中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-38页 |
1 旱灾对农业的影响 | 第12-13页 |
2 高等植物启动子的研究进展 | 第13-36页 |
·高等植物启动子的基本结构及功能 | 第13-16页 |
·植物启动子的类型 | 第16-33页 |
·植物启动子的主要研究方法 | 第33-36页 |
3 本研究的目的和意义 | 第36-38页 |
第二章 拟南芥干旱诱导型启动子 Atmyb35 的克隆及序列分析 | 第38-48页 |
1 材料 | 第38-40页 |
·植物材料 | 第38页 |
·菌株 | 第38页 |
·试剂 | 第38-39页 |
·仪器设备 | 第39页 |
·培养基和溶液配制 | 第39-40页 |
2 方法 | 第40-44页 |
·获得目的启动子序列 | 第40页 |
·设计引物 | 第40页 |
·CTAB 法提取少量拟南芥基因组 DNA | 第40-41页 |
·通过 PCR 反应获得目的启动子 | 第41页 |
·PCR 反应产物回收 | 第41-42页 |
·大肠杆菌 (E. coli ) DH5α热击感受态细胞的制备 | 第42页 |
·PCR 回收产物与 T 载体连接 | 第42-43页 |
·连接产物热激转化 | 第43页 |
·重组质粒提取与酶切鉴定 | 第43-44页 |
·测序结果分析 | 第44页 |
3 结果与分析 | 第44-47页 |
·启动子 Atmyb35 的获得 | 第44-46页 |
·启动子 Atmyb35 序列分析 | 第46-47页 |
4 结论与讨论 | 第47-48页 |
第三章 植物表达载体的构建及农杆菌的转化 | 第48-53页 |
1 材料 | 第48页 |
2 方法 | 第48-50页 |
·构建植物真核表达载体 | 第48-49页 |
·制备农杆菌热激感受态细胞及转化 | 第49-50页 |
·鉴定农杆菌转化子 | 第50页 |
3 结果与分析 | 第50-51页 |
·pCAMBIA1301- Atmyb35 植物表达载体构建 | 第50-51页 |
4 结论与讨论 | 第51-53页 |
第四章 GUS 报告基因瞬时表达分析 | 第53-57页 |
1 材料 | 第53-54页 |
·主要试剂和植物材料 | 第53页 |
·实验设备 | 第53页 |
·主要溶液的配制 | 第53-54页 |
2 方法 | 第54-55页 |
·农杆菌介导侵染烟草 | 第54页 |
·GUS 组织化学染色分析 | 第54-55页 |
3 结果与分析 | 第55-56页 |
·感染时间对瞬时表达的影响 | 第55页 |
·组织化学染色条件的优化 | 第55-56页 |
·GUS 组织化学染色结果分析 | 第56页 |
4 结论与讨论 | 第56-57页 |
第五章 通过渐变缺失分析启动子核心序列 | 第57-64页 |
1 材料 | 第57-58页 |
·植物材料 | 第57页 |
·菌株与质粒 | 第57页 |
·主要设备 | 第57页 |
·主要试剂 | 第57-58页 |
2 方法 | 第58-61页 |
·启动子缺失片段的克隆及表达载体的构建 | 第58-59页 |
·GUS 荧光定量分析 | 第59-61页 |
3 结果与分析 | 第61-62页 |
·启动子 Atmyb35 缺失片段的克隆及表达载体的构建 | 第61-62页 |
·荧光定量分析 | 第62页 |
4 结论与讨论 | 第62-64页 |
第六章 烟草遗传转化及转基因植株的检测 | 第64-69页 |
1 材料 | 第64-65页 |
·植物材料 | 第64页 |
·主要试剂 | 第64页 |
·菌株与质粒 | 第64页 |
·主要仪器 | 第64页 |
·主要溶液的配制 | 第64-65页 |
2 方法 | 第65-66页 |
·农杆菌大规模培养 | 第65页 |
·制备受体烟草叶盘 | 第65页 |
·农杆菌介导的遗传转化和烟草的组织再生及鉴定 | 第65-66页 |
3 结果与分析 | 第66-68页 |
·转基因烟草的培养 | 第66-67页 |
·转基因烟草 PCR 验证 | 第67-68页 |
4 结论与讨论 | 第68-69页 |
结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-81页 |
作者简介 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |