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Xenorhabdus budapestensis D43菌株杀虫蛋白的分离纯化及致病机理的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-15页
第一章 文献综述第15-30页
   ·昆虫病原线虫共生菌第16-20页
     ·昆虫病原线虫共生菌的分类地位第16-18页
     ·昆虫病原线虫共生菌的生物学特性第18-20页
   ·昆虫病原线虫共生菌杀虫毒素第20-26页
     ·昆虫病原线虫共生菌杀虫蛋白第21-24页
     ·昆虫病原线虫共生菌蛋白酶第24-25页
     ·昆虫病原线虫共生菌其他杀虫物质第25-26页
   ·昆虫免疫第26-28页
     ·昆虫酚氧化酶系统的激活第26-27页
     ·昆虫血细胞的免疫反应第27页
     ·昆虫抗菌肽第27-28页
   ·昆虫病原线虫共生菌杀虫蛋白的致病机理第28页
   ·研究目的与意义第28页
   ·研究内容与技术路线第28-30页
第二章 共生菌胞内蛋白纯化与杀虫蛋白筛选第30-38页
   ·材料和方法第30-33页
     ·供试线虫第30页
     ·供试昆虫第30页
     ·主要试剂和仪器第30页
     ·培养基第30-31页
     ·溶液配制第31页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第31-32页
     ·蛋白浓度测定第32页
     ·X. budapestensis D43 胞内蛋白纯化第32-33页
     ·蛋白杀虫活力测定与筛选第33页
     ·数据分析第33页
   ·结果与分析第33-36页
     ·昆虫病原线虫共生菌 X. budapestensis D43 的分离第33-34页
     ·昆虫病原线虫共生菌 X. budapestensis D43 胞内蛋白的纯化第34页
     ·血腔活性蛋白筛选第34-35页
     ·胃毒活性蛋白筛选第35-36页
     ·HIP57 蛋白对大蜡螟幼虫 LD50的测定第36页
   ·讨论第36-37页
   ·小结第37-38页
第三章 HIP57 蛋白鉴定和基因克隆第38-48页
   ·材料和方法第38-44页
     ·菌株和质粒载体第38页
     ·主要试剂和仪器第38页
     ·培养基第38-39页
     ·溶液配制第39-40页
     ·电泳第40-41页
     ·蛋白质谱鉴定第41-42页
     ·基因克隆第42-44页
   ·结果与分析第44-46页
     ·HIP57 蛋白鉴定第44页
     ·HIP57 基因克隆第44-46页
   ·讨论第46-47页
   ·小结第47-48页
第四章 HIP57 蛋白生物信息学分析第48-61页
   ·生物信息学分析软件和网址第48-49页
   ·HIP57 生物信息学分析第49页
     ·HIP57 氨基酸序列翻译第49页
     ·HIP57 理化性质分析第49页
     ·HIP57 信号肽预测第49页
     ·HIP57 蛋白结构预测第49页
     ·多序列比对第49页
     ·系统发育树的构建第49页
   ·结果与分析第49-59页
     ·HIP57 的氨基酸序列分析第49-53页
     ·HIP57 蛋白二级结构预测第53-55页
     ·HIP57 蛋白三级结构预测第55-56页
     ·多序列比对第56-57页
     ·系统进化分析第57-59页
   ·讨论第59-60页
   ·小结第60-61页
第五章 hip57 基因的原核表达第61-76页
   ·材料和方法第61-68页
     ·菌株和质粒载体第61页
     ·主要试剂和仪器第61页
     ·培养基第61页
     ·溶液配制第61-62页
     ·HIP57 原核表达载体构建第62-63页
     ·GFP 原核表达载体构建第63-64页
     ·HIP57 与 GFP 融合表达载体构建第64-66页
     ·重组蛋白诱导表达第66页
     ·重组蛋白纯化第66-67页
     ·重组蛋白血腔活性测定第67页
     ·多克隆抗体制备第67-68页
     ·Western-blotting第68页
   ·结果与分析第68-74页
     ·HIP57 基因的原核表达第68-71页
     ·GFP 与 HIP57 基因融合表达第71-73页
     ·重组蛋白生物活性测定第73-74页
   ·讨论第74-75页
   ·小结第75-76页
第六章 HIP57 致病机理的研究第76-91页
   ·材料和方法第76-81页
     ·主要试剂和仪器第76页
     ·溶液配制第76页
     ·试虫处理和血淋巴样品采集第76页
     ·HIP57 对大蜡螟幼虫血细胞的影响第76-77页
     ·HIP57 对大蜡螟幼虫多酚氧化酶的影响第77页
     ·HIP57 对大蜡螟幼虫的免疫调节第77-79页
     ·大蜡螟幼虫血淋巴中与 HIP57 互作蛋白的捕捉第79-81页
   ·结果与分析第81-88页
     ·HIP57 对大蜡螟幼虫血细胞和脂肪体的影响第81-82页
     ·HIP57 对大蜡螟幼虫多酚氧化酶的影响第82-84页
     ·HIP57 对大蜡螟幼虫的免疫调节第84-87页
     ·大蜡螟幼虫血淋巴中与 HIP57 互作蛋白的捕捉第87-88页
   ·讨论第88-90页
   ·小结第90-91页
全文结论第91-93页
参考文献第93-107页
附录第107-120页
致谢第120-121页
作者简介第121-122页
在读期间发表的学术论文第122页

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