球藻生物量的测定第50页
     ·小球藻叶黄素含量的测定第50-51页
   ·结果与讨论第51-55页
     ·双元载体 pCAMBIA2301- vgb 的构建第51-52页
     ·根癌农杆菌阳性转化子获得第52页
     ·小球藻阳性转化子的筛选和表型验证第52-53页
     ·小球藻转化子的 PCR 验证第53页
     ·小球藻生物量的测定第53-54页
     ·小球藻叶黄素的测定第54-55页
   ·本章小结第55-57页
第五章 葡萄糖转运蛋白基因(Glut1)在产叶黄素小球藻中的整合表达研究第57-68页
   ·实验材料第57-58页
     ·藻株、菌株和质粒第57页
     ·培养基和培养条件第57页
     ·主要实验试剂及其配制第57-58页
   ·研究方法第58-62页
     ·RT-PCR 扩增 Glut1 基因第58-59页
     ·引物设计及 PCR 反应条件第59-60页
     ·双元载体 pCAMBIA2301- Glut1 的构建第60页
     ·根癌农杆菌的转化第60页
     ·根癌农杆菌介导小球藻的转化第60-61页
     ·小球藻阳性转化子的表型验证第61页
     ·小球藻阳性转化子基因组 DNA 的提取及 PCR 验证第61页
     ·小球藻生物量的测定第61页
     ·葡萄糖利用量的测定第61页
     ·小球藻叶黄素含量的测定第61-62页
   ·结果与讨论第62-67页
     ·双元载体 pCAMBIA2301-Glut1 的构建第62-63页
     ·根癌农杆菌阳性转化子获得第63页
     ·小球藻阳性转化子的筛选和表型验证第63-64页
     ·小球藻转化子的 PCR 验证第64页
     ·小球藻生物量的测定第64-65页
     ·葡萄糖利用量的测定第65-66页
     ·小球藻叶黄素的测定第66-67页
   ·本章小结第67-68页
参考文献第68-73页
致谢第73-74页
硕士期间发表的学位论文第74页

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