| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1 前言 | 第9-10页 |
| 2 CYP7α1基因的研究进展 | 第10-13页 |
| ·CYP7α1基因的功能结构特点 | 第10页 |
| ·CYP7α1基因的调控机制 | 第10-12页 |
| ·CYP7α1基因在胆固醇与脂类代谢中的作用 | 第12页 |
| ·CYP7α1基因的突变、表达及遗传效应研究 | 第12-13页 |
| 3 实时荧光定量技术及其在脂类代谢相关基因检测 | 第13-15页 |
| 4 禽类脂肪沉积的规律 | 第15-16页 |
| 5 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 第二章 鸭CYP7α1基因克隆、序列分析及组织表达研究 | 第17-41页 |
| 1 材料和方法 | 第17-30页 |
| ·实验材料 | 第17-20页 |
| ·实验方法 | 第20-30页 |
| ·RNA抽提的准备工作 | 第20页 |
| ·鸭组织总RNA抽取 | 第20-21页 |
| ·引物溶液的配制 | 第21页 |
| ·基因cDNA扩增 | 第21-25页 |
| ·琼脂糖凝胶的制作及电泳检测 | 第25-26页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第26页 |
| ·载体连接 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备——氯化钙法 | 第27页 |
| ·连接产物转化 | 第27页 |
| ·质粒小规模提取法一碱裂解法 | 第27-28页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第28页 |
| ·序列的测定 | 第28页 |
| ·主要使用软件 | 第28页 |
| ·不同组织mRNA表达分析 | 第28-30页 |
| 2 结果 | 第30-39页 |
| ·鸭组织总RNA的提取 | 第30页 |
| ·鸭CYP7α1基因全长cDNA的扩增及克隆测序 | 第30-32页 |
| ·鸭CYP7α1基因生物信息学分析 | 第32-37页 |
| ·荧光定量PCR扩增的溶解曲线 | 第37-38页 |
| ·CYP7α1基因组织表达谱分析 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| ·PCR克隆基因的方法 | 第39页 |
| ·鸭CYP7α1基因的结构功能预测 | 第39-40页 |
| ·鸭CYP7α1基因组织特异性表达的分析 | 第40-41页 |
| 第三章 鸭CYP7α1基因原核表达载体的构建 | 第41-52页 |
| 1 材料与方法 | 第41-46页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-46页 |
| 2 结果 | 第46-50页 |
| ·鸭CYP7α1基因PCR扩增、酶切鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·稀有密码子统计分析 | 第47-48页 |
| ·重组质粒pET32a-CYP7α1外源蛋白的诱导表达 | 第48-49页 |
| ·表达条件的优化 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| ·原核表达系统 | 第50页 |
| ·DE3菌稀有密码子对外源基因表达效率的影响 | 第50-52页 |
| 第四章 日粮微生态制剂对樱桃谷鸭CYP7α1基因mRNA表达的影响 | 第52-57页 |
| 1 材料和方法 | 第52-54页 |
| ·试验材料与设计 | 第52页 |
| ·基础日粮组成及营养水平 | 第52-53页 |
| ·饲养管理 | 第53页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第53-54页 |
| ·样品采集 | 第54页 |
| ·肝脏中脂肪代谢关键酶mRNA水平的检测 | 第54页 |
| ·数据统计分析 | 第54页 |
| 2 结果 | 第54-55页 |
| ·鸭肝脏总RNA纯度和完整度检测 | 第54-55页 |
| ·微生态制剂对鸭肝脏中脂肪代谢关键酶mRNA水平的影响 | 第55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| ·微生态制剂对鸭部分血清生化指标及脂代谢关键酶活性的影响 | 第55-56页 |
| ·微生态制剂对鸭肝脏中脂肪代谢关键酶mRNA水平的影响 | 第56-57页 |
| 全文结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
