利用cDNA-AFLP技术分离玉米耐低磷相关基因的研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 文献综述 | 第7-15页 |
| ·植物磷营养研究背景 | 第7-8页 |
| ·磷素在植物体内的重要作用 | 第7页 |
| ·土壤中磷资源现状 | 第7-8页 |
| ·植物磷营养效率的基因型差异 | 第8页 |
| ·基因差异表达基因的分离方法 | 第8-12页 |
| ·mRNA 差异显示 | 第9页 |
| ·cDNA 代表性差异分析 | 第9-10页 |
| ·抑制性消减杂交 | 第10页 |
| ·基因表达系列分析法 | 第10-11页 |
| ·RFLP 差异显示技术 | 第11页 |
| ·cDNA 微阵列 | 第11-12页 |
| ·cDNA 扩增片段长度多态性 | 第12页 |
| ·cDNA-AFLP 技术研究进展 | 第12-15页 |
| ·cDNA - AFLP 的基本原理 | 第12页 |
| ·cDNA - AFLP 技术的特点 | 第12-13页 |
| ·cDNA - AFLP 技术内切酶与引物的选择 | 第12页 |
| ·假阳性比较低，重复性好 | 第12-13页 |
| ·可准确地反映基因间表达量的差异 | 第13页 |
| ·cDNA - AFLP 技术的应用 | 第13-15页 |
| 2 引言 | 第15-17页 |
| ·研究内容 | 第15页 |
| ·研究目的 | 第15-16页 |
| ·研究意义 | 第16页 |
| ·技术路线 | 第16-17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-26页 |
| ·试验材料 | 第17页 |
| ·仪器设备和化学试剂 | 第17页 |
| ·仪器设备 | 第17页 |
| ·化学试剂 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-25页 |
| ·低磷胁迫的处理 | 第17页 |
| ·总 RNA 的提取和检测 | 第17-18页 |
| ·双酶切 cDNA- AFLP 分析 | 第18-22页 |
| ·引物和接头的合成 | 第18-19页 |
| ·cDNA 的合成 | 第19-20页 |
| ·cDNA 双酶切和连接 | 第20-21页 |
| ·cDNA 酶切片段的预扩增 | 第21页 |
| ·预扩产物的选择扩增 | 第21-22页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第22-23页 |
| ·胶板制备 | 第22页 |
| ·预电泳 | 第22页 |
| ·电泳 | 第22-23页 |
| ·银染 | 第23页 |
| ·差异片段的回收、克隆和鉴定 | 第23-25页 |
| ·特异片段的回收 | 第23页 |
| ·二次扩增差异条带、回收及纯化 | 第23-24页 |
| ·纯化产物与 T-Vector 的连接与转化 | 第24页 |
| ·重组子的鉴定 | 第24-25页 |
| ·阳性克隆的保存与测序 | 第25页 |
| ·生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 4 结果与分析 | 第26-36页 |
| ·正常磷和低磷条件下玉米幼叶比较 | 第26页 |
| ·玉米幼叶总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·双链 cDNA 的合成 | 第27-28页 |
| ·双链 cDNA 的双酶切 | 第28页 |
| ·cDNA 酶切片段的预扩增 | 第28-29页 |
| ·预扩产物的选择扩增 | 第29-30页 |
| ·回收片段的二次 P CR | 第30页 |
| ·差异片段的测序结果 | 第30-31页 |
| ·测序片段的功能预测 | 第31-34页 |
| ·同源性分析 | 第34-36页 |
| 5 讨论 | 第36-39页 |
| ·实验材料的选择 | 第36页 |
| ·关于磷胁迫下多种代谢途径的分析 | 第36-37页 |
| ·分离片段代表的生物学意义 | 第37-39页 |
| 6 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 附录 | 第46-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
